重组人GALNT11蛋白:功能与应用
重组人GALNT11蛋白:功能与应用
Recombinant Human GALNT11 Protein是多肽N-乙酰半乳糖胺转移酶11的重组表达形式,是介导人细胞中黏蛋白型O-连接糖基化起始过程的关键酶。
- 蛋白名称
- 重组人GALNT11(多肽N-乙酰半乳糖胺转移酶11)
- 货号
- rp369233
- 基因名称
- GALNT11
- 蛋白家族
- GalNAc转移酶(GALNT)家族
- 生物学功能
- 催化GalNAc向丝氨酸或苏氨酸残基的初始转移,起始黏蛋白型O-糖基化
- 表达系统
- 重组表达(具体宿主系统请参见产品说明书)
- 研究应用
- 糖生物学、O-糖基化通路研究、酶活性检测、蛋白相互作用研究
GALNT11是什么?为何重要?
GALNT11,又称多肽N-乙酰半乳糖胺转移酶11,是GalNAc转移酶大家族的成员之一。这类酶负责催化黏蛋白型O-连接糖基化的第一步限速反应:将N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)从供体底物UDP-GalNAc转移至靶蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基。
O-糖基化是真核细胞中最丰富、功能最多样的翻译后修饰(PTM)之一,在蛋白质折叠、稳定性、细胞间通讯、免疫识别及信号通路调控中发挥关键作用。人类GALNT家族至少包含20个成员,各成员具有不同但有时相互重叠的底物特异性和组织表达模式。
GALNT11已被证实在发育信号语境中具有重要意义,研究表明其通过对关键底物的位点特异性糖基化参与Notch及其他受体介导的通路。其表达谱和底物选择性使其成为发育生物学、肿瘤生物学和先天性疾病研究的活跃课题。
蛋白结构与生化特性
与GALNT家族其他成员相同,GALNT11是一种II型跨膜蛋白,主要定位于高尔基体——O-糖基化的主要细胞内场所。该蛋白含有短的N端胞质尾、单一跨膜结构域、茎区和较大的腔侧催化结构域。
催化结构域包含GalNAc转移酶特征性的两个关键结构基序:负责糖核苷酸结合与转移的GT-A折叠催化结构域,以及识别已糖基化底物的凝集素结构域,从而使黏蛋白型蛋白上形成密集有序的糖基化模式。
重组人GALNT11蛋白(货号:rp369233)采用重组表达技术生产,使研究人员能够在天然细胞环境之外获得成分明确、批次一致的酶制剂。具体纯度、配方缓冲液、分子量及活性规格详见产品说明书,建议研究人员查阅说明书以获取批次特异性质量控制数据。
研究应用
重组人GALNT11蛋白适用于多种需要成分明确的可溶性或重组酶制剂的体外研究应用:
- 酶活性检测:采用放射性、荧光或质谱法,以肽或糖肽为底物表征GALNT11的底物特异性。
- O-糖基化通路研究:研究GALNT11在起始特定蛋白底物(包括信号受体和胞外基质组分)黏蛋白型O-糖基化中的作用。
- 蛋白-蛋白相互作用研究:将重组蛋白作为工具,研究与伴侣蛋白、调控因子或抑制剂的相互作用。
- 药物发现与抑制剂筛选:将纯化酶用于GALNT11活性小分子抑制剂的高通量或定向筛选,与肿瘤及先天性疾病治疗项目相关。
- 结构研究:提供均一蛋白用于GALNT11催化结构域和凝集素结构域的晶体学或生物物理表征。
从事Notch信号通路、左右体轴决定、囊性肾病模型或黏蛋白糖蛋白生物学研究的科研人员将发现该重组蛋白与其实验方案高度相关。
操作、储存与质量注意事项
正确操作和储存重组蛋白对于维持活性和确保实验结果的可重复性至关重要。重组酶制剂的通用最佳实践建议如下:
- 储存:长期保存请置于-80°C。避免反复冻融,因为这会导致蛋白质变性并降低酶活性。如预计多次使用,收货后应及时分装。
- 操作条件:实验准备过程中将蛋白置于冰上。按产品说明书规定使用适当的缓冲液条件,以维持酶的稳定性和活性。
- 质量控制:每批重组人GALNT11蛋白均经过质量控制检测。请查阅产品随附的检验合格证(CoA),获取批次特异性数据,包括纯度(通常通过SDS-PAGE评估)、鉴别及适用时的生物活性信息。
- 载体蛋白:若配方中含BSA或其他稳定剂,在设计下游检测时需加以考虑,尤其是对外源蛋白敏感的检测方法。
关于具体储存温度、缓冲液组成、推荐浓度范围和有效期,请始终参阅Aladdin Scientific提供的货号rp369233产品说明书和CoA。
常见问题
GALNT11的生物学功能是什么?
GALNT11(多肽N-乙酰半乳糖胺转移酶11)催化N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)从UDP-GalNAc转移至靶蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基,起始黏蛋白型O-连接糖基化。该修饰在蛋白质稳定性、细胞信号传导和细胞间通讯中发挥重要作用。GALNT11已被证实参与包括Notch信号通路在内的发育调控途径。
重组人GALNT11蛋白适用于哪些研究应用?
重组人GALNT11蛋白(rp369233)适用于酶活性检测、O-糖基化通路研究、蛋白-蛋白相互作用分析、抑制剂筛选及结构生物学研究。对于研究黏蛋白型糖基化、Notch信号通路、发育生物学及相关疾病模型的科研人员尤为适用。
应如何储存重组人GALNT11蛋白以维持其活性?
蛋白应在-80°C下长期保存以维持稳定性。收货后应立即分装,避免反复冻融。关于精确的储存缓冲液、推荐浓度和保质期信息,请始终参阅货号rp369233的产品说明书和检验合格证。
GALNT11与GALNT家族其他成员有何区别?
尽管所有GALNT家族成员均起始黏蛋白型O-糖基化,但各成员在底物肽特异性、组织表达模式和调控功能上存在差异。GALNT11具有独特的底物偏好,并与Notch通路调控和左右体轴决定等发育信号语境有明确关联。GALNT11相对于其他家族成员的精确底物范围仍是活跃的研究领域。
参考文献
- Bennett EP, Mandel U, Clausen H, Gerken TA, Fritz TA, Tabak LA. Control of mucin-type O-glycosylation: a classification of the polypeptide GalNAc-transferase gene family. Glycobiology. 2012;22(6):736-756. doi:10.1093/glycob/cwr182
- Schjoldager KT, Clausen H. Site-specific protein O-glycosylation modulates proprotein processing - deciphering specific functions of the large polypeptide GalNAc-transferase gene family. Biochimica et Biophysica Acta. 2012;1820(12):2079-2094.
- Boskovski MT, Yuan S, Pedersen NB, et al. The heterotaxy gene GALNT11 glycosylates Notch to orchestrate cilia type and laterality. Nature. 2013;504(7480):456-459. doi:10.1038/nature12723
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