重组人GFRA2蛋白:研究使用指南
重组人GFRA2蛋白:研究使用指南
Recombinant Human GFRA2 Protein是一种研究级重组共受体,专为支持GDNF家族配体信号传导、神经营养素结合及神经元和非神经元模型系统中RET激酶通路激活研究而设计。
- 产品名称
- 重组人GFRA2蛋白
- 货号
- rp365087
- 蛋白家族
- GDNF家族受体α(GFRα)共受体家族
- 主要配体
- 神经营养素(NRTN);亦与GDNF家族成员相互作用
- 信号伴侣
- RET受体酪氨酸激酶
- 预期用途
- 仅供研究使用(RUO);不用于诊断或治疗目的
- 供应商参考编号
- absea#PP-626
GFRA2的背景与生物学意义
GDNF家族受体α2(GFRA2,又称GFRα2或RETL2)是一种糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的细胞表面共受体,属于GFRα蛋白家族成员。它是神经营养素(NRTN)——胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)家族配体(GFLs)之一——的首选高亲和力结合伴侣。
GFRA2与神经营养素结合后,招募并激活跨膜受体酪氨酸激酶RET,启动下游信号级联反应,包括MAPK、PI3K/AKT和PLC-γ通路。这些信号调控神经元存活、分化、轴突生长及突触可塑性,尤其在副交感神经元、肠神经元和感觉神经元中发挥重要作用。
GFRA2在发育过程中及成体多种组织中均有表达,包括神经系统及多种外周器官。对GFRA2生物学的研究对于理解神经退行性疾病、肠神经系统发育及痛觉通路具有重要意义。
产品操作与储存建议
为维持重组人GFRA2蛋白的生物活性和结构完整性,严格遵守操作和储存规程至关重要。以下为此类重组蛋白的通用最佳操作指南:
- 收货后:检查产品,若发现瓶盖或瓶壁有液态冷凝水,请在开瓶前短暂离心。
- 复溶:如为冻干品,请使用无菌磷酸盐缓冲液(PBS)或产品说明书中规定的缓冲液进行复溶。复溶前将样品瓶平衡至室温,以减少聚集。
- 储存温度:长期储存置于−20 °C或−80 °C。避免反复冻融,以免降低活性并促进聚集。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的小份分装,避免反复冻融。
- 工作液:在含载体蛋白的缓冲液(如含0.1% BSA的PBS)中稀释至所需工作浓度,以在实验过程中稳定蛋白。
注意:请务必参阅货号rp365087随附的具体产品说明书,以获取批次特定的储存条件、浓度和有效期信息。
推荐研究应用
重组人GFRA2蛋白适用于多种体外及细胞实验研究应用,代表性用途包括:
- 配体结合实验:利用表面等离子共振(SPR)、基于ELISA的结合实验或磁珠多重检测平台,表征GFRA2与神经营养素或其他GFL家族成员相互作用的结合亲和力和动力学。
- 细胞信号传导研究:使用可溶性重组GFRA2研究细胞培养模型中的RET反式激活、下游MAPK和AKT磷酸化以及神经元存活。
- 功能阻断与中和:将该蛋白作为竞争性抑制剂或诱饵受体,以区分GFRA2介导的信号与其他共受体通路。
- 蛋白质相互作用研究:利用pull-down实验、共免疫沉淀或邻近连接方法鉴定GFRA2的新型相互作用蛋白。
- ELISA和Western blot标准品:作为检测内源性GFRA2免疫实验中的阳性对照或标准曲线参考。
- 药物发现筛选:整合到高通量实验格式中,筛选GFRA2–神经营养素–RET信号轴调节剂的小分子文库。
质量、纯度与法规注意事项
阿拉丁科学重组人GFRA2蛋白(rp365087)按研究级标准生产。主要质量注意事项包括:
- 纯度:此类重组蛋白通常通过SDS-PAGE和/或HPLC分析进行验证。请参阅每批次随附的质量检验报告(CoA)以获取确认的纯度数据。
- 内毒素检测:对于细胞实验,应评估并最小化内毒素水平。请查阅批次特定CoA中的内毒素值。
- 生物活性:可通过细胞生物活性实验(测量响应细胞系中的RET磷酸化或神经突生长)验证功能活性。请参阅产品说明书中的活性规格。
- 法规状态:本产品仅供研究使用(RUO),不适用于人类或兽医诊断或治疗应用,未经监管机构评估用于临床。
- 批间一致性:如实验间一致性是关键要求,请联系阿拉丁科学客户支持,获取多批次资质数据。
常见问题
GFRA2的主要配体是什么?它如何转导信号?
GFRA2的主要配体是神经营养素(NRTN),属于GDNF家族配体成员。神经营养素结合后,GFRA2–NRTN复合物与RET受体酪氨酸激酶结合,触发RET自磷酸化及下游通路(包括MAPK、PI3K/AKT和PLC-γ)的激活,从而调控神经元存活、分化和轴突生长。
如何复溶和储存重组人GFRA2蛋白以保持其活性?
若为冻干品,请先将样品瓶平衡至室温,再用无菌PBS或产品说明书指定的缓冲液进行复溶。复溶后立即分装为单次使用量,储存于−20 °C或−80 °C。避免反复冻融,因为这会降低生物活性并导致聚集。请务必参阅批次特定CoA以获取精确的储存说明。
重组人GFRA2蛋白能否作为诱饵受体阻断神经营养素信号传导?
是的,缺乏膜锚定的可溶性重组GFRA2可通过螯合神经营养素、阻止其与细胞表面GFRA2–RET复合物结合,发挥竞争性诱饵受体的作用。这种方法被广泛用于研究中,以解析GFRA2–神经营养素轴对细胞信号传导的特定贡献。最佳阻断浓度应在每种实验体系中通过实验确定。
该产品是否适用于体内动物研究?
重组人GFRA2蛋白(rp365087)仅供研究使用,主要针对体外应用进行验证。其用于体内给药的适用性取决于批次特定的纯度、内毒素水平和制剂。计划在动物研究中使用本产品的研究人员应查阅CoA,并咨询阿拉丁科学技术支持以获取指导。
参考文献
- Airaksinen MS, Saarma M. The GDNF family: signalling, biological functions and therapeutic value. Nature Reviews Neuroscience. 2002;3(5):383-394. doi:10.1038/nrn812
- Baloh RH, Enomoto H, Johnson EM Jr, Milbrandt J. The GDNF family ligands and receptors - implications for neural development. Current Opinion in Neurobiology. 2000;10(1):103-110. doi:10.1016/s0959-4388(99)00048-3
- Sariola H, Saarma M. Novel functions and signalling pathways for GDNF. Journal of Cell Science. 2003;116(Pt 19):3855-3862. doi:10.1242/jcs.00786
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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