重组人GFUS蛋白:特性与应用
重组人GFUS蛋白:特性与应用
Recombinant Human GFUS Protein是GDP-岩藻糖从头合成通路中的关键酶,可帮助研究人员在体外研究岩藻糖基化机制、糖基化相关疾病及潜在治疗靶点。
- 产品名称
- 重组人GFUS蛋白
- 货号
- rp370814
- 基因名称
- GFUS(又称TSTA3、FX)
- 蛋白功能
- 催化GDP-岩藻糖从头合成通路的最后两步反应(氧化还原酶活性)
- 物种来源
- 人(智人)
- 表达系统
- 重组表达(宿主系统待确认,详见审核标注)
- 研究领域
- 糖生物学、岩藻糖基化、核苷酸糖代谢、肿瘤生物学
背景:GFUS基因与蛋白简介
GFUS(GDP-岩藻糖合酶),又名TSTA3或FX,编码一种双功能酶,负责催化GDP-L-岩藻糖从头合成通路的最后两步反应。该酶首先通过差向异构酶活性将GDP-4-酮-6-脱氧-D-甘露糖转化为GDP-4-酮-6-脱氧-L-半乳糖,再经NADPH依赖的还原酶活性将其转化为GDP-L-岩藻糖。
岩藻糖基化——即向糖蛋白和糖脂添加岩藻糖残基——是调控细胞黏附、免疫识别、选择素介导的白细胞迁移及肿瘤信号传导的重要翻译后修饰。GFUS在该通路中处于核心调控节点,是基础研究以及癌症、炎症性疾病和先天性糖基化障碍研究的重要靶点。
重组人GFUS蛋白的生化特性
重组人GFUS蛋白(rp370814)通过重组表达系统生产,旨在保留内源性人类蛋白的天然双功能酶活性。作为短链脱氢酶/还原酶(SDR)超家族成员,GFUS在其还原酶活性中需要NADPH作为辅因子。
主要生化特性包括:
- 双重酶活性:3,5-差向异构酶和4-还原酶功能对同一底物依次发挥作用。
- 辅因子需求:还原酶步骤依赖NADPH。
- 寡聚状态:据报道,GFUS在天然条件下以同源四聚体形式发挥功能;研究人员应在其特定检测条件下验证重组制备物的寡聚状态。
注意:rp370814的具体纯度等级、配方缓冲液、储存条件及分子量确认信息,请参阅阿拉丁科学提供的最新产品说明书。
研究应用
重组人GFUS蛋白适用于多种体外生化及细胞生物学应用,包括但不限于:
- 酶活性检测:GDP-岩藻糖合酶动力学表征;针对岩藻糖基化通路的药物发现中的底物和抑制剂筛选。
- 糖生物学研究:探究细胞岩藻糖基化水平的调控及其对糖蛋白功能的下游影响。
- 肿瘤生物学:GFUS在某些肿瘤中表达异常;重组蛋白支持肿瘤相关聚糖重塑的机制研究。
- 结构研究:作为SDR家族的典型成员,GFUS蛋白可用于晶体学或冷冻电镜研究,以支持基于结构的药物设计。
- 抗体制备与验证:作为抗原用于产生或验证抗GFUS抗体。
从事免疫学研究的科研人员也可能关注GFUS,因为选择素配体的岩藻糖基化对炎症过程中白细胞滚动和外渗至关重要。
操作、储存与质量注意事项
重组蛋白需妥善操作以维持其活性。以下为适用于重组人GFUS蛋白的通用最佳操作规范:
- 储存:长期保存请置于–80 °C。避免反复冻融,以防蛋白变性和酶活性降低。收到后请及时分装。
- 复溶:如以冻干形式供应,请按产品说明书指定的缓冲液复溶。开瓶前短暂离心,使内容物集中于管底。
- 操作条件:实验准备过程中将蛋白置于冰上。所有活性检测均应设置适当的阳性和阴性对照。
- 质量保证:阿拉丁科学重组蛋白经质量控制检测;请查阅检测报告(CoA)获取批次特异性纯度、活性及内毒素数据。
操作、配方及储存的权威指导信息,请以rp370814当前产品说明书为准。
常见问题
GFUS蛋白的生物学功能是什么?
GFUS编码一种双功能酶——GDP-岩藻糖合酶,通过连续的3,5-差向异构酶和NADPH依赖的4-还原酶活性,催化GDP-L-岩藻糖从头合成通路的最后两步反应。GDP-岩藻糖是所有岩藻糖基转移酶的必需供体底物,因此GFUS是细胞岩藻糖基化的主要调控因子。
重组人GFUS蛋白(rp370814)采用何种表达系统生产?
rp370814所用的具体表达宿主请以阿拉丁科学最新产品说明书或检测报告为准,不同批次可能采用大肠杆菌、昆虫细胞或哺乳动物细胞等不同表达系统。如需最新规格信息,请联系阿拉丁科学技术支持团队。
重组人GFUS蛋白适用于哪些研究应用?
重组人GFUS蛋白适用于体外酶活性检测、抑制剂和底物筛选、结构生物学研究、糖生物学研究、肿瘤生物学研究,以及作为抗体制备或验证的抗原。对于研究岩藻糖基化、核苷酸糖代谢及聚糖介导的细胞信号传导的科研人员尤为适用。
如何储存重组人GFUS蛋白以维持其活性?
长期储存请将蛋白置于–80 °C,收到后及时分装以避免反复冻融。实验过程中请将蛋白置于冰上。储存和操作的权威指导,请以rp370814产品说明书为准。
重组人GFUS蛋白是否适合用作抗原?
是的,重组蛋白常用作免疫原,用于制备多克隆或单克隆抗体,也可用于ELISA和Western blot等抗体验证实验。研究人员在使用前应参阅产品说明书确认rp370814的抗原性和纯度规格。
参考文献
- Tonetti M, Sturla L, Bisso A, Benatti U, De Flora A. Synthesis of GDP-L-fucose by the human FX protein. J Biol Chem. 1996;271(44):27274-27279.
- Becker DJ, Lowe JB. Fucose: biosynthesis and biological function in mammals. Glycobiology. 2003;13(7):41R-53R.
- Lütteke T, et al. GLYCOSCIENCES.de: an Internet portal to support glycomics and glycobiology research. Glycobiology. 2006;16(5):71R-81R.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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