重组人GK5蛋白:特性与研究应用
重组人GK5蛋白:特性与研究应用
Recombinant Human GK5 Protein是一种研究级重组激酶试剂,专为支持人类生物学中丝氨酸/苏氨酸磷酸化级联、MAP激酶通路调控及相关信号转导研究而设计。
- 产品名称
- 重组人GK5蛋白
- 货号
- rp367952
- 蛋白类别
- 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(MAP4K家族成员)
- 物种来源
- 人(智人,Homo sapiens)
- 表达系统
- 重组表达系统(具体宿主细胞系待确认,详见审核标记)
- 主要应用
- 生化检测、激酶活性研究、信号转导研究
- 储存与操作
- 具体储存条件及复溶指南请参阅产品数据表
GK5是什么?为何重要?
GK5,又称生发中心激酶5(GCK-V)或MAP4K5,属于哺乳动物不育-20(STE20)样丝氨酸/苏氨酸激酶超家族,具体归类于MAP4K(丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶)亚组。这类激酶作为丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号级联的上游调控因子,在应激反应和凋亡通路中发挥关键作用。
GK5含有典型的N端激酶催化结构域和C端调控区域。通过磷酸化下游底物,GK5参与调控细胞对胞外刺激(包括细胞因子和环境应激源)的应答。深入理解GK5功能对免疫细胞信号转导、凋亡调控及肿瘤生物学等研究领域具有重要意义。
重组人GK5蛋白的生化特性
重组人GK5蛋白(货号:rp367952)采用重组DNA技术生产,可提供成分明确、批次重现性良好的激酶试剂,适用于体外研究应用。作为重组蛋白,它使研究人员能够在受控实验室条件下研究GK5的酶活性、底物特异性及抑制剂相互作用。
主要生化特性包括:丝氨酸/苏氨酸激酶活性、以ATP作为磷酸基团供体,以及催化活性依赖二价阳离子(如Mg²⁺或Mn²⁺)作为辅因子——这些均为MAP4K家族的共同特性。研究人员应查阅官方产品数据表(参考编号:absea#PP-9164),以获取确认的分子量、纯度规格、制剂详情及推荐复溶缓冲液,上述参数对实验重现性至关重要。
研究应用
重组人GK5蛋白适用于多种体外生化及细胞生物学研究,包括:
- 激酶活性检测:通过测定特定肽或蛋白底物的磷酸化水平,表征GK5酶学功能并确定动力学参数。
- 抑制剂筛选:在靶向MAPK相关通路的药物发现流程中,评估小分子抑制剂对GK5的选择性和活性。
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:以重组GK5为诱饵蛋白,通过pull-down或共免疫沉淀方法,鉴定MAP4K信号网络中的结合伴侣。
- 结构生物学:支持晶体学或冷冻电镜研究,阐明GK5的三维结构与催化机制。
- 抗体验证:作为阳性对照抗原,验证用于Western blot、ELISA或免疫荧光实验的抗GK5抗体。
请始终参阅产品数据表,以获取经验证的特定应用条件及推荐使用浓度。
操作、储存与质量注意事项
为维持重组人GK5蛋白的活性与完整性,研究人员应遵循以下重组激酶蛋白的通用最佳操作规范:
- 储存:按产品数据表规定的温度储存(长期储存通常为−20 °C或−80 °C)。避免反复冻融,以防激酶活性下降。
- 复溶:严格按照数据表说明配制复溶缓冲液并控制蛋白浓度,以确保最佳溶解性和活性。
- 分装:首次解冻后制备单次使用分装量,以减少活性损失。
- 检测条件:在所有激酶检测实验中设置适当的阳性和阴性对照,以确保数据质量和实验重现性。
具体纯度、制剂及质量控制数据(如SDS-PAGE、活性验证)详见官方产品数据表。如需特定应用指导,请联系阿拉丁科学技术支持团队。
常见问题
GK5与其他MAP4K家族成员有何区别?
GK5(MAP4K5)与MAP4K家族共享保守的N端激酶结构域,但其C端调控序列和特定底物偏好存在差异,从而在MAPK信号网络中发挥独特作用。GK5相对于MAP4K1–4和MAP4K6等旁系同源物的详细底物谱及相互作用特征,仍需参阅一手文献进行确认,相关功能差异尚在持续研究中。
重组人GK5蛋白适用于细胞实验吗?
重组人GK5蛋白(rp367952)主要用于体外生化应用,如激酶活性检测和抑制剂筛选。对于细胞实验,编码GK5的表达载体或内源性GK5表达细胞系可能更为适合。如需经验证的细胞实验应用数据,请查阅产品数据表或联系阿拉丁科学技术支持。
如何验证重组人GK5蛋白的活性?
可采用体外磷酸化检测法评估激酶活性:使用经验证的底物肽和ATP,通过放射性同位素、荧光或发光法检测磷酸基团的掺入。实验中应设置已知活性激酶作为阳性对照,热灭活GK5样品作为阴性对照。阿拉丁科学产品数据表(absea#PP-9164)应提供活性验证数据;如需进一步指导,请联系技术支持团队。
GK5激酶检测推荐使用哪种缓冲液和辅因子?
与大多数丝氨酸/苏氨酸激酶类似,GK5通常需要ATP作为磷酸基团供体,并依赖Mg²⁺或Mn²⁺等二价阳离子作为催化辅因子。标准激酶检测缓冲液通常含有HEPES或Tris-HCl(pH 7.4–7.5)、MgCl₂(5–10 mM)、ATP(50–200 µM)及用于蛋白稳定的DTT。具体优化条件请以官方产品数据表为准,因制剂要求可能有所不同。
参考文献
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GK5 Protein (rp367952). Product datasheet absea#PP-9164. Aladdin Scientific.
- Dan I, Watanabe NM, Kusumi A. The Ste20 group kinases as regulators of MAP kinase cascades. Trends Cell Biol. 2001;11(5):220-230.
- Chuang HC, Wang X, Tan TH. MAP4K Family Kinases in Immunity and Inflammation. Adv Immunol. 2016;129:277-314.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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