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重组人GKAP1蛋白:特性与应用

Recombinant Human GKAP1 Protein是一种以重组方式生产的cGMP依赖性蛋白激酶锚定蛋白,适用于生化检测、蛋白质相互作用研究及cGMP介导的信号通路研究。

蛋白质名称
G激酶锚定蛋白1(GKAP1)
别名
cGMP依赖性蛋白激酶锚定蛋白,GKAP
物种来源
人(智人)
蛋白质功能
将cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)锚定至特定亚细胞区域,促进空间调控的cGMP信号传导
表达系统
重组表达系统(具体宿主系统详见产品数据表)
主要研究应用
蛋白质相互作用检测、cGMP信号传导研究、激酶锚定研究、Western blot、ELISA
货号
rp375060

GKAP1是什么?为何重要?

GKAP1(G激酶锚定蛋白1)是A激酶锚定蛋白(AKAP)超家族的成员,可特异性与cGMP依赖性蛋白激酶(PKG,又称蛋白激酶G)相互作用。通过将PKG拴系于特定的亚细胞位置,GKAP1确保cGMP信号能够以高度的空间和时间精确性进行转导。这种亚细胞靶向对于调控多种生理过程至关重要,包括平滑肌松弛、血小板聚集、心脏功能及神经元信号传导。

与许多锚定cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)的AKAP不同,GKAP1对cGMP/PKG轴具有选择性,使其成为研究一氧化氮(NO)和利钠肽信号级联分子机制的独特研究工具。cGMP信号失调与心血管疾病、肺动脉高压及神经系统疾病有关,凸显了研究GKAP1相互作用的病理生理学意义。

重组人GKAP1蛋白的生化特性

重组人GKAP1蛋白(货号:rp375060)采用重组表达平台生产,以确保批次间质量和生物活性的一致性。研究人员应查阅产品数据表,了解分子量、纯度等级、配方缓冲液、储存条件及推荐复溶步骤等经确认的详细参数,这些参数对实验重复性至关重要。

此类重组蛋白通常评估的关键质量属性包括:

  • 纯度:通过SDS-PAGE和/或HPLC评估,确认无明显杂质。
  • 生物活性:通过结合检测验证,确认与PKG或相关结合配体的相互作用。
  • 制剂:冻干或液态制剂,置于稳定缓冲液中;具体细节因产品批次而异。
  • 储存:通常在-20°C或-80°C下储存;应避免反复冻融循环以维持蛋白质完整性。

每次使用前,请务必参阅随批次提供的质量检验报告(CoA),获取批次特异性质量数据。

GKAP1蛋白的研究应用

重组人GKAP1蛋白非常适合用于以cGMP信号传导和激酶锚定生物学为核心的多种体外研究应用:

  • 蛋白质-蛋白质相互作用研究:GKAP1可在pull-down实验、共免疫沉淀(co-IP)或表面等离子共振(SPR)实验中用作诱饵或猎物,以绘制其相互作用组,尤其是与PKG同工型的相互作用。
  • 结合与竞争检测:利用重组GKAP1的生化检测可定量测定结合亲和力,并鉴定能破坏GKAP1–PKG相互作用的小分子或多肽,支持药物发现工作。
  • Western Blot与ELISA标准品:该重组蛋白可作为检测内源性GKAP1免疫检测中的阳性对照或标准曲线抗原。
  • 结构与生物物理研究:重组GKAP1可支持晶体学、核磁共振(NMR)或冷冻电镜(cryo-EM)研究,旨在阐明激酶锚定的结构基础。
  • 无细胞重构:用于在体外重构cGMP信号复合物,在完整细胞的复杂性之外进行机理研究。

上述应用使重组人GKAP1蛋白成为心血管、神经系统及细胞信号转导研究项目中的多功能试剂。

操作、储存与质量注意事项

为确保重组人GKAP1蛋白在下游应用中的最佳性能,研究人员应遵循以下最佳操作规范:

  • 复溶:若以冻干形式提供,应使用无菌超纯水或数据表中推荐的缓冲液进行复溶。开瓶前请将瓶子平衡至室温。
  • 分装:复溶后立即分装成单次使用的等份,以尽量减少反复冻融导致的蛋白质降解。
  • 储存温度:长期储存于-80°C。数据表规定的短期储存可在-20°C下进行。
  • 避免去污剂和极端pH:非离子型去污剂和极端pH值会使蛋白质变性并损害活性;请遵循CoA中提供的缓冲液指南。
  • 载体蛋白:对于极低浓度工作液,可按应用方案的规定添加载体蛋白(如BSA),以防止吸附损失。

批次特异性的纯度、活性和内毒素数据均在CoA中提供。如需特定应用指导或定制配方需求,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。

常见问题

GKAP1的生物学功能是什么?

GKAP1(G激酶锚定蛋白1)作为支架蛋白,将cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)锚定至特定亚细胞区域。这种空间定位能够实现对一氧化氮和利钠肽受体激活下游产生的cGMP信号进行精确、局域性转导。

重组人GKAP1蛋白(rp375060)采用哪种表达系统生产?

rp375060的具体重组表达宿主系统详见产品数据表。请参阅数据表或联系Aladdin Scientific技术支持获取经确认的表达系统信息,因为这可能影响蛋白质的糖基化状态及在某些检测格式中的活性。

如何储存重组人GKAP1蛋白以保持其活性?

长期储存时,请将蛋白质保存在-80°C。复溶后应立即分装成单次使用等份,避免反复冻融循环。请参阅批次特异性CoA,获取确切的储存缓冲液组成、推荐工作浓度及保质期信息。

重组人GKAP1蛋白能否用作Western blot实验的阳性对照?

是的,重组人GKAP1蛋白适合用作Western blot和ELISA实验的阳性对照抗原。它能在预期分子量处提供清晰条带,可在检测细胞或组织裂解液中内源性GKAP1时用于验证抗体特异性和检测灵敏度。

重组人GKAP1蛋白是否适用于药物发现筛选实验?

重组人GKAP1蛋白非常适合体外药物发现应用,特别是用于鉴定能破坏GKAP1–PKG蛋白质-蛋白质相互作用的小分子或多肽。它可被整合至荧光偏振、SPR或AlphaScreen结合检测实验中。在设计筛选方案前,请对照产品数据表规格确认实验兼容性。

参考文献

  1. Welch EJ, Jones BW, Scott JD. Networking with AKAPs: context-dependent regulation of anchored enzymes. Mol Interv. 2010;10(2):86-97.
  2. Francis SH, Busch JL, Corbin JD, Sibley D. cGMP-dependent protein kinases and cGMP phosphodiesterases in nitric oxide and cGMP action. Pharmacol Rev. 2010;62(3):525-563.
  3. Aladdin Scientific. Recombinant Human GKAP1 Protein, SKU rp375060. Product Datasheet. Aladdin Scientific; [current version].

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人GKAP1蛋白:特性与应用》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月30日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-gkap1-protein-properties-applications.html
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