重组人GNG11蛋白:研究指南与应用
重组人GNG11蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human GNG11 Protein是G蛋白γ11亚基(GNG11)的异源表达重组形式,是参与多种细胞类型跨膜信号转导通路的异三聚体G蛋白的关键组成部分。
- 产品名称
- 重组人GNG11蛋白
- 货号
- rp368015
- 蛋白家族
- G蛋白γ亚基家族(GNG家族)
- 生物学功能
- 异三聚体G蛋白的组成亚基;参与GPCR介导的信号转导
- 主要研究应用
- 蛋白相互作用研究、信号转导研究、生化检测、结构研究
- 储存建议
- 请参照供应商质检报告;通常储存于-80°C;避免反复冻融
GNG11的生物学背景
GNG11(G蛋白γ11亚基)是异三聚体鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)γ亚基家族的成员。异三聚体G蛋白由α(Gα)、β(Gβ)和γ(Gγ)三个亚基组成,是细胞信号转导中关键的分子开关。当细胞外配体激活G蛋白偶联受体(GPCR)后,Gα亚基将GDP替换为GTP,导致Gα与Gβγ二聚体解离。游离的Gβγ二聚体(包括含GNG11的复合体)随后可与下游效应分子相互作用,包括离子通道、腺苷酸环化酶、磷脂酶C-β亚型及G蛋白偶联内向整流钾通道(GIRK)。
人类GNG11基因编码一个相对较小的蛋白,在多种人体组织中广泛表达。其γ亚基功能依赖于与Gβ亚基形成稳定二聚体;该Gβγ二聚体作为功能单元调控多种下游信号级联。研究表明GNG11参与血管生成、细胞增殖及潜在的衰老相关基因表达调控等过程。
生化特性与重组表达
重组人GNG11蛋白(货号:rp368015,来源编号absea#PQ-849)采用重组表达系统生产,以确保批次间的一致性和可重复性。包括GNG11在内的G蛋白γ亚基是典型的小分子疏水蛋白,在天然细胞环境中经历翻译后脂质修饰(C末端CaaX基序的异戊二烯化)。该修饰将Gγ锚定于质膜内侧并促进Gβγ二聚体的形成。
作为研究用重组蛋白,GNG11可能因表达系统不同而缺乏天然脂质修饰。研究人员应查阅每批次随附的质检报告(CoA),以确认纯度、制剂缓冲液组成、浓度及相关质控数据(如SDS-PAGE或功能性检测结果)。正确操作——包括在推荐缓冲液中复溶、分装以减少冻融循环,以及在-80°C储存——对于维持蛋白完整性和活性至关重要。
实验应用
重组人GNG11蛋白适用于多种涉及G蛋白信号传导的体外研究应用:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:GNG11可用于下拉实验、共免疫沉淀实验或表面等离子体共振(SPR)研究,以图绘与Gβ亚基及下游效应蛋白的相互作用网络。
- 生化与结构研究:该重组蛋白可作为抗体验证的抗原、Western blot分析的参考标准,或结构生物学研究中重构G蛋白复合体的组成成分。
- 功能重构实验:在无细胞体系中,重组GNG11可与Gα和Gβ亚基结合,重构异三聚体G蛋白复合体,用于GTPase活性检测或效应因子偶联实验。
- 药物发现支持:作为GPCR信号通路的组成成分,GNG11与靶向G蛋白偶联通路的筛选活动相关,包括针对Gβγ靶向小分子的研究。
研究人员应针对每种具体应用经验性优化蛋白浓度和缓冲液条件,因为实验结果因实验背景不同而存在差异。
操作、储存与质量注意事项
为维持重组人GNG11蛋白的完整性和活性,请遵循以下最佳操作规范:
- 储存温度:收到后立即于-80°C储存。根据制剂不同,短期可在-20°C保存;请查阅CoA获取批次特定指导。
- 分装:首次解冻后,将蛋白分装为单次用量,避免反复冻融导致聚集和活性损失。
- 复溶:如为冻干粉剂型,按CoA规定缓冲液复溶。开瓶前使瓶子恢复至室温,轻柔复溶,勿涡旋振荡。
- 载体蛋白:若蛋白浓度较低或为不含载体蛋白的制剂,可考虑添加BSA(0.1–1%)以在储存和实验使用过程中稳定蛋白。
- 避免去垢剂:由于γ亚基的疏水性,操作缓冲液中的去垢剂浓度应谨慎控制,过量去垢剂可能破坏蛋白结构。
- 批次间验证:每批新货在关键实验中使用前,务必通过正交检测(如SDS-PAGE、功能检测)验证试剂性能。
常见问题
GNG11是什么?它在细胞信号研究中为何重要?
GNG11编码异三聚体G蛋白的γ11亚基,是将激活的GPCR信号传递至胞内效应分子的关键分子开关。含GNG11的Gβγ二聚体调控离子通道、酶及其他下游靶点,使其成为研究GPCR通路生物学、药物靶点鉴定和信号转导机制的重要蛋白。
重组人GNG11蛋白(rp368015)采用何种表达系统生产?
rp368015的具体表达系统应通过查阅Aladdin Scientific提供的产品说明书或质检报告确认。重组G蛋白亚基常用的表达系统包括大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物表达平台,各系统提供不同的翻译后修饰特征。如需批次特定信息,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
如何复溶和储存重组人GNG11蛋白以维持其活性?
收到后立即于-80°C储存。若为冻干剂型,按质检报告推荐缓冲液复溶,开瓶前使样品恢复至室温后轻柔重悬。将复溶蛋白分装为单次用量,避免反复冻融。关于精确缓冲液组成和浓度指导,请参阅产品专属CoA。
重组人GNG11蛋白是否可用于抗体验证?
是的,重组GNG11蛋白适用于Western blot、ELISA及其他基于免疫检测的抗体验证工作流程中的阳性对照抗原。使用前请确认重组蛋白与目标抗体所识别的表位相兼容,并通过SDS-PAGE确认纯度,再用于关键验证实验。
重组人GNG11蛋白是否适用于结构生物学应用?
重组人GNG11蛋白可作为重构异三聚体G蛋白复合体的组成成分,用于X射线晶体学或冷冻电子显微镜等结构生物学研究。但研究人员应注意,重组制品中GNG11的天然异戊二烯化修饰可能缺失,这可能影响膜结合和复合体装配。强烈建议在结构实验前验证复合体形成和活性。
参考文献
- Gilman AG. G proteins: transducers of receptor-generated signals. Annual Review of Biochemistry. 1987;56:615-649. doi:10.1146/annurev.bi.56.070187.003151
- Hurowitz EH, et al. Genomic characterization of the human heterotrimeric G protein alpha, beta, and gamma subunit genes. DNA Research. 2000;7(2):111-120. doi:10.1093/dnares/7.2.111
- Smrcka AV. G protein betagamma subunits: central mediators of G protein-coupled receptor signaling. Cellular and Molecular Life Sciences. 2008;65(14):2191-2214. doi:10.1007/s00018-008-8006-5
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