重组人GOLGA6D蛋白:制备与使用实验方案
重组人GOLGA6D蛋白:制备与使用实验方案
Recombinant Human GOLGA6D Protein是一种用于高尔基体相关自身抗原家族生化及细胞生物学研究的研究级试剂,本实验方案为其正确复溶、储存、处理及实验应用提供分步指导。
- 产品名称
- 重组人GOLGA6D蛋白
- 货号
- rp377487
- 蛋白家族
- 高尔基体自身抗原(GOLGA)家族,与高尔基体结构相关
- 表达系统
- 重组表达(具体表达系统请参阅产品数据表确认)
- 推荐储存条件
- 冻干蛋白建议储存于-20°C至-80°C;避免反复冻融(请参阅数据表确认)
- 供应商
- Aladdin Scientific
GOLGA6D概述及其研究意义
GOLGA6D(Golgin A6家族成员D)属于定位于高尔基体的卷曲螺旋Golgin蛋白家族。该家族成员在维持高尔基体形态、介导囊泡转运以及支持分泌途径中的膜融合事件方面发挥着重要的结构与功能作用。重组人GOLGA6D蛋白(rp377487)使研究人员能够在受控的体外条件下研究上述生物学过程。
作为一种用于研究目的的重组蛋白,GOLGA6D在研究高尔基体组织、高尔基基质内蛋白质相互作用以及高尔基体定位抗原潜在自身免疫关联方面具有重要价值。从事细胞生物学、生物化学和免疫学研究的科研人员可将本试剂应用于多种检测格式。
复溶与储存实验方案
所需材料:无菌去离子水或产品数据表中规定的缓冲液、微量离心管、冰、移液器及分装容器。
复溶步骤:
- 从储存处取出小瓶,开封前置于室温平衡约10–15分钟,以减少冷凝水。
- 短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),使管壁和管盖上的冻干物沉降。
- 按产品数据表规定的推荐复溶体积,将无菌缓冲液或水缓慢直接加入冻干饼上。切勿涡旋,轻柔旋转或用移液器吹打使其溶解。
- 在室温静置5–10分钟,确保完全溶解。
- 使用前再次短暂离心,去除不溶性颗粒。
储存建议:复溶后,制备单次使用的分装液,避免反复冻融,以防蛋白活性和完整性受损。冻干蛋白按产品数据表指示储存于-20°C或-80°C。复溶后蛋白如需长期储存,置于-80°C;短期使用(不超过1周)可置于4°C。储存条件请以Aladdin Scientific官方产品数据表(rp377487)为准。
注:具体缓冲液成分、复溶体积及储存时长以rp377487官方产品数据表为准。
实验应用指南
重组人GOLGA6D蛋白(rp377487)仅供体外研究使用。研究人员应针对每种具体检测方法确定最适工作浓度。以下为常见应用类型的一般性指导:
- SDS-PAGE / 蛋白质印迹(Western Blot):使用复溶蛋白在适当研究浓度下验证分子量和纯度。与分子量标记物及适当阳性/阴性对照一起电泳。
- ELISA:GOLGA6D可作为夹心或间接ELISA格式中的包被抗原或标准品。通过实验优化包被浓度和封闭条件。
- 蛋白质相互作用研究(如共免疫沉淀、pull-down实验):对蛋白用量进行滴定以减少非特异性结合。设置不含重组蛋白的阴性对照。
- 免疫学检测:该重组蛋白可作为抗原用于抗体制备,或用于靶向高尔基体相关抗原的自身抗体检测板。
实验时务必设置相关阳性和阴性对照。在开展大规模研究前,先通过预实验优化检测条件。具体验证应用详情请参阅相关文献及产品数据表。
质量控制与操作注意事项
质量控制:Aladdin Scientific的重组人GOLGA6D蛋白按研究级标准生产和质控。蛋白在出货前经纯度和生物活性评估;具体质控数据(如纯度百分比、内毒素水平、活性检测结果)详见rp377487产品数据表。研究人员应查阅每批产品附带的检验合格证(CoA)。
操作注意事项:
- 尽量在冰上或冷室中操作蛋白,以维持稳定性。
- 使用低蛋白结合离心管和吸头,减少因吸附造成的蛋白损失。
- 避免长时间暴露于室温。
- 除非数据表注明属正常现象,否则不得使用出现浑浊或可见聚集的蛋白。
- 本产品仅供研究使用(RUO),未经批准用于诊断、治疗或临床操作。
安全性:遵守标准实验室安全规程。使用前请查阅安全数据表(SDS)。操作时佩戴适当个人防护装备(PPE),包括手套、实验服和护目镜。
常见问题
GOLGA6D是什么?为何对研究具有重要意义?
GOLGA6D(Golgin A6家族成员D)是属于Golgin家族的卷曲螺旋蛋白,定位于高尔基体,参与高尔基体结构维持及分泌途径中的囊泡转运。研究人员使用重组GOLGA6D在体外研究上述过程,并探索其与高尔基体相关抗原自身免疫病症的潜在关联。
如何复溶重组人GOLGA6D蛋白(rp377487)?
将小瓶升至室温后短暂离心收集冻干物,按产品数据表所示缓慢加入推荐体积的无菌缓冲液或去离子水。轻柔旋转溶解,切勿涡旋。使用前再次短暂离心去除颗粒。复溶缓冲液和体积请以rp377487官方产品数据表为准。
重组人GOLGA6D蛋白适用于哪些实验应用?
重组人GOLGA6D蛋白(rp377487)适用于多种体外研究应用,包括SDS-PAGE、蛋白质印迹(Western Blot)、ELISA(作为包被抗原或标准品)、蛋白质相互作用研究(pull-down、共免疫沉淀)以及免疫学检测(如抗体制备或自身抗体检测)。研究人员应针对每种检测格式优化工作浓度。本产品仅供研究使用。
如何储存重组人GOLGA6D蛋白以维持其活性?
冻干蛋白应按产品数据表规定储存于-20°C或-80°C。复溶后,分装蛋白以避免反复冻融,长期储存置于-80°C,短期使用(约一周内)可置于4°C。具体储存建议请以rp377487官方产品数据表为准。
参考文献
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GOLGA6D Protein (rp377487) Product Datasheet. Aladdin Scientific.
- Nakamura N. Emerging new roles of GM130, a cis-Golgi matrix protein, in higher order cell functions. J Pharmacol Sci. 2010;112(3):255-264.
- Barr FA, Short B. Golgins in the structure and dynamics of the Golgi apparatus. Curr Opin Cell Biol. 2003;15(4):405-413.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)