重组人GOLGA7B蛋白:表达与使用实验方案
重组人GOLGA7B蛋白:表达与使用实验方案
Recombinant Human GOLGA7B Protein 是一种来源于人类GOLGA7B基因的研究级重组蛋白,旨在支持高尔基体结构组织、蛋白质棕榈酰化级联反应及相关细胞内转运机制的研究。
- 产品名称
- 重组人GOLGA7B蛋白
- 货号
- rp372893
- 基因
- GOLGA7B(高尔基蛋白A7家族成员B)
- 物种
- 人(智人)
- 应用
- 体外生化检测、蛋白质相互作用研究、细胞生物学研究
- 储存建议
- 避免反复冻融;长期储存请置于-80 °C
背景:GOLGA7B及其生物学功能
GOLGA7B(高尔基蛋白A7家族成员B)是高尔基蛋白家族中卷曲螺旋蛋白的成员,定位于高尔基体。高尔基蛋白在维持高尔基体结构及介导囊泡在各区室间转运方面发挥重要的结构和功能作用。GOLGA7B已被鉴定为蛋白质S-棕榈酰化的辅助因子,该脂质翻译后修饰对膜结合、蛋白质分选和信号转导至关重要。
特别是,GOLGA7B已被报道能够与高尔基体驻留的DHHC家族棕榈酰基酰基转移酶(PATs)相互作用并促进其活性,从而影响底物蛋白(包括H-Ras和N-Ras)的棕榈酰化。因此,了解GOLGA7B的功能与肿瘤学、膜生物学及细胞内转运研究密切相关。
复溶与储存方案
所需材料:无菌去离子水或产品数据表中推荐的缓冲液、低吸附微量离心管、干冰或液氮(用于快速冷冻分装样品)。
复溶步骤:
- 开瓶前,以低速(例如1,000 × g,30秒)短暂离心,将冻干物收集至管底。
- 按照质量检验证书(CoA)上规定的体积加入无菌复溶缓冲液,以达到所需工作浓度。轻柔吸打混匀,避免涡旋振荡。
- 在室温或冰上静置10–15分钟,期间偶尔轻柔混匀,使蛋白充分溶解。
- 目视检查确认完全溶解。若溶液出现浑浊,于4 °C下10,000 × g离心5分钟,取上清液使用。
储存:将复溶蛋白分装至低吸附管中,每管为单次使用量。工作分装液可于-20 °C储存最长1个月,或于-80 °C长期储存。避免反复冻融,因为这可能损害蛋白活性和完整性。
实验应用与检测指南
重组人GOLGA7B蛋白(rp372893)适用于多种体外研究应用,包括:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:用于pull-down实验、共免疫沉淀验证或表面等离子共振(SPR),以表征GOLGA7B与DHHC棕榈酰基酰基转移酶或其他高尔基体驻留蛋白之间的相互作用。
- 生化表征:在研究DHHC酶活性或确认酶-辅助因子关系时,用作体外棕榈酰化实验的底物。
- 抗体验证:在蛋白质印迹(Western blot)或ELISA中用作阳性对照抗原,以验证抗GOLGA7B抗体。
- 结构研究:在满足纯度和缓冲液要求的前提下,可作为圆二色谱(CD)或分析超速离心等生物物理表征技术的起始材料。
请始终针对每种特定检测格式通过实验确定最适蛋白浓度。使用前请查阅质量检验证书,获取批次特定的纯度、浓度和活性数据。
质量控制与安全注意事项
质量控制:每批重组人GOLGA7B蛋白在放行前均须经过质量控制检测。典型的质控分析包括SDS-PAGE纯度评估,以及(在适用情况下)功能活性验证。请参阅每批产品随附的质量检验证书(CoA),以获取具体质控数据,包括纯度百分比、内毒素水平和储存缓冲液组成。
安全性:重组人GOLGA7B蛋白仅供研究使用(RUO),未获准用于诊断、治疗或兽医用途。处理该蛋白时应遵守标准实验室安全规范。请穿戴适当的个人防护装备(PPE),包括手套、实验服和护目镜。请查阅安全数据表(SDS)以获取具体危险信息和处置指南。
法规说明:本产品符合标准研究试剂质量要求,非药品,不得用于临床环境。
常见问题
重组人GOLGA7B蛋白推荐使用哪种复溶缓冲液?
复溶缓冲液的种类和体积在每批产品随附的质量检验证书(CoA)上均有说明。通常使用无菌去离子水或基于PBS的缓冲液。复溶前请务必查阅批次特定的CoA,以确保最佳的蛋白稳定性和活性。
应如何储存重组人GOLGA7B蛋白以保持其稳定性?
复溶后,将蛋白分装为单次使用量,长期使用时储存于-80 °C,或于-20 °C储存最长一个月。避免反复冻融,因为这会显著降低蛋白的完整性和生物活性。加入BSA等载体蛋白有助于稳定稀溶液。
重组人GOLGA7B蛋白经过验证可用于哪些实验应用?
重组人GOLGA7B蛋白(rp372893)适用于体外生化检测,包括蛋白质-蛋白质相互作用研究、抗体验证(如蛋白质印迹、ELISA阳性对照)及体外棕榈酰化实验。研究人员应针对每种具体应用和检测格式,通过实验优化蛋白浓度。
重组人GOLGA7B蛋白可用于细胞实验吗?
重组人GOLGA7B蛋白主要用于体外生化应用。若用于细胞实验,则需额外考量蛋白递送方法、内毒素水平及细胞相容性等因素。请查阅CoA中的内毒素规格说明,并联系Aladdin Scientific技术支持获取特定应用的指导。
参考文献
- Ohta E, et al. Identification and characterization of GCP16, a novel acylated Golgi membrane protein that interacts with GCP170. J Biochem. 2003.
- Swarthout JT, et al. DHHC9 and GCP16 constitute a human protein fatty acyltransferase with specificity for H- and N-Ras. J Biol Chem. 2005.
- Resh MD. Trafficking and signaling by fatty-acylated and prenylated proteins. Nat Chem Biol. 2006.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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