重组人GPA33蛋白:特性与研究指南
重组人GPA33蛋白:特性与研究指南
Recombinant Human GPA33 Protein是GPA33细胞表面抗原的重组生产形式,该糖蛋白在胃肠道上皮细胞中高度表达,被广泛用于结直肠癌生物标志物研究及治疗靶点开发。
- 产品名称
- 重组人GPA33蛋白
- 货号
- rp368030
- 蛋白来源
- 人(智人)
- 蛋白类型
- 重组细胞表面糖蛋白抗原
- 主要研究领域
- 肿瘤学、胃肠道生物学、免疫治疗
- 主要应用
- 生物标志物研究、抗体验证、结合实验
GPA33是什么?为何重要?
GPA33(糖蛋白A33)是一种属于免疫球蛋白超家族的I型跨膜蛋白,主要表达于整个胃肠道的肠上皮细胞表面,并在大多数结直肠癌中持续表达,使其成为具有临床意义的生物标志物和治疗靶点。
由于GPA33的表达主要局限于胃肠道上皮细胞和结直肠肿瘤,它在基于抗体的诊断和免疫治疗策略(包括放射免疫治疗和抗体-药物偶联物,ADC)中受到广泛关注。研究人员已将抗GPA33抗体用于结直肠癌的临床试验,进一步凸显了该抗原的转化研究价值。
推荐实验应用
重组人GPA33蛋白(rp368030)适用于多种体外研究应用:
- 抗体验证:作为阳性对照抗原,用于ELISA、Western blot和表面等离子共振(SPR)实验中抗GPA33抗体的验证。
- 结合与抑制实验:用于配体结合或竞争性抑制研究,以表征与GPA33胞外域相互作用的分子。
- 生物标志物研究:在生物样品中GPA33检测的分析方法开发中用作参考标准品。
- 免疫治疗研究:用于GPA33靶向治疗构建体(如双特异性抗体或ADC载荷)的临床前评估。
- 细胞生物学研究:支持研究GPA33在上皮细胞黏附和肠道稳态中功能作用的实验。
在正式实验前,研究人员应进行针对特定应用的优化,包括蛋白浓度滴定、缓冲液条件选择及实验格式确认。
存储、操作与稳定性指南
妥善操作重组人GPA33蛋白对于维持其生物活性和实验可重复性至关重要。以下通用指南适用于此类重组蛋白:
- 存储温度:冻干蛋白应在-20 °C或-80 °C下长期保存。复溶后的蛋白应分装保存,以避免反复冻融。
- 复溶:将冻干蛋白复溶于无菌去离子水或产品说明书中规定的缓冲液中,使用前使其恢复至室温。
- 冻融次数:将冻融次数控制在2-3次以内,以防止蛋白降解和活性损失。
- 载体蛋白:若在低浓度(<10 µg/mL)下保存,建议添加载体蛋白(如0.1% BSA)以稳定蛋白。
- 防止污染:始终使用无菌操作技术。若发现小瓶中有污染或浑浊迹象,请勿使用。
请务必参阅产品说明书(货号:rp368030)以获取批次特定的存储条件、浓度和配方详情。
质量保证与纯度注意事项
在为关键研究应用选择重组蛋白时,应仔细评估其质量属性。重组人GPA33蛋白的关键质量注意事项包括:
- 纯度:高纯度制备物对于定量实验和免疫学研究至关重要。请通过SDS-PAGE或HPLC确认纯度,相关数据记录于质检报告(CoA)中。
- 内毒素水平:对于细胞实验和体内研究,应验证并最小化内毒素含量。请在CoA中查阅LAL检测的内毒素值。
- 生物活性:如适用,应根据产品说明书确认功能活性数据(如结合亲和力、受体激活)。
- 糖基化:作为天然糖蛋白,GPA33携带N连接糖链。根据所用表达系统(如HEK293、CHO、大肠杆菌)的不同,糖基化模式可能与天然人源蛋白存在差异。研究人员在解读免疫学或结合实验结果时应考虑这一因素。
如需获取货号rp368030的批次特定质量文件(CoA),请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
重组人GPA33蛋白(rp368030)采用何种表达系统生产?
rp368030的具体表达系统信息请查阅产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持确认。GPA33等糖蛋白的常见表达系统包括哺乳动物系统(HEK293、CHO),以保留类天然糖基化修饰;也可使用大肠杆菌系统生产非糖基化形式。
重组人GPA33蛋白是否适用于细胞功能实验?
在内毒素水平符合要求且蛋白配方与细胞培养条件兼容的前提下,重组人GPA33蛋白可用于细胞实验。研究人员在正式用于细胞功能实验前,应验证蛋白活性并确认不含细胞毒性污染物。
开封后应如何复溶和保存重组人GPA33蛋白?
将冻干GPA33蛋白复溶于无菌去离子水或产品说明书推荐的缓冲液中。复溶后,将蛋白分装为单次使用量,并在-80 °C下保存,以避免反复冻融。请参阅rp368030产品说明书以获取批次特定的复溶体积和配方建议。
重组人GPA33蛋白能否用作抗体制备的免疫原?
重组人源蛋白常被用作抗体制备的免疫原。重组人GPA33蛋白可能适用于此用途;但研究人员应评估蛋白纯度、完整性以及糖基化谱是否适合所期望的免疫反应。请咨询Aladdin Scientific技术支持以获取针对rp368030的具体指导。
参考文献
- Heath JK, et al. The human A33 antigen is a transmembrane glycoprotein and a novel member of the immunoglobulin superfamily. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 1997;94(2):469-474.
- Welt S, et al. Phase I study of anticolon cancer humanized antibody A33. Clinical Cancer Research. 2003;9(4):1338-1346.
- Ritter G, et al. The A33 antigen: a novel target for antibody-based therapy of colorectal cancer. Clinical Cancer Research. 1997;3(8):1493-1502.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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