重组人GPR15LG蛋白:特性与使用指南
重组人GPR15LG蛋白:特性与使用指南
Recombinant Human GPR15LG Protein是一种研究级重组配体,靶向孤儿G蛋白偶联受体GPR15,适用于免疫细胞归巢、黏膜免疫及GPR15介导信号通路的相关研究。
- 产品名称
- 重组人GPR15LG蛋白
- 货号
- rp365037
- 蛋白来源
- 人源(智人)
- 蛋白类型
- GPR15(G蛋白偶联受体15)重组配体
- 主要应用
- GPR15信号传导研究、免疫细胞迁移实验、受体结合实验
- 供应商参考编号
- absea#PP-512
背景:GPR15及其配体GPR15LG
G蛋白偶联受体15(GPR15)是一种七次跨膜受体,最初被归类为孤儿GPCR,主要表达于T淋巴细胞,在免疫细胞向黏膜组织(尤其是结肠和皮肤)归巢过程中发挥关键作用。GPR15还被证实是某些HIV和SIV毒株的共受体,进一步凸显其在免疫学中的重要性。
GPR15LG(GPR15配体,又称C10orf99或GPR15L)是GPR15的内源性趋化因子样配体,是一种小型分泌蛋白,能够将表达GPR15的调节性T细胞(Tregs)和效应T细胞定向引导至上皮屏障部位。研究GPR15LG生物学对炎症性肠病、皮肤炎症及黏膜免疫领域具有重要意义。
蛋白规格与质量
阿拉丁科学重组人GPR15LG蛋白(rp365037)作为研究级重组蛋白生产,对应absea目录编号PP-512。以下参数可能因批次而异,研究人员应参阅随附的质检报告(CoA)和产品说明书以获取确认信息:
- 表达系统:请查阅CoA确认(趋化因子类蛋白常用大肠杆菌或哺乳动物/HEK293表达系统)。
- 纯度:通常经SDS-PAGE检测>90%;请以批次CoA为准。
- 制剂:缓冲液成分、载体蛋白(如BSA)的存在及冻干或液态形式,请查阅产品说明书确认。
- 生物活性:ED50值及功能实验数据请查阅CoA确认。
所有具体数值(分子量、纯度百分比、内毒素水平、活性单位)均应以每批次随附的最新产品说明书和CoA为准。
复溶、储存与操作
正确操作重组人GPR15LG蛋白对保持其生物活性至关重要。以下为此类重组蛋白的通用最佳实践指南,具体操作请以产品说明书为准:
- 复溶:若以冻干形式提供,开瓶前简短离心。用无菌去离子水或说明书指定缓冲液按推荐浓度复溶。室温平衡10–15分钟,轻柔混匀,避免涡旋振荡。
- 工作分装:复溶后立即分装为单次用量,以减少反复冻融对活性的损害。
- 短期储存:复溶后的蛋白在4 °C可保存最多7天。
- 长期储存:冻干品按说明书规定储存于–20 °C或–80 °C;复溶后分装于–80 °C保存,避免反复冻融。
- 载体蛋白:若实验对BSA或其他载体蛋白敏感,请索取无载体蛋白配方,或联系阿拉丁科学技术支持确认制剂详情。
注:以上储存条件为重组趋化因子类蛋白的通用指导建议,请以CoA中的批次说明为准。
实验应用
重组人GPR15LG蛋白适用于涉及GPR15生物学的多种体外研究应用:
- 受体结合实验:用于细胞或生化结合实验中验证GPR15–GPR15LG相互作用。
- 趋化/迁移实验:可作为趋化因子用于Transwell或微流控迁移实验,适用于表达GPR15的T细胞或转染细胞系。
- 功能性信号研究:研究GPR15LG刺激后GPR15介导的下游信号级联(如钙离子流、cAMP调节、MAPK激活)。
- 细胞归巢模型:支持Treg或效应T细胞向上皮组织募集的体外建模研究。
- ELISA/Western Blot标准品:在确认抗体交叉反应性后,可作为免疫实验的阳性对照或标准品。
本蛋白仅供研究使用,不适用于治疗、诊断或兽医用途。
常见问题排查与技术提示
以下排查指南针对使用GPR15LG等重组趋化因子类蛋白时常见的问题:
- 生物活性低或无活性:确认蛋白复溶操作正确,冻融次数已最小化。确认靶细胞表面有足量功能性GPR15表达。检查制剂中BSA或载体蛋白是否干扰实验。
- 蛋白聚集:若出现沉淀,低速离心(300–500 × g),仅使用上清液。复溶时避免蛋白浓度过高。
- 结合实验背景过高:设置适当阴性对照(仅溶剂、GPR15阴性细胞)。通过梯度稀释确定最佳工作浓度范围。
- 内毒素污染顾虑:对LPS/内毒素敏感的实验,请查阅CoA确认内毒素水平,必要时使用内毒素去除柱。
如需进一步技术支持,请携带批号和CoA联系阿拉丁科学技术服务团队。
常见问题
GPR15LG是什么?它对研究有何重要意义?
GPR15LG(又称C10orf99或GPR15L)是G蛋白偶联受体GPR15的内源性配体,能够将表达GPR15的T细胞(包括调节性T细胞)定向引导至结肠、皮肤等黏膜和上皮组织。GPR15LG研究与炎症性肠病、皮肤炎症、黏膜免疫及HIV共受体生物学密切相关。
如何复溶和储存重组人GPR15LG蛋白(rp365037)?
若以冻干形式提供,请用无菌去离子水或产品说明书指定缓冲液复溶,轻柔混匀,室温平衡10–15分钟。分装为单次用量以避免反复冻融。复溶后分装于–80 °C长期保存。储存条件请以随货提供的批次CoA为准。
重组人GPR15LG蛋白适用于哪些细胞实验?
重组人GPR15LG蛋白适用于趋化/迁移实验(如Transwell)、受体结合实验、GPR15下游信号研究(钙离子流、cAMP、MAPK)及体外T细胞归巢模型。在确认抗体相容性后,也可作为ELISA或Western Blot实验的阳性对照。
重组人GPR15LG蛋白(rp365037)是否适用于体内或临床用途?
不适用。阿拉丁科学的重组人GPR15LG蛋白仅供体外研究使用,未经批准或验证用于治疗、诊断、兽医或任何人体内应用。
如何确认所收到批次GPR15LG蛋白的活性?
每批次随附的质检报告(CoA)中列有生物活性数据,包括功能实验测定的ED50值。如需进一步验证,可使用表达GPR15的细胞进行GPR15介导的趋化实验作为功能性质控步骤。
参考文献
- Lahl K, et al. Conventional NK cells and plasmacytoid DC-derived type I IFN are required for inflammatory bowel disease-associated GPR15+ T cell homing. Journal of Immunology research — general GPR15LG literature; specific citation requires verification.
- Suply T, et al. A natural ligand for the orphan receptor GPR15 modulates lymphocyte recruitment to epithelia. Science Signaling, 2017 — requires verification of volume, pages, and author list.
- Absea Biotechnology. Recombinant Human GPR15LG Protein, catalog PP-512. Product datasheet — specific lot data should be confirmed with supplier documentation.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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