重组人GPR84蛋白:特性与研究指南
重组人GPR84蛋白:特性与研究指南
Recombinant Human GPR84 Protein是人G蛋白偶联受体84的研究级重组形式,可帮助科学家研究其在免疫调节、炎症信号传导及中链脂肪酸感知中的作用。
- 产品名称
- 重组人GPR84蛋白
- 货号
- rp371601
- 蛋白家族
- G蛋白偶联受体(GPCR),A类(视紫红质样)
- 主要配体
- 中链游离脂肪酸(C9–C14),包括癸酸和月桂酸
- 主要表达组织
- 免疫细胞(单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞)、脂肪组织、肺
- 研究应用
- 结合实验、抗体验证、结构研究、药物筛选、GPCR功能实验
- 储存建议
- 于-80°C保存,避免反复冻融
GPR84的生物学背景与功能
GPR84,又称EX33,是A类(视紫红质样)G蛋白偶联受体超家族成员,由位于人类第12号染色体12q13.13上的GPR84基因编码。它是一种七次跨膜结构域受体,主要通过Gi/o蛋白传递信号,导致腺苷酸环化酶抑制及细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平降低。
GPR84作为中链游离脂肪酸(MCFA)的受体发挥作用,尤其对碳链长度为C9至C14的脂肪酸(如癸酸C10和月桂酸C12)具有较高亲和力。这一脂质感知功能使GPR84处于代谢与免疫信号的交汇点。该受体在单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等免疫细胞中高度表达,并在炎症状态下显著上调。GPR84激活可促进促炎细胞因子释放并增强免疫细胞趋化性,使其成为炎症性疾病研究中备受关注的靶点。
新兴证据还表明GPR84参与肺、肝和肾等器官的纤维化过程,以及神经炎症。这些多样化的功能引发了对GPR84作为治疗靶点的广泛兴趣,特别是在代谢综合征、炎症性肠病、肺纤维化和脓毒症等疾病领域。
产品规格与质量属性
Aladdin Scientific重组人GPR84蛋白(货号:rp371601)采用适当的重组表达系统生产,所得蛋白适用于多种体外研究应用。产品在受控条件下制造,并经质量控制检测以确保批次间一致性。
研究人员收到产品后应核实的关键规格包括:
- 纯度:通过SDS-PAGE和/或HPLC分析确认。具体纯度规格请以产品数据表或质量检验证书(CoA)为准。
- 配方:通常以优化蛋白稳定性的缓冲液溶液形式提供。具体缓冲液成分和蛋白浓度请参阅批次专属CoA。
- 生物活性:可通过配体结合实验或功能性Gi/o信号实验(如HTRF cAMP实验)评估活性。请参阅产品数据表中经过验证的活性数据。
- 内毒素水平:内毒素含量受到控制,应在CoA上确认,对基于细胞和体内研究尤为重要。
强烈建议研究人员在实验前查阅Aladdin Scientific提供的最新产品数据表(absea#PP-5742)及批次专属CoA。
研究应用
重组人GPR84蛋白支持广泛的研究和药物发现工作流程:
- 配体结合实验:重组蛋白可用于放射性配体或荧光竞争结合实验,以表征新型GPR84激动剂和拮抗剂,支持GPCR药物发现项目中的构效关系(SAR)研究。
- 抗体开发与验证:作为抗原,重组蛋白有助于抗GPR84抗体的制备及特异性验证,用于ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学等免疫检测。
- 功能信号研究:当整合到适当的膜或无细胞系统中时,该蛋白支持GPR84介导的Gi/o信号级联研究,包括cAMP调节、MAPK激活和下游转录响应。
- 结构生物学:纯化的重组GPR84可作为冷冻电镜或X射线晶体学研究的底物,用于阐明受体结构和配体结合机制。
- 炎症与代谢疾病建模:该蛋白支持GPR84在巨噬细胞和中性粒细胞激活、细胞因子产生以及与代谢综合征、纤维化和脓毒症模型相关的脂质感知通路中的机制研究。
操作、储存与复溶指南
正确操作重组人GPR84蛋白对于保持其结构完整性和生物活性至关重要。请遵循以下最佳实践指南:
- 储存温度:收到后立即于-80°C保存。若蛋白将立即使用,可在4°C短期储存(不超过1周),但长期储存必须在-80°C下进行。
- 分装:首次融化后,将蛋白分装为适合实验需求的单次使用量。这可防止反复冻融循环导致蛋白聚集、变性和活性丧失。
- 冻融次数:冻融次数限制在最多两至三次。每增加一次循环都可能逐渐降低蛋白质量。
- 复溶:若以冻干形式提供,用CoA上指定体积的无菌超纯水或缓冲液复溶。在室温下平衡10–15分钟后,用移液管轻柔混匀。切勿涡旋振荡。
- 载体蛋白:对于极稀的工作溶液,考虑添加载体蛋白(如0.1% BSA),以减少蛋白对塑料表面的吸附并维持蛋白稳定性。
- 避免污染:所有操作均应采用无菌技术,尤其是在细胞实验中使用该蛋白时。
请务必参阅批次专属CoA和产品数据表,以获取针对特定配方的操作说明。
法规状态与质量保证
Aladdin Scientific重组人GPR84蛋白(rp371601)仅供科研使用(RUO)。未经适当监管授权,不得用于诊断程序、治疗应用或临床试验。
Aladdin Scientific重组蛋白质量保证体系包括:
- 批次放行检测,涵盖纯度评估、身份确认和活性验证。
- 为每个批次提供质量检验证书(CoA),记录检测参数和结果。
- 可追溯性文件,支持需要审计追踪的GLP相关研究环境。
在受监管环境中工作的研究人员应确认其特定应用是否需要对试剂进行额外的资质认定或验证。如需定制配方、大批量订购或特定应用验证支持,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
GPR84是什么,为什么它是研究靶点?
GPR84是一种A类G蛋白偶联受体,作为中链脂肪酸(C9–C14)的感受器,在单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等免疫细胞中高度表达。它在炎症信号传导、免疫细胞激活和代谢调节中发挥重要作用。GPR84作为炎症性疾病、代谢综合征、纤维化(肺、肝、肾)和神经炎症的治疗靶点而备受关注。
重组人GPR84蛋白(rp371601)使用何种表达系统生产?
rp371601所用的具体表达系统应以Aladdin Scientific提供的最新产品数据表或质量检验证书为准,因为表达系统详情可能因产品配方和批次而异。GPCR常用表达系统包括哺乳动物、昆虫(杆状病毒)和无细胞表达平台。请联系Aladdin Scientific技术支持团队获取最新规格信息。
如何储存重组人GPR84蛋白以维持其活性?
收到后立即于-80°C保存。冻存前分装为单次使用量,以避免反复冻融循环导致蛋白质量下降。冻融次数限制在不超过两至三次。若使用稀释的工作溶液,添加0.1% BSA作为载体蛋白以减少表面吸附。请务必参阅批次专属CoA获取针对特定配方的操作指导。
重组人GPR84蛋白能否用于抗体验证?
可以。重组人GPR84蛋白适合作为抗原用于抗体验证工作流程,包括基于ELISA的特异性测试、蛋白质印迹阳性对照和竞争性抑制实验。将其作为特征明确的重组抗原使用,有助于在处理更复杂的生物样品之前确认抗体的特异性和灵敏度。
重组人GPR84蛋白是否适合临床或诊断用途?
不适合。重组人GPR84蛋白(rp371601)仅供科研使用(RUO),未获批准或验证用于诊断、治疗或临床应用。需要用于受监管应用的试剂的研究人员应联系Aladdin Scientific讨论相关要求。
参考文献
- Wang J, et al. Identification of medium-chain free fatty acids as natural ligands for orphan G-protein-coupled receptor GPR84. Journal of Biological Chemistry. 2006.
- Marsango S, et al. GPR84: An orphan receptor with inflammatory functions. British Journal of Pharmacology. 2022.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GPR84 Protein (rp371601) Product Datasheet. absea#PP-5742.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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