重组人HOXD9蛋白:研究指南与实验方案
重组人HOXD9蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human HOXD9 Protein是一种重要的同源框转录因子试剂,支持研究人员开展发育生物学、基因调控及肿瘤生物学研究。
- 产品名称
- 重组人HOXD9蛋白
- 货号
- rp376496
- 蛋白家族
- HOX同源框转录因子家族
- 物种来源
- 人类(智人)
- 主要应用
- 发育生物学、基因调控、肿瘤学研究
- 储存建议
- 避免反复冻融;按供应商建议条件储存
背景:HOXD9的生物学意义
HOXD9是含同源结构域转录因子HOX家族的成员,是后生动物胚胎发育与体型模式建立的高度保守调控因子。人类HOXD基因簇位于2号染色体,编码对后躯干模式、肢体发育及泌尿生殖器官形成至关重要的蛋白质。HOXD9通过其同源结构域与特定DNA序列结合,调控靶基因转录。
除发育功能外,HOXD9在肿瘤学领域也备受关注。多种癌症类型中已报告HOXD9异常表达,其可能影响肿瘤细胞增殖、侵袭和转移。在分子水平上研究HOXD9功能,需要适用于生化和细胞实验的高质量重组蛋白工具。
产品规格与质量属性
阿拉丁科学重组人HOXD9蛋白(货号:rp376496)经专业生产,可满足严格的科研应用需求。在评估重组转录因子蛋白时,研究人员应在实验前参阅最新产品说明书,确认以下规格:
- 纯度:用于生化实验的重组蛋白应达到规定的纯度标准,通常通过SDS-PAGE和/或HPLC进行评估。请参阅产品说明书获取批次特定纯度数据。
- 制剂:缓冲液组成、pH及稳定剂(如甘油、BSA或还原剂)的添加直接影响蛋白活性及下游兼容性。请参阅最新质量检验报告(CoA)了解制剂详情。
- 生物活性:功能验证数据(如DNA结合实验或报告基因实验)可提供蛋白活性的可信依据。请在产品页面或说明书上核实活性数据。
- 内毒素水平:对于细胞实验,低内毒素水平至关重要。请查阅CoA了解内毒素检测结果。
请务必参阅阿拉丁科学官网上最新版产品说明书及CoA,以获取批次特定规格信息。
操作、复溶与储存规程
正确操作重组蛋白对于保持其活性、确保实验结果的可重复性至关重要。请遵循以下重组人HOXD9蛋白的通用最佳实践指南:
- 收货与检验:收到货物后,检查包装完整性,确认产品在建议的运输温度下保存。记录批号和有效期。
- 初次解冻:在冰上或4 °C条件下缓慢解冻蛋白。避免在室温下解冻或使用水浴,因为温度急剧变化可能导致蛋白聚集和活性丧失。
- 复溶(如为冻干品):若产品为冻干形式,开瓶前短暂离心小瓶。按说明书规定的体积和缓冲液进行复溶。静置数分钟使溶液平衡;勿涡旋混合。轻柔吹打混匀。
- 分装:复溶或初次解冻后立即进行单次使用分装,以减少冻融次数。每个分装管上标注日期、浓度和批号。
- 储存:按说明书规定将分装样品储存于−70 °C或指定温度。除非另有说明,避免长期储存于−20 °C。已解冻的分装样品勿再次冷冻。
- 工作浓度:针对每种实验体系通过实验确定最佳工作浓度。参考已发表文献和产品说明书中建议的起始浓度。
注意:具体复溶体积、缓冲液组成及储存温度因批次而异。使用前请务必参阅最新产品说明书和CoA。
研究应用
重组人HOXD9蛋白是支持多种研究应用的通用试剂:
- 生化结合实验:在电泳迁移率变动实验(EMSA)或表面等离子共振(SPR)中使用纯化HOXD9蛋白,表征同源结构域参与的DNA-蛋白及蛋白-蛋白相互作用。
- 结构研究:重组HOXD9可作为抗原或结构底物,用于晶体学或冷冻电镜研究,以阐明同源结构域的结构-功能关系。
- 抗体生产与验证:作为阳性对照抗原,用于验证抗HOXD9抗体在Western印迹、ELISA或免疫沉淀实验中的特异性。
- 无细胞转录实验:在体外转录系统中研究HOXD9介导的转录调控。
- 癌症生物学研究:通过在无细胞或细胞实验体系中补充重组蛋白,或用其建立实验标准,研究HOXD9在肿瘤细胞行为中的作用。
- 药物发现:筛选靶向HOXD9同源结构域-DNA相互作用的小分子抑制剂,探索潜在的抗癌疗法。
常见问题排查
研究人员在使用重组人HOXD9蛋白时可能遇到以下问题。以下指导反映了重组转录因子蛋白的通用最佳实践:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 蛋白活性丧失 | 反复冻融;储存温度不当 | 使用单次分装;按推荐温度储存;避免长期置于−20 °C |
| 蛋白聚集或沉淀 | 解冻过快;缓冲液条件不兼容;浓度过高 | 在冰上解冻;使用前于4 °C短暂离心;在兼容缓冲液中稀释至工作浓度 |
| 结合实验信号弱或无信号 | 蛋白浓度不适;缓冲液pH或盐浓度不正确 | 滴定蛋白浓度;优化缓冲液条件;设置阳性对照 |
| Western印迹(作为标准品)出现非特异性条带 | 蛋白降解;污染 | 使用新鲜分装样品;检查蛋白酶污染情况;确认储存完整性 |
如问题持续存在,请携带批号、实验条件及观察结果联系阿拉丁科学技术支持团队。
常见问题
HOXD9是什么?它在研究中为何重要?
HOXD9是含同源结构域的转录因子,属于HOX基因家族,负责调控胚胎发育和体型模式建立的关键过程。除发育功能外,HOXD9还与癌症生物学密切相关,其异常表达可能影响肿瘤细胞增殖、侵袭和转移,使其成为基础研究和转化研究的重要靶点。
应如何储存重组人HOXD9蛋白以维持其活性?
重组人HOXD9蛋白应按照最新产品说明书和质量检验报告(CoA)规定的条件储存。作为重组蛋白的通用最佳实践,应制备单次使用分装以避免反复冻融,并按建议储存于−70 °C或指定温度。请务必参阅最新说明书获取批次特定储存说明。
重组人HOXD9蛋白适用于哪些应用?
重组人HOXD9蛋白适用于多种生化和细胞实验,包括EMSA和SPR DNA-蛋白相互作用研究、抗体验证(Western印迹、ELISA、免疫沉淀)、体外转录实验、癌症生物学研究,以及靶向HOXD9同源结构域的药物发现筛选。请参阅产品说明书确认其对特定实验的适用性。
如何复溶冻干的重组人HOXD9蛋白?
若产品以冻干形式提供,开瓶前应短暂离心小瓶以收集内容物。使用产品说明书规定的缓冲液类型和体积进行复溶。静置数分钟,勿涡旋,然后轻柔吹打混匀。立即进行分装并按建议条件储存。请务必遵循产品随附的批次特定说明。
重组人HOXD9蛋白能否用作Western印迹的阳性对照?
是的,重组蛋白通常用作Western印迹实验中的阳性对照抗原,以验证抗HOXD9抗体的特异性并确认实验性能。请确保蛋白在有效使用期内且储存正确。请参阅说明书了解重组蛋白的预期分子量,因标签或修饰,其分子量可能与内源性HOXD9有所不同。
参考文献
- Scott MP. Vertebrate homeobox gene nomenclature. Cell. 1992;71(4):551-553. doi:10.1016/0092-8674(92)90588-4
- Lappin TR, Grier DG, Thompson A, Halliday HL. HOX genes: seductive science, mysterious mechanisms. Ulster Med J. 2006;75(1):23-31. PMID:16457402
- Shah N, Sukumar S. The Hox genes and their roles in oncogenesis. Nat Rev Cancer. 2010;10(5):361-371. doi:10.1038/nrc2826
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