重组人HP1BP3蛋白:操作与使用实验方案
重组人HP1BP3蛋白:操作与使用实验方案
Recombinant Human HP1BP3 Protein是一种研究级染色质相关蛋白,专为支持异染色质组织、基因沉默及表观遗传调控机制研究而设计。
- 产品名称
- 重组人HP1BP3蛋白
- 货号
- rp371635
- 物种来源
- 人(智人)
- 蛋白类别
- 染色质相关/异染色质结合蛋白
- 应用
- 染色质生物学、表观遗传学、基因调控研究
- 规格形式
- 重组蛋白(冻干或液态;请以产品数据表为准)
- 储存条件
- 储存于-20°C或-80°C;避免反复冻融(请以产品数据表为准)
背景:HP1BP3及其生物学功能
HP1BP3(异染色质蛋白1结合蛋白3)是一种核蛋白,能与异染色质蛋白1(HP1)家族成员相互作用,在染色质压缩、基因沉默及异染色质结构维持中发挥关键作用。该蛋白含有染色框相互作用结构域,可促进其招募至HP1富集的基因组区域,从而参与转录抑制和基因组稳定性的维持。
HP1BP3与细胞衰老、DNA损伤应答及基因组重复元件调控等过程密切相关。其与HP1亚型(HP1α、HP1β、HP1γ)的相互作用使其成为高阶染色质结构中的关键支架蛋白。对HP1BP3功能的研究与肿瘤生物学、衰老及表观遗传遗传机制密切相关。
复溶与操作步骤
所需材料:无菌去离子水或产品数据表规定的复溶缓冲液、低吸附微量离心管、冰块及移液器。
- 平衡:开瓶前将小瓶置于室温(约15–25°C)平衡10–15分钟,以减少冷凝水引起的污染。
- 复溶:将规定体积的无菌去离子水或推荐缓冲液(详见产品专用数据表)直接加入冻干产品中,轻柔上下吹打混匀,切勿剧烈涡旋。
- 溶解:将溶液置于冰上静置5–10分钟,然后通过轻柔翻转或低速旋转混匀至完全溶解。
- 离心:短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),将管壁上的残余物收集至管底。
- 分装:制备单次使用的分装,避免反复冻融,以防止蛋白活性和完整性受损。
注意:复溶体积、缓冲液组成及浓度规格,请始终以货号rp371635随附的产品专用数据表为准。
储存与稳定性指南
短期储存(最长1个月):若复溶后的蛋白将在一个月内使用完毕,可在4°C保存。添加0.1% BSA等载体蛋白有助于增强短期冷藏保存的稳定性。
长期储存:如需延长保存时间,应将分装蛋白冷冻于-20°C,优选-80°C。冻干蛋白若密封干燥储存于-20°C,自生产日期起稳定性可达12个月或以上。
注意避免:
- 反复冻融(最多不超过3次)。
- 暴露于直射光线,以防蛋白敏感表位降解。
- 在室温下长时间放置。
免责声明:具体稳定性数据及有效期信息,请以rp371635随附的质量检验报告(CoA)为准。
推荐应用与实验技巧
重组人HP1BP3蛋白适用于多种体外及生化研究应用,包括但不限于:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:通过共免疫沉淀(Co-IP)或pull-down实验,研究HP1BP3与HP1家族成员或其他染色质相关蛋白的相互作用。
- 生化检测:基于ELISA的结合实验、表面等离子体共振(SPR)或等温滴定量热法(ITC),用于表征结合亲和力。
- 体外染色质组装:重建染色质复合物,研究HP1BP3在高阶染色质折叠中的作用。
- 抗体验证:在验证HP1BP3特异性抗体时,用作Western blot、斑点杂交或ELISA的阳性对照抗原。
- 功能性酶活或活性检测:在无细胞体系中研究HP1BP3对染色质重塑复合物的影响。
技巧:针对每种检测格式,通过实验经验优化蛋白浓度。建议起始浓度范围为每次反应0.1–1 µg,并据此进行梯度优化。请确认该蛋白在您具体实验体系中的适用性。
质量控制与纯度注意事项
重组人HP1BP3蛋白(rp371635)在受控条件下生产,并在放行前进行质量控制检测。此类重组蛋白的典型质量评估通常包括:
- 纯度分析:SDS-PAGE结合考马斯亮蓝染色或银染,评估蛋白纯度(典型目标值≥85–95%;请以CoA为准)。
- 鉴别验证:使用HP1BP3特异性抗体进行Western blot,或通过质谱法确认蛋白身份。
- 内毒素检测:采用LAL(鲎试剂)法确认内毒素水平在细胞实验可接受范围内。
- 生物活性检测:通过功能性实验确认蛋白与HP1家族蛋白或染色质底物的结合活性(如适用)。
每批次rp371635的实际检测数值,请始终以随附的质量检验报告(CoA)为准。不同批次报告的质控数据可能有所差异。
常见问题
重组人HP1BP3蛋白的推荐复溶缓冲液是什么?
复溶缓冲液及用量详见货号rp371635随附的产品数据表。对于重组核蛋白,通常使用无菌去离子水或生理缓冲液(如pH 7.4的PBS)。请务必以产品专用数据表的说明为准。
如何储存重组人HP1BP3蛋白以维持其活性?
如需长期储存,请将蛋白分装后保存于-80°C,避免反复冻融。若在一个月内使用,可在4°C添加载体蛋白(如0.1% BSA)后保存。批次特定的稳定性数据请参阅质量检验报告(CoA)。
重组人HP1BP3蛋白已验证的应用有哪些?
重组人HP1BP3蛋白适用于蛋白质-蛋白质相互作用研究(Co-IP、pull-down)、ELISA结合实验、体外染色质组装及抗体验证(阳性对照抗原)。具体应用适用性请参阅rp371635产品数据表确认。
重组人HP1BP3蛋白可耐受多少次冻融循环?
对于重组蛋白,通常建议冻融次数不超过三次。为减少降解,复溶时应制备单次使用的分装。超过推荐冻融次数可能导致蛋白活性降低或发生聚集。
重组人HP1BP3蛋白是否可用于细胞实验?
用于细胞实验取决于内毒素水平和蛋白纯度,两者均在产品CoA中有明确规定。若内毒素水平在可接受范围内且蛋白配方适宜,则可能适用于无细胞功能实验及细胞实验。请结合rp371635的批次CoA和数据表核实适用性。
参考文献
- Lomberk G, Wallrath L, Urrutia R. The Heterochromatin Protein 1 family. Genome Biology. 2006;7(7):228. doi:10.1186/gb-2006-7-7-228
- Cholewa-Waclaw J, et al. The role of epigenetic mechanisms in the regulation of gene expression in the nervous system. Journal of Neuroscience. 2016;36(45):11427-11434.
- Aladdin Scientific. Product Datasheet: Recombinant Human HP1BP3 Protein, SKU rp371635. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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