背景：IL17D与IL-17细胞因子家族

白细胞介素-17D（IL-17D）是一种分泌型细胞因子，属于IL-17家族。该家族由六种结构相关蛋白（IL-17A至IL-17F）组成。IL-17D通过IL-17受体复合物传递信号，已有报道其可调节先天免疫应答、促进内皮细胞和上皮细胞产生IL-6、IL-8和GM-CSF等细胞因子，并参与抗肿瘤免疫监视。IL-17D的生物学研究与炎症、肿瘤免疫学及宿主防御机制密切相关。重组人IL17D蛋白（货号：rp368342）为体外实验提供了特性明确、质量一致的细胞因子来源。

所需材料与设备

• 重组人IL17D蛋白，冻干或液态制剂（货号：rp368342）
• 无菌、无核酸酶水或厂商推荐的复溶缓冲液（如含0.1% BSA的PBS）
• 无菌微量离心管（1.5 mL）
• 经校准的微量移液器及无菌滤芯吸头
• 冷冻微量离心机
• 冰桶或冷却块
• 用于长期储存的-20°C和/或-80°C冰箱
• 适用于您实验体系的细胞培养试剂

注意：请始终参阅每批次随附的质量检验报告（CoA），获取特定制剂的复溶说明和经确认的活性数据。

逐步复溶与储存方案

1. 平衡至室温：从冷藏环境中取出样品瓶，开封前在室温下平衡10–15分钟，以减少冷凝水生成和蛋白聚集。
2. 短暂离心：开封前对密封样品瓶进行短暂离心（1,000–2,000 × g，30秒），以收集壁面和瓶盖上的冻干物料。
3. 复溶：沿样品瓶内壁缓慢加入推荐体积的无菌复溶缓冲液（通常为含0.1% BSA的无菌PBS，或遵照CoA说明）。不得直接将液体注入冻干饼上。
4. 温和混合：轻轻旋转或摇动样品瓶1–2分钟。禁止涡旋振荡，剧烈振荡可导致蛋白变性。
5. 检查溶液：确保溶液澄清，无肉眼可见颗粒。若有颗粒存在，以低速短暂离心。
6. 立即分装：使用无菌低吸附微量离心管将复溶蛋白分装成单次用量的小份，以避免反复冻融。
7. 短期储存：若在1–2周内使用，将分装样品储存于4°C。
8. 长期储存：如需长期储存，将分装样品在液氮或干冰中速冻后储存于-80°C。避免反复冻融（建议最多冻融2–3次）。

重要提示：具体储存条件和有效期数据因批次而异，请以随货附上的CoA为准。

应用指南与工作浓度

重组人IL17D蛋白可用于多种体外应用。以下列出了典型应用场景及建议起始浓度范围。研究人员应根据其特定细胞类型和实验条件进行实验优化。

• 细胞刺激实验：已有报道IL-17D可刺激内皮细胞和上皮细胞系产生细胞因子（如IL-6、IL-8）。细胞刺激实验的典型起始浓度范围为10–100 ng/mL；可根据需要进行梯度滴定。
• 受体结合研究：根据您的结合实验格式（基于ELISA的结合实验、表面等离子共振等）使用适当浓度；固相结合实验常用起始浓度为1–10 µg/mL。
• 报告基因及信号传导实验：通过剂量-效应实验确定有效浓度范围，通常从1 ng/mL开始，最高滴定至1,000 ng/mL。

载体蛋白注意事项：在极低蛋白浓度下操作时，应加入载体蛋白（如0.1% BSA），以减少蛋白在管壁和板面的非特异性吸附。

内毒素注意事项：在敏感细胞实验中使用前，请从CoA确认内毒素水平，因为内毒素污染可能干扰细胞因子刺激实验结果。

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