重组人IL24蛋白:研究指南与实验方案
重组人IL24蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human IL24 Protein is a research-grade cytokine belonging to the IL-10 family,以重组方式表达,用于支持肿瘤生物学、免疫调节和凋亡信号通路等领域的研究。
- 产品名称
- 重组人IL24蛋白
- 货号
- rp368362
- 蛋白家族
- IL-10细胞因子家族
- 物种来源
- 人(智人)
- 主要应用
- 细胞生物学、凋亡实验、癌症研究、免疫信号通路研究
- 储存建议
- 冻干蛋白建议储存于-20°C或-80°C;避免反复冻融
IL-24的生物学背景
白细胞介素-24(IL-24),又称黑色素瘤分化相关基因7(MDA-7),是属于IL-10细胞因子家族的多效性细胞因子。它通过两种异二聚体受体复合物发挥信号作用:IL-20Rα/IL-20Rβ和IL-22Rα1/IL-20Rβ,激活下游JAK-STAT信号通路,尤其是STAT1和STAT3。
IL-24具有独特的双重功能:在正常组织稳态中发挥促炎和免疫调节作用,同时对癌细胞表现出强效的肿瘤抑制活性。它能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成并抑制肿瘤生长,而不影响正常细胞,因此在肿瘤学研究领域备受关注。
IL-24由多种免疫细胞表达,包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、T辅助细胞2型(Th2细胞)和肥大细胞。其表达已在伤口愈合、银屑病、癌症和自身免疫性疾病的研究背景下得到广泛研究。
复溶与操作方案
正确复溶和操作重组人IL24蛋白(rp368362)对于维持其生物活性和实验重复性至关重要。请按照以下步骤操作:
- 平衡温度:开瓶前将小瓶在室温平衡10–15分钟,以减少冷凝水形成和蛋白质聚集。
- 复溶:将冻干IL-24蛋白溶于无菌、无内毒素的水或适当缓冲液中(如含0.1% BSA的PBS),储存液浓度通常为0.1–1.0 mg/mL。具体推荐复溶体积请参阅产品说明书。
- 温和混匀:请勿涡旋振荡,轻轻旋转或上下吹打使其溶解,静置10分钟确保完全溶解。
- 分装:复溶后立即进行单次使用量分装,以避免反复冻融导致蛋白活性下降。
- 复溶后储存:短期使用(7天内)可储存于4°C,长期储存应置于-20°C至-80°C。稀溶液建议添加载体蛋白(如0.1% BSA)。
注意:请务必参阅货号rp368362随附的产品说明书获取确切的复溶说明,因批次不同,条件可能有所差异。
研究应用
重组人IL24蛋白(rp368362)适用于多种体外和体内研究应用:
- 凋亡与癌症生物学:IL-24广泛用于研究其对人类癌细胞系(如乳腺癌、肺癌、前列腺癌、黑色素瘤)的选择性促凋亡效应,同时不影响正常细胞。可用于细胞活力检测、caspase激活实验及Annexin V凋亡实验。
- 细胞因子信号通路研究:适用于研究IL-20Rα/β和IL-22Rα1/IL-20Rβ受体复合物下游JAK1/TYK2介导的STAT1/STAT3磷酸化。
- 血管生成研究:已有报道表明IL-24可抑制VEGF表达和肿瘤血管生成;重组蛋白可用于内皮细胞管形成实验和迁移实验。
- 免疫学与炎症研究:可用于检测细胞因子产生、树突状细胞成熟或T细胞极化的实验,适用于伤口愈合、银屑病模型或自身免疫研究。
- 生物测定标准品:可用作ELISA检测生物样品中IL-24的阳性对照或标准品。
请通过实验验证工作浓度,因最佳剂量因细胞类型和实验格式而异。
质量、纯度与安全注意事项
在关键研究应用中选用重组人IL24蛋白时,请注意以下质量参数:
- 纯度:研究级重组细胞因子通常通过SDS-PAGE和/或HPLC测定,纯度>95%。请查阅货号rp368362的批次质量检验报告(CoA)获取具体批次纯度数据。
- 内毒素水平:内毒素污染会干扰细胞因子信号传导和免疫细胞实验。请确认内毒素水平符合您应用的可接受阈值(通常<1.0 EU/µg)。
- 生物活性:生物活性通常通过基于细胞的生物测定(如响应细胞系中的STAT磷酸化)进行确认。请查阅产品说明书了解报告的ED50值。
- 制剂:冻干制剂与液体制剂相比具有更长的货架期。请在说明书上确认辅料组成,以确保与下游实验兼容。
- 安全性:请按照机构生物安全指南操作所有重组蛋白。尽管IL-24是人类细胞因子,仍应将其视为潜在生物危害物,操作时请佩戴手套和实验服等适当的个人防护装备。
常见问题
重组人IL24蛋白在细胞实验中的推荐工作浓度是多少?
最佳工作浓度因细胞类型、实验方案和实验条件而异。文献报道的体外细胞因子信号传导和凋亡实验典型浓度范围为1–100 ng/mL。建议进行剂量-反应滴定实验,以确定特定实验体系的ED50值。请参阅货号rp368362产品说明书获取批次特异性生物活性数据。
如何储存重组人IL24蛋白以维持其活性?
冻干蛋白收货后应储存于-20°C,优选-80°C以保证长期稳定性。复溶后应制备单次使用量分装并储存于-80°C,以避免反复冻融导致生物活性显著下降。添加载体蛋白(如0.1% BSA)后,复溶蛋白可在4°C短期储存(最长一周)。
重组人IL24蛋白能否用于体外抗肿瘤效应研究?
可以。IL-24在文献中已被充分证实对多种人类癌细胞系(包括乳腺癌、肺癌、结肠癌和黑色素瘤来源细胞)具有选择性促凋亡和抗增殖效应,而不影响正常细胞。重组人IL24蛋白(rp368362)可应用于凋亡实验(Annexin V染色、caspase活性检测)、增殖实验(MTT、BrdU)以及磷酸化STAT3等下游信号标志物的Western blot检测。
IL-24通过哪些受体复合物发挥信号作用?
IL-24通过两种异二聚体II型细胞因子受体复合物发挥信号作用:IL-20Rα/IL-20Rβ和IL-22Rα1/IL-20Rβ。配体结合激活JAK1和TYK2激酶,导致STAT1和STAT3转录因子磷酸化和活化,从而介导IL-24的下游生物效应。
参考文献
- Persaud L, et al. Interleukin-24 (IL-24): A multi-functional role in human health and disease. Cytokine & Growth Factor Reviews. 2016.
- Sauane M, et al. MDA-7/IL-24: novel cancer growth suppressing and apoptosis inducing cytokine. Cytokine & Growth Factor Reviews. 2003.
- Donnelly RP, et al. IL-26: An IL-10-related cytokine produced by Th17 cells. Cytokine & Growth Factor Reviews. 2010. (contextual reference for IL-10 family classification)
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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