重组人INHBC蛋白:特性与应用
重组人INHBC蛋白:特性与应用
Recombinant Human INHBC Protein是TGF-β超家族的生物活性成员,在激活素/抑制素信号通路中发挥关键作用,在生殖生物学、肝脏功能及肿瘤研究领域具有广泛的应用价值。
- 蛋白名称
- 重组人INHBC蛋白
- 货号
- rp368373
- 蛋白家族
- TGF-β超家族,抑制素/激活素亚群
- 基因名称
- INHBC(抑制素β C亚基)
- 主要生物学功能
- 调节激活素信号转导;调控FSH分泌及肝细胞功能
- 主要研究应用
- 细胞信号转导研究、生殖生物学、肝脏研究、肿瘤生物学
INHBC简介:基因、结构与家族背景
INHBC,即抑制素β C亚基,是由INHBC基因编码的分泌蛋白,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员。该超家族涵盖多种结构相关蛋白,包括TGF-β、骨形态发生蛋白(BMPs)、激活素和抑制素,共同调控细胞增殖、分化、凋亡及组织稳态等广泛的细胞过程。
在结构上,INHBC具有TGF-β超家族保守的半胱氨酸结基序。成熟蛋白经大分子前体蛋白水解切割后生成,产生具有生物活性的C端结构域。INHBC可形成同源二聚体(激活素C)或与其他β亚基(如INHBA或INHBB)形成异源二聚体,从而增加激活素/抑制素系统的功能多样性。这种多聚体构型赋予INHBC在不同组织中信号转导的复杂性。
生物学功能与信号转导机制
INHBC主要通过调节激活素信号轴发挥生物学效应。激活素通过由I型受体(ALK4/ALK7)和II型受体(ACVR2A/ACVR2B)组成的异源受体复合物传递信号,导致SMAD2和SMAD3转录因子磷酸化,后者与SMAD4结合并转位至细胞核,调控靶基因表达。
含INHBC的二聚体(激活素C和激活素AC)已被报道可通过竞争共享受体结合位点,作为经典激活素A信号的部分拮抗剂或调节剂,潜在地减弱下游SMAD2/3的磷酸化水平。这一调节作用使INHBC在激活素系统中扮演细微调控者的角色,而非单纯的激动剂或拮抗剂。
INHBC功能已被研究的主要生物学背景包括:
- 生殖生物学:调节垂体前叶促卵泡素(FSH)的分泌,这是抑制素/激活素系统的标志性功能。
- 肝脏生物学:INHBC在肝脏中表达显著富集,提示其在肝细胞生理、肝脏再生及肝脏疾病中发挥作用。
- 肿瘤生物学:多种肿瘤类型中观察到INHBC表达改变,提示其参与肿瘤细胞增殖、抗凋亡及肿瘤微环境调控。
重组蛋白的生产与蛋白质量注意事项
重组人INHBC蛋白(货号:rp368373)采用重组表达系统生产,旨在获得适用于体外研究的具有生物活性且特性明确的蛋白质。在评估INHBC等TGF-β超家族重组蛋白时,研究人员应关注以下几个质量属性:
- 纯度:高纯度制备(通常通过SDS-PAGE和HPLC评估)可最大程度减少宿主细胞蛋白污染对细胞实验的干扰。
- 生物活性:功能验证(如确认SMAD2/3磷酸化诱导或受体结合实验)对于在实验中使用前确认蛋白活性至关重要。
- 内毒素水平:低内毒素含量对细胞培养应用至关重要,因为内毒素污染可激活先天免疫信号通路并干扰实验结果。
- 制剂与储存:正确复溶、使用载体蛋白(如BSA)、分装及在推荐温度下储存,是维持蛋白稳定性和活性的必要条件。
建议研究人员查阅rp368373产品数据表,获取表达宿主、纯度级别、内毒素规格、推荐复溶缓冲液及储存条件的具体信息。
重组人INHBC蛋白的研究应用
重组人INHBC蛋白是一种多功能研究工具,适用于多种实验场景。代表性应用包括:
- 体外细胞信号转导研究:用重组INHBC处理细胞系,可研究其对SMAD2/3磷酸化、基因表达变化及与其他TGF-β超家族配体相互作用的影响。
- 受体结合与竞争实验:可利用INHBC研究其与I型和II型激活素受体的亲和力,并表征其与激活素A或激活素B的竞争性相互作用。
- 增殖与凋亡实验:在肿瘤细胞系或原代肝细胞中,重组INHBC可用于检测其对细胞生长、存活及凋亡通路的影响。
- 生物测定阳性对照:作为明确的重组蛋白,INHBC适合用作多重细胞因子检测平台中的参考标准或阳性对照。
- 抗体验证:重组INHBC蛋白可作为抗原标准品,用于验证抗INHBC抗体在Western blot、ELISA和免疫沉淀实验中的特异性。
- 结构与生物物理研究:纯化蛋白支持生物物理表征,包括SEC-MALS、SPR及面向晶体学的TGF-β超家族配体-受体相互作用研究。
操作、复溶与储存最佳实践
为确保重组人INHBC蛋白(rp368373)的最佳性能,研究人员应遵循以下通用最佳实践(请以具体产品数据表为准):
- 复溶:冻干蛋白应用无菌水或推荐缓冲液(如含0.1% BSA的PBS)复溶至建议储存浓度。避免剧烈涡旋,建议轻柔吹打或旋转混匀,以保护蛋白完整性。
- 分装:复溶后立即制备单次使用分装,以尽量减少反复冻融次数,因冻融循环可导致蛋白聚集和生物活性丧失。
- 储存温度:按照规定在-20°C或-80°C储存冻干蛋白。复溶后的蛋白应在-80°C长期保存。
- 避免反复冻融:每次冻融循环均可能降低蛋白活性。条件允许时,每次实验使用新鲜解冻的分装蛋白。
- 无菌操作:在复溶和操作过程中保持无菌条件,防止微生物污染,尤其是在细胞培养应用中。
请始终参阅rp368373随附的官方产品数据表,以获取最准确、最具产品针对性的操作说明。
常见问题
INHBC的生物学功能是什么?
INHBC(抑制素β C亚基)是TGF-β超家族成员,可形成同源二聚体(激活素C)或与其他β亚基形成异源二聚体。它通过SMAD2/3通路调节激活素信号转导,并与FSH分泌调控、肝细胞生物学及肿瘤细胞行为相关。
重组人INHBC蛋白适用于哪些研究应用?
重组人INHBC蛋白(rp368373)适用于细胞信号转导研究、受体结合与竞争实验、增殖与凋亡实验、抗体验证(Western blot、ELISA、免疫沉淀),以及用作生物测定参考标准和生物物理表征实验。
重组人INHBC蛋白复溶后应如何储存?
复溶后,蛋白应分装为单次使用量,并在-80°C储存,以维持生物活性并防止反复冻融导致的降解。请务必参阅产品数据表获取该产品的具体储存建议。
INHBC与其他抑制素β亚基(如INHBA和INHBB)有何不同?
INHBA和INHBB分别形成经典的激活素A和激活素B同源二聚体,是SMAD2/3信号的强效激活剂;而含INHBC的二聚体(激活素C和激活素AC)通常被认为是该通路较弱的激活剂或调节剂,在某些情况下可能作为经典激活素信号的部分拮抗剂发挥作用。
为什么用于细胞培养的重组人INHBC蛋白的内毒素检测很重要?
重组蛋白制品中的内毒素(脂多糖,LPS)污染可激活培养细胞中的Toll样受体4(TLR4)及下游先天免疫信号级联,干扰实验结果,并将细胞反应错误归因于目的蛋白。因此,低内毒素含量是用于细胞实验的重组蛋白的关键质量标准。
参考文献
- Ling N, et al. (1986) Pituitary FSH is released by a heterodimer of the beta-subunits from the two forms of inhibin. Nature.
- Massagué J. (2012) TGFβ signalling in context. Nature Reviews Molecular Cell Biology.
- Gold E, et al. (2009) Activin C antagonizes activin A in vitro and overexpression leads to pathologies in vivo. American Journal of Pathology.
- Olsen OE, et al. (2015) Activin A inhibits BMP-signaling by binding ACVR2A and ACVR2B. Cell Communication and Signaling.
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