重组人KLK11蛋白:生物学特性与研究指南
重组人KLK11蛋白:生物学特性与研究指南
Recombinant Human KLK11 Protein是激肽释放酶相关肽酶家族的重组产物,是一种丝氨酸蛋白酶,在肿瘤学、生物标志物发现及蛋白水解级联反应研究中具有重要价值。
- 蛋白家族
- 激肽释放酶相关肽酶(KLK)家族
- 酶类别
- 丝氨酸蛋白酶
- 基因名称
- KLK11
- 物种来源
- 人(智人)
- 产品货号
- rp366220
- 研究领域
- 肿瘤学、生物标志物研究、蛋白水解级联反应
KLK11简介:生物学背景
激肽释放酶相关肽酶11(KLK11),又称hippostasin或TLSP(类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶),是一种由KLK11基因编码的分泌型丝氨酸蛋白酶。该基因位于19号染色体19q13.4区域的激肽释放酶基因簇内——该基因簇是人类基因组中最大的连续丝氨酸蛋白酶基因群。
KLK11属于激肽释放酶相关肽酶(KLK)家族,该家族包含15种结构相关的分泌型丝氨酸蛋白酶(KLK1–KLK15)。这些酶共享由组氨酸、天冬氨酸和丝氨酸残基构成的保守催化三联体,参与皮肤脱屑、精液液化、神经功能及组织重塑等多种生理过程。
KLK11具有类胰蛋白酶的蛋白水解活性,可切割碱性氨基酸残基(精氨酸和赖氨酸)羧基末端的肽键。其在前列腺、大脑、睾丸和唾液腺等多种组织中均有表达,且其表达受激素调控,尤其受雄激素和雌激素等类固醇激素的影响。
KLK11的表达、结构与生化特性
KLK11基因编码一个前体蛋白,经翻译后加工处理:信号肽引导蛋白质分泌,前肽区域被切割后生成成熟的活性蛋白酶。这种酶原激活机制是KLK家族的共同特征,有助于在体内对蛋白水解活性进行严格的时空调控。
在结构上,KLK11具有丝氨酸蛋白酶特征性的糜蛋白酶折叠,由包围催化三联体(His、Asp、Ser)的双β桶结构域构成。底物结合口袋(S1位点)赋予其类胰蛋白酶的特异性,可容纳带正电荷的残基侧链。
重组人KLK11蛋白(货号:rp366220)采用重组DNA技术生产,使研究人员能够获得定义明确、重复性好的蛋白质制品,适用于体外生化和细胞实验。重组生产可确保批次间质量的一致性、确定的活性,以及不含人源病原体污染。
重组人KLK11蛋白的研究应用
重组人KLK11蛋白是一种多用途研究工具,广泛应用于以下几个重要生物医学研究领域:
- 肿瘤学与生物标志物研究:KLK11已被作为前列腺癌、卵巢癌及其他癌症的潜在组织和血清生物标志物进行研究。在某些恶性肿瘤中观察到KLK11表达的升高或失调,使得重组KLK11蛋白在开发和验证免疫检测(ELISA、Western blot)以及作为诊断试剂开发中的校准品或阳性对照方面具有重要价值。
- 酶底物与抑制剂研究:重组KLK11蛋白可用于鉴定和表征生理底物,以及筛选蛋白酶抑制剂,这在肿瘤和炎症性疾病的治疗研究中具有重要意义。
- 蛋白水解级联反应研究:KLK11参与与皮肤生物学及其他潜在组织相关的KLK激活级联反应,重组蛋白可支持对这些级联反应进行体外机制研究。
- 抗体制备与验证:重组KLK11蛋白可作为免疫原用于抗体制备,并作为参考标准用于抗体特异性验证。
- 结构生物学:纯化的重组KLK11蛋白可支持晶体学、冷冻电镜或其他结构研究,以阐明底物识别决定因素。
操作、储存与质量注意事项
为确保重组人KLK11蛋白(rp366220)的最佳性能,研究人员应遵循以下最佳操作规范:
- 储存:按照产品说明书规定储存冻干或液态制品。一般而言,重组蛋白应储存于−20°C或−80°C(视制剂而定),并避免反复冻融,以防影响活性和结构完整性。请参阅rp366220产品说明书以获取确认的储存条件。
- 复溶:复溶冻干蛋白时,请使用说明书推荐的缓冲液,并在开启小瓶前使其恢复至室温。轻柔混匀,切勿剧烈涡旋。
- 活性验证:在关键实验前,建议使用适当的荧光肽底物法验证蛋白酶活性,并通过SDS-PAGE或Western blot确认蛋白完整性。
- 载体蛋白:制剂中可能含有BSA或其他载体蛋白以增强稳定性;请查阅产品说明书,以避免对下游实验造成干扰。
- 生物安全:尽管该蛋白为重组来源,并非直接来自人体组织,操作时仍应遵循标准良好实验室规范(GLP)。
有关批次特定活性数据、纯度评估及内毒素水平,请参阅每批次随附的质量检验报告(CoA)。
常见问题
KLK11的生物学功能是什么?
KLK11是一种具有类胰蛋白酶活性的分泌型丝氨酸蛋白酶,可在精氨酸和赖氨酸残基的羧基末端切割底物。它参与多种生理过程,包括组织重塑、皮肤脱屑级联反应和激素信号通路,并已被作为前列腺癌和卵巢癌的潜在肿瘤生物标志物进行研究。
重组人KLK11蛋白(rp366220)适用于哪些研究应用?
重组人KLK11蛋白适用于多种研究应用,包括酶活性和抑制剂筛选实验、生物标志物检测方法的开发与验证(如ELISA)、抗体制备和特异性检测、体外底物鉴定研究以及结构生物学研究。请务必在产品说明书中核实具体的已验证应用。
重组人KLK11蛋白应如何储存以保持活性?
重组人KLK11蛋白应按产品说明书规定的条件储存,通常为−20°C或−80°C。应避免反复冻融以防止活性损失;建议首次使用时进行分装。请参阅质量检验报告以获取批次特定的稳定性信息。
重组人KLK11蛋白是以活性形式还是酶原形式提供的?
重组人KLK11蛋白(rp366220)的供应形式(活性酶或酶原/无活性前体)应通过查阅产品说明书或质量检验报告加以确认。许多商业化重组激肽释放酶制品以活性形式供应;但研究人员在设计依赖活性的实验之前,应核实这一信息。
参考文献
- Diamandis EP, Yousef GM. Human tissue kallikreins: a family of new cancer biomarkers. Clin Chem. 2002;48(8):1198-1205. PMID:12142373
- Yousef GM, Diamandis EP. The new human tissue kallikrein gene family: structure, function, and association to disease. Endocr Rev. 2001;22(2):184-204. PMID:11294823
- Paliouras M, Diamandis EP. Intracellular signaling pathways regulate hormone-dependent kallikrein gene expression. Tumour Biol. 2008;29(3):149-159.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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