实验方案(Protocols)

重组人L3MBTL1蛋白:研究指南

Recombinant Human L3MBTL1 Protein 是一种染色质相关表观遗传读取蛋白,以重组方式生产,可用于组蛋白甲基化结合研究、染色质调控研究及相关生化检测。

产品名称
重组人L3MBTL1蛋白
货号
rp376604
蛋白家族
MBT(恶性脑肿瘤)结构域蛋白家族
生物功能
组蛋白甲基化赖氨酸读取因子;参与染色质压缩和转录抑制
主要研究领域
表观遗传学、染色质生物学、肿瘤生物学
推荐储存条件
-80°C长期储存;避免反复冻融

产品概述与生物学背景

L3MBTL1(致死性恶性脑肿瘤样蛋白1)是MBT结构域蛋白家族的成员,在表观遗传调控中发挥关键作用。该蛋白含有三个MBT重复结构域,可作为单甲基化和二甲基化组蛋白赖氨酸残基的读取因子,尤其识别组蛋白H4赖氨酸20(H4K20me1/me2)和组蛋白H1b赖氨酸26。通过这些相互作用,L3MBTL1参与染色质压缩和转录抑制,作为多种染色质修饰复合物的组成成分发挥功能。

重组人L3MBTL1蛋白(货号:rp376604)专为支持组蛋白-读取因子相互作用、染色质压缩机制及涉及多梳蛋白群调控网络的体外生化研究而生产。L3MBTL1还与肿瘤抑制、DNA损伤响应和细胞周期调控有关,使其成为肿瘤生物学研究中的重要靶点。

复溶与储存方案

复溶:开启样品瓶前,请先短暂离心,使冻干物料(如以冻干形式供应)沉集于瓶底。使用适当的无菌缓冲液复溶,例如含载体蛋白(如0.1% BSA)的磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4),以防止蛋白吸附于管壁。轻柔吹打混匀,切勿剧烈涡旋,以免蛋白变性。推荐的复溶体积和浓度请参考具体产品数据表。

储存条件:将复溶后的蛋白分装为单次用量,避免反复冻融。长期储存置于-80°C,短期使用(不超过1个月)可储存于-20°C。解冻后实验过程中置于冰上,切勿重新冷冻。稳定性因缓冲液组成和下游应用而异,请务必参阅产品数据表中的批次特定建议。

运输:产品通常在干冰条件下运输。收到后请立即转移至适当储存温度,并在样品瓶上记录收货日期以便追溯。

实验应用与使用指南

重组人L3MBTL1蛋白适用于多种生化及无细胞检测,包括但不限于:

  • 组蛋白肽段下拉实验:L3MBTL1可用于研究其与单甲基化和二甲基化组蛋白赖氨酸肽段(如H4K20me1、H4K20me2)之间的结合亲和力和特异性。
  • 蛋白-蛋白相互作用研究:可进行共免疫沉淀(Co-IP)或GST下拉实验,以鉴定L3MBTL1在染色质修饰复合物中的相互作用伙伴。
  • 凝胶迁移实验(EMSA):在特定条件下评估L3MBTL1与核小体或DNA的结合特性。
  • 酶联免疫吸附实验(ELISA)和表面等离子共振(SPR):定量检测L3MBTL1与组蛋白底物或小分子抑制剂之间的结合动力学。
  • 结构生物学:作为晶体学或冷冻电镜样品制备的组成成分,以原子分辨率解析MBT结构域与组蛋白的相互作用。

设计实验时,请设置适当的阳性和阴性对照,并针对每种检测形式凭经验优化蛋白浓度。使用时始终将蛋白置于冰上,尽量缩短在室温下的操作时间。

质量、纯度与安全注意事项

纯度与质量:重组人L3MBTL1蛋白(rp376604)在受控条件下生产,确保批次间的一致性。纯度通常通过SDS-PAGE和/或HPLC分析进行评估,内毒素水平经检测符合研究级标准。具体的纯度数值、内毒素阈值和活性数据见批次特定质量检验报告(CoA),可向爱拉丁科学申请获取。

生物安全:尽管该重组蛋白在标准实验室法规下未被归类为生物危险品,研究人员在操作任何重组蛋白时仍应遵守所在机构的生物安全规程和实验室最佳实践。应使用适当的个人防护装备(PPE),包括手套和实验服,避免皮肤和眼睛接触。

废弃处理:蛋白溶液及受污染材料的处置应遵守所在机构的化学和生物废弃物处理法规。

常见问题

重组人L3MBTL1蛋白推荐使用哪种缓冲液复溶?

通常推荐使用含0.1% BSA的无菌磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)作为复溶缓冲液,以维持蛋白稳定性并防止其吸附于管壁。请务必参阅批次特定数据表或质量检验报告,了解确切的推荐条件。

如何储存重组人L3MBTL1蛋白以最大限度地保持其稳定性?

复溶后,将蛋白分装为单次用量,置于-80°C长期储存以保持稳定性。避免反复冻融,因为这会导致蛋白聚集和活性丧失。实验时仅解冻所需分装量,并在整个使用过程中置于冰上。

重组人L3MBTL1蛋白已验证适用于哪些实验应用?

重组人L3MBTL1蛋白适用于组蛋白肽段下拉实验、蛋白-蛋白相互作用研究(Co-IP、GST下拉)、EMSA、ELISA、表面等离子共振(SPR)及结构生物学应用。货号rp376604的具体验证应用详见爱拉丁科学提供的产品数据表。

L3MBTL1在表观遗传调控中的生物学意义是什么?

L3MBTL1通过其MBT重复结构域识别单甲基化和二甲基化组蛋白赖氨酸标记(尤其是H4K20me1和H4K20me2),作为表观遗传读取因子发挥功能。这种识别促进染色质压缩和转录抑制。L3MBTL1还与肿瘤抑制和DNA损伤响应通路有关,使其在基础表观遗传学研究和肿瘤生物学中均具有重要意义。

参考文献

  1. Trojer P, et al. L3MBTL1, a histone-methylation-dependent chromatin lock. Cell. 2007;129(5):915-928. doi:10.1016/j.cell.2007.03.048
  2. Min J, et al. Structural basis for specific binding of Polycomb chromodomain to histone H3 methylated at Lys 27. Genes Dev. 2003;17(15):1823-1828. doi:10.1101/gad.269603
  3. Kalakonda N, et al. Histone H4 lysine 20 monomethylation promotes transcriptional repression by L3MBTL1. Oncogene. 2008;27(31):4293-4304. doi:10.1038/onc.2008.67

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 实验方案(Protocols)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人L3MBTL1蛋白:研究指南》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年11月3日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-l3mbtl1-protein-guidelines.html
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