重组人LAMA4蛋白:特性与应用
重组人LAMA4蛋白:特性与应用
Recombinant Human LAMA4 Protein是一种具有生物活性的细胞外基质组分,代表层黏连蛋白α4链,通过重组技术制备,可广泛应用于细胞生物学、血管生成及基底膜相关研究。
- 蛋白名称
- 重组人LAMA4蛋白(层黏连蛋白α4链)
- 基因名称
- LAMA4
- 蛋白家族
- 层黏连蛋白家族,细胞外基质糖蛋白
- 生物学功能
- 基底膜组成成分;介导细胞黏附、迁移、分化及血管生成
- 表达系统
- 重组表达(具体表达系统请以产品说明书为准)
- 主要应用
- 细胞黏附实验、血管生成研究、细胞外基质研究、细胞培养基底涂层
- 储存条件
- 请参阅产品说明书获取具体储存温度及缓冲液条件
LAMA4的定义及其生物学意义
LAMA4基因编码层黏连蛋白α4链,是细胞外基质(ECM)糖蛋白层黏连蛋白家族中α链亚基之一。层黏连蛋白是由α、β、γ链通过二硫键连接而成的大型异三聚体蛋白,形成十字形结构,是全身各处基底膜的主要结构组分。
LAMA4链特异性富集于血管基底膜、外周神经系统组织及造血微环境中,在调节内皮细胞行为、支持血管生成及维持组织结构方面发挥关键作用。研究表明,LAMA4的表达与血管发育、肿瘤进展及肌纤维组织化等过程密切相关。
由于其广泛的组织分布及在细胞-基质相互作用中的重要功能,LAMA4已成为肿瘤生物学、发育生物学及再生医学研究的重要研究靶点。
重组人LAMA4蛋白的生化特性
重组人LAMA4蛋白通过重组DNA技术制备,为体外研究提供了成分明确、批次一致的层黏连蛋白α4链来源。与组织来源制品相比,重组表达方式有效消除了批次间差异,保障了实验结果的重复性。
作为一种糖蛋白,LAMA4携带N-连接糖基化等翻译后修饰,这些修饰可影响其折叠、分泌及与整合素、肌营养不良聚糖等细胞表面受体的相互作用。研究人员应参阅产品说明书,以获取经验证的规格信息,包括分子量、纯度、内毒素水平及配方缓冲液,上述参数可能因批次而异。
此类重组蛋白通常采用的质量控制手段包括:SDS-PAGE纯度分析,以及确认功能性受体结合或促细胞黏附活性的生物活性检测。鲎试剂(LAL)法内毒素检测为标准质控程序,以确保蛋白适用于细胞实验。
研究应用
重组人LAMA4蛋白支持多种体外及离体研究应用:
- 细胞黏附实验:LAMA4可用于包被组织培养表面,研究整合素介导的细胞黏附、铺展及迁移,尤其适用于内皮细胞、造血祖细胞及肌肉细胞相关研究。
- 血管生成研究:作为血管基底膜组分,LAMA4可用于体外研究内皮细胞管状结构形成、出芽及血管形态发生。
- 细胞外基质重建:LAMA4可整合入已定义的ECM系统,或与其他基底膜蛋白联合使用,为2D及3D细胞培养模型构建具有生物学相关性的基底。
- 受体结合研究:重组LAMA4可作为底物或配体,用于检测其与整合素(如α6β1、α7β1)及其他ECM受体相互作用的结合研究。
- 肿瘤及癌症生物学:LAMA4的表达与肿瘤血管化及转移相关,使该重组蛋白在肿瘤学机制研究中具有重要价值。
操作、储存及实验注意事项
妥善操作重组ECM蛋白对于维持其结构完整性和生物活性至关重要。以下为重组人LAMA4蛋白的一般操作指南,具体操作请以产品说明书为准:
- 复溶:冻干制品应采用说明书推荐的缓冲液复溶。开瓶前应将样品瓶平衡至室温,以减少因冷凝水导致的蛋白降解。
- 分装:为避免反复冻融导致蛋白变性和生物活性降低,初次复溶后应立即分装成单次使用量,并按推荐温度储存。
- 表面包被:将LAMA4用作细胞培养基底时,应在适宜包被缓冲液中稀释至适当浓度,涂覆于表面后在推荐温度下孵育,吸除多余溶液后再铺种细胞。
- 内毒素敏感性:用于细胞实验时,请核实说明书中的内毒素规格。敏感性原代细胞培养优先选用低内毒素制品。
- 载体蛋白:部分制品含BSA作为载体蛋白以稳定目的蛋白。在设计实验时,需考虑白蛋白是否会干扰实验读数。
为何选择Aladdin Scientific重组人LAMA4蛋白
Aladdin Scientific致力于提供符合现代生命科学研究严格标准的高质量研究试剂。我们的重组人LAMA4蛋白(货号:rp365289)在受控条件下生产,确保实验间纯度、生物活性及重复性的一致性。
主要优势包括:
- 来源明确的重组蛋白,保障实验重复性
- 经纯度和生物活性质量控制
- 适用于细胞外基质、细胞生物学及疾病模型等多种研究应用
- 提供产品说明书等技术文件支持
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常见问题
LAMA4与其他层黏连蛋白α链有何区别?
LAMA4(层黏连蛋白α4)是已知五种层黏连蛋白α链(LAMA1–5)之一。与广泛表达于多种基底膜的LAMA1不同,LAMA4优先表达于血管内皮基底膜、造血组织及外周神经。这种组织特异性分布使LAMA4在血管生成、造血及血管生物学研究中具有特殊重要性。
重组人LAMA4蛋白最常用于哪些细胞类型的研究?
重组人LAMA4蛋白最常用于内皮细胞、造血干细胞及祖细胞、骨骼肌细胞以及外周神经相关细胞(如施万细胞)的研究。其在血管及造血基底膜中的表达模式,使其在心血管生物学及干细胞生物学研究中尤为适用。
如何储存重组人LAMA4蛋白以维持其生物活性?
重组ECM蛋白的一般最佳储存实践为:按产品说明书规定将冻干品储存于-20°C或-80°C,按需复溶,并分装成单次使用量以避免反复冻融。请务必参阅具体产品说明书获取经验证的储存条件,因配方差异可能影响蛋白稳定性。
重组人LAMA4蛋白能否用于3D细胞培养模型的包被?
是的,重组人LAMA4蛋白可整合入已定义的细胞外基质系统用于3D培养应用,可单独使用或与其他基底膜蛋白联合使用。最佳包被浓度和操作方案应根据具体细胞类型和支架系统通过实验摸索确定。
重组人LAMA4蛋白是否适用于体内实验?
本产品仅供科研使用,未经批准用于临床或治疗用途。如需用于任何体内研究,研究人员须参阅产品说明书自行核实内毒素水平、无菌性及生物相容性规格,并评估其是否适用于特定实验模型。
参考文献
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- Ringelmann B, Roder C, Hallmann R, et al. Expression of laminin alpha1, alpha2, alpha4, and alpha5 chains, fibronectin, and tenascin-C in skeletal muscle of dystrophic 129ReJ dy/dy mice. Experimental Cell Research. 1999;246(1):165-182. doi:10.1006/excr.1998.4244
- Patarroyo M, Tryggvason K, Virtanen I. Laminin isoforms in tumor invasion, angiogenesis and metastasis. Seminars in Cancer Biology. 2002;12(3):197-207. doi:10.1016/S1044-579X(02)00023-8
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