重组人LAMTOR3蛋白：功能与研究应用
重组人LAMTOR3蛋白：功能与研究应用
Recombinant Human LAMTOR3 Protein 是一种研究级重组蛋白，代表溶酶体Ragulator复合体的关键支架亚基，能够响应氨基酸可用性，促进mTORC1激活和MAPK信号转导。
- 蛋白名称
- 晚期内体/溶酶体衔接蛋白及MAPK与mTOR激活因子3（LAMTOR3）
- 别名
- MP1、ROBLD3、p14-MP1复合体伴侣蛋白
- 生物学功能
- 五聚体Ragulator复合体的支架亚基；mTORC1溶酶体募集和激活所必需；参与MAPK/ERK信号通路
- 蛋白形式
- 在异源表达系统中生产的重组人蛋白
- 主要研究应用
- 生化检测、蛋白质相互作用研究、结构研究、抗体验证、mTOR及MAPK通路研究
- 相关产品编号
- rp371363 — 重组人LAMTOR3蛋白（Aladdin Scientific）
LAMTOR3的生物学背景与功能
LAMTOR3，又称MP1（MEK伴侣蛋白1），是LAMTOR（晚期内体/溶酶体衔接蛋白、MAPK和mTOR激活因子）蛋白家族的成员。该蛋白由人类LAMTOR3基因编码，在五聚体Ragulator复合体中发挥结构性支架作用，该复合体还包括LAMTOR1（p18）、LAMTOR2（p14）、LAMTOR4和LAMTOR5。
Ragulator复合体锚定于晚期内体和溶酶体的胞质面，是氨基酸依赖性mTORC1（雷帕霉素靶蛋白复合体1）激活的关键平台。在营养充足条件下，Ragulator作为RagA/B GTP酶的鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF），促进mTORC1向溶酶体表面募集，进而被Rheb激活。LAMTOR3有助于维持该复合体的结构完整性，对Ragulator的正确溶酶体定位至关重要。
除在mTORC1信号通路中的作用外，LAMTOR3/MP1最初被鉴定为促进MEK1–ERK1在晚期内体上信号转导的支架蛋白。该内体MAPK信号区室在空间和时间上均不同于由质膜发起的MAPK级联反应，提示LAMTOR3有助于特异性调控ERK激活的亚细胞位置和持续时间。在mTOR和MAPK通路中的双重功能使LAMTOR3成为细胞生物学、肿瘤研究和代谢疾病领域广泛关注的蛋白质。
重组蛋白特性与质量注意事项
重组人LAMTOR3蛋白（Aladdin Scientific，货号：rp371363）采用异源表达系统生产，获得可溶性、具有功能活性的人LAMTOR3多肽，适用于体外研究应用。LAMTOR3的重组形式通常与亲和纯化标签（如His标签或GST标签）融合表达，以便于单步色谱纯化并用于基于标签的pulldown实验。
研究人员在实验使用前应确认的关键质量属性包括：（1）纯度——通常通过SDS-PAGE或HPLC评估，高纯度制品可最大程度减少结合实验中的非特异性效应；（2）内毒素水平——对于细胞实验至关重要，脂多糖污染可能干扰实验结果；（3）生物活性——理想情况下通过功能性实验验证，如与已知结合伴侣（例如LAMTOR2/p14或MEK1）的蛋白质相互作用实验；（4）储存与稳定性——冻干或液态制品各有不同的操作要求。研究人员应查阅产品数据表以获取批次特定的质量检验报告（CoA）。
注意：Aladdin Scientific rp371363产品的纯度、内毒素含量、分子量及表达宿主的具体数值应直接参考最新产品数据表或质量检验报告确认，因上述规格可能因批次而异。
重组人LAMTOR3蛋白的研究应用
重组人LAMTOR3蛋白是细胞生物学、生物化学和信号转导研究中多种实验方法的通用工具：
- 蛋白质相互作用研究：LAMTOR3与LAMTOR2（p14）直接相互作用，形成MP1-p14二聚体，即Ragulator复合体的核心单元。重组LAMTOR3可用于共免疫沉淀（co-IP）、pulldown实验、表面等离子体共振（SPR）和等温滴定量热法（ITC），以绘制结合界面图谱并表征相互作用亲和力。
- 结构生物学：重组LAMTOR3及其与结合伴侣形成的复合体适用于晶体学和冷冻电子显微镜研究，旨在解析Ragulator复合体的分子结构。
- mTORC1通路研究：LAMTOR3用于体外重建Ragulator亚复合体，用于RagGTP酶核苷酸交换和mTORC1溶酶体募集的机制研究。
- MAPK/ERK信号研究：作为晚期内体上MEK1-ERK1的支架蛋白，重组LAMTOR3支持区室特异性MAPK信号的研究。
- 抗体验证和免疫检测开发：纯化的重组LAMTOR3可作为阳性对照抗原，用于蛋白质印迹（Western blot）、ELISA和免疫荧光实验的开发及抗体特异性验证。
- 药物发现：作为在肿瘤和代谢疾病中失调的营养感知机制的组成部分，LAMTOR3是筛选Ragulator–Rag GTPase–mTORC1轴小分子抑制剂的潜在靶点。
操作、储存与实验技巧
为保持重组人LAMTOR3蛋白的活性和完整性，建议遵循以下通用最佳实践（请始终参考产品特定数据表说明）：
- 储存：收到产品后，开瓶前对小瓶进行短暂离心。按规定将冻干蛋白储存于–20 °C或–80 °C。重组或液态制品应分装保存，以避免反复冻融导致聚集和活性损失。
- 重组：使用推荐的复溶缓冲液（通常为无菌PBS或CoA中规定的缓冲液）。使用前待蛋白完全溶解，避免剧烈涡旋。
- 工作浓度：对每种具体实验进行浓度的经验性滴定。对于结合研究，应测试涵盖预期Kd范围的一系列浓度。
- 载体蛋白：对于稀释制品，加入BSA（0.1–0.5%）可稳定蛋白并减少其在管壁上的吸附损失。
- 质量检查：在关键实验前，通过还原和非还原条件下的SDS-PAGE验证蛋白完整性，并与CoA上标明的预期分子量和纯度进行比较。
研究人员如需特定应用指导及rp371363产品的最新规格信息，请咨询Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
LAMTOR3是什么，它在细胞生物学中为何重要？
LAMTOR3（又称MP1）是位于溶酶体膜上的五聚体Ragulator复合体的亚基。它具有双重功能：在晚期内体上充当MEK1-ERK1（MAPK）信号转导的支架蛋白，同时作为响应氨基酸可用性激活mTORC1所必需的结构组分。其在营养感知和生长因子信号转导中的双重参与使其与肿瘤、代谢疾病和自噬研究密切相关。
重组人LAMTOR3蛋白（rp371363）采用何种表达系统生产？
Aladdin Scientific货号rp371363的具体表达宿主应参考最新产品数据表或质量检验报告确认。LAMTOR3的常用表达系统包括大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞及哺乳动物细胞系统，各系统在产量、翻译后修饰和溶解度方面各有优缺点。请联系Aladdin Scientific技术支持或参阅产品页面以获取经确认的批次特定详情。
重组人LAMTOR3蛋白能否用于抗体验证？
可以。纯化的重组LAMTOR3蛋白非常适合作为阳性对照抗原，用于验证抗LAMTOR3抗体在蛋白质印迹（Western blot）、ELISA和免疫荧光等实验中的性能。在对细胞裂解液或组织切片等复杂生物样品进行实验前，使用重组蛋白作为明确的标准品有助于确认抗体的特异性和灵敏度。
重组人LAMTOR3蛋白应如何储存以维持稳定性？
通常建议将冻干蛋白储存于–20 °C或–80 °C，并将重组或液态制品分装保存，以避免反复冻融。请务必参阅rp371363产品数据表或质量检验报告中规定的具体储存条件，因为最佳条件取决于制剂缓冲液和蛋白浓度。
LAMTOR3是否与肿瘤或疾病研究相关？
是的。LAMTOR3在mTORC1营养感知和内体MAPK/ERK信号转导中的作用，使其处于肿瘤和代谢疾病中频繁失调通路的交汇点。mTORC1和ERK信号的异常激活促进肿瘤生长、耐药性和代谢重编程，使得包括LAMTOR3在内的Ragulator复合体组分成为肿瘤学和精准医学研究的热点。
参考文献
- Sancak Y, Bar-Peled L, Zoncu R, Markhard AL, Nada S, Sabatini DM. Ragulator-Rag complex targets mTORC1 to the lysosomal surface and is necessary for its activation by amino acids. Cell. 2010;141(2):290-303. doi:10.1016/j.cell.2010.02.024
- Bar-Peled L, Schweitzer LD, Zoncu R, Sabatini DM. Ragulator is a GEF for the rag GTPases that signal amino acid levels to mTORC1. Cell. 2012;150(6):1196-1208. doi:10.1016/j.cell.2012.07.032
- Teis D, Wunderlich W, Huber LA. Localization of the MP1-MAPK scaffold complex to endosomes is mediated by p14 and required for signal transduction. Dev Cell. 2002;3(6):803-814. doi:10.1016/S1534-5807(02)00364-7
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