重组人MCC蛋白:特性与研究使用指南
重组人MCC蛋白:特性与研究使用指南
Recombinant Human MCC Protein是一种研究级肿瘤抑制蛋白,可帮助科研人员研究MCC介导的细胞增殖、凋亡及Wnt信号通路调控在结直肠癌等癌症模型中的作用。
- 产品名称
- 重组人MCC蛋白
- 货号
- rp373773
- 蛋白来源
- 人源(智人)
- 蛋白类别
- 肿瘤抑制蛋白
- 主要研究领域
- 结直肠癌生物学、Wnt信号通路
- 推荐储存条件
- 储存于-80°C,避免反复冻融
背景:MCC蛋白生物学
结直肠癌突变基因(MCC)编码一种胞质蛋白,最初因其在结直肠癌中频繁发生体细胞突变和表达缺失而被鉴定。MCC被归类为肿瘤抑制因子,在调控细胞周期进程和细胞凋亡中发挥重要作用。研究表明,MCC参与负调控Wnt/β-catenin信号通路——该通路对细胞命运、增殖和分化至关重要。MCC功能的丧失不仅见于结直肠癌,也出现于其他恶性肿瘤,提示其在肿瘤发生中具有更广泛的作用。重组人MCC蛋白为研究人员提供了明确定义、高度纯化的蛋白来源,适用于体外生化及细胞生物学研究。
蛋白规格与质量注意事项
重组人MCC蛋白(货号:rp373773)采用重组表达系统生产,以确保实验间的一致性和可重复性。在评估该蛋白用于您的实验时,以下规格参数至关重要:
- 物种:人源(智人)
- 蛋白鉴定:使用前应通过SDS-PAGE和/或Western blot进行确认。
- 纯度:研究级重组蛋白通常通过SDS-PAGE进行评估;请参阅产品说明书(absea#PP-7628)获取批次特异性纯度数据。
- 内毒素水平:对细胞实验至关重要;请在质量检验报告(CoA)中核实内毒素指标。
- 制剂缓冲液:请查阅CoA以了解确切的缓冲液成分,确保与下游实验相容。
使用前请务必索取并审阅批次特异性CoA和说明书,以确认所有参数符合您的实验要求。
操作、复溶与储存规程
正确操作重组人MCC蛋白对于维持生物活性和实验可重复性至关重要。请遵循以下操作指南:
- 收货后:检查小瓶完整性。若蛋白以冻干形式提供,开瓶前请短暂离心,使材料集中于瓶底。
- 复溶:按产品说明书推荐的缓冲液(通常为无菌水或磷酸盐缓冲盐水类缓冲液)复溶冻干蛋白。加入缓冲液后,让小瓶在室温静置数分钟,轻轻混匀——切勿涡旋振荡。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的分装,以减少因反复冻融造成的蛋白降解。
- 短期储存:若蛋白将在1–2周内使用,请将分装保存于4°C。
- 长期储存:储存于-80°C。添加载体蛋白(如0.1% BSA)可增强长期储存稳定性——具体建议请参阅说明书。
- 避免:反复冻融、暴露于25°C以上温度,以及若蛋白带有荧光标记则避免长时间光照。
注意:复溶体积和储存条件可能因批次而异,请务必查阅批次特异性产品说明书。
研究应用
重组人MCC蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 蛋白质相互作用研究:MCC已被报道与Wnt信号通路组分(包括β-catenin)相互作用。可使用该重组蛋白进行pull-down实验和共免疫沉淀实验,以绘制相互作用结构域图谱。
- 生化实验:在设计用于检测或定量MCC蛋白水平的ELISA和Western blot实验中,用作阳性对照或标准品。
- 结构生物学:作为纯化重组蛋白来源,可用于生物物理表征研究。
- 功能性回复实验:可将重组MCC蛋白导入MCC缺陷细胞系,研究MCC恢复对Wnt信号通路或细胞增殖功能结果的影响。
- 药物发现:作为靶标蛋白,用于筛选能够调节MCC功能或其与结合伴侣相互作用的小分子或抗体。
建议研究人员在其特定实验体系中使用适当的阳性和阴性对照,对蛋白活性进行验证。
常见问题排查
在使用重组人MCC蛋白时如遇问题,请参考以下排查指南:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| Western blot信号弱或缺失 | 蛋白降解或抗体不兼容 | 检查储存条件;确认抗体能识别重组形式;确认转膜效率 |
| 复溶后蛋白聚集 | 复溶缓冲液不当或温度骤变 | 使用推荐缓冲液;复溶前使小瓶平衡至室温;开瓶前离心 |
| 结合实验背景偏高 | 内毒素污染或非特异性结合 | 在CoA上核实内毒素水平;加入适当封闭步骤和阴性对照 |
| 储存后活性丧失 | 反复冻融 | 复溶后立即分装;将分装保存于-80°C |
如问题无法解决,请联系Aladdin Scientific技术支持,并提供产品货号(rp373773)、批次号及详细实验条件描述。
常见问题
MCC蛋白是什么?它在癌症研究中为何重要?
MCC(结直肠癌突变基因)是由MCC基因编码的肿瘤抑制蛋白,该基因在结直肠癌中频繁发生突变或沉默。MCC参与调控Wnt/β-catenin信号通路、细胞周期控制及细胞凋亡。对MCC功能的研究有助于阐明肿瘤抑制机制,并可能为开发新型治疗策略提供依据。
如何复溶和储存重组人MCC蛋白(rp373773)?
若以冻干形式提供,请先短暂离心小瓶,然后使用产品说明书指定的缓冲液进行复溶。轻轻混匀,不要涡旋振荡,静置数分钟。立即制备单次使用分装,长期储存于-80°C。避免反复冻融,以保持蛋白完整性和活性。
重组人MCC蛋白适用于哪些实验应用?
重组人MCC蛋白适用于多种体外实验,包括蛋白质相互作用研究(如pull-down、共免疫沉淀)、Western blot或ELISA对照、MCC缺陷细胞系功能回复实验以及药物发现筛选实验。研究人员应使用适当对照在其特定实验体系中验证蛋白活性。
收到货后如何确认蛋白的鉴定和纯度?
收货后,请查阅随产品附带的批次特异性质量检验报告(CoA),了解通常通过SDS-PAGE评估的纯度数据。可进一步使用能识别重组形式的抗MCC抗体通过Western blot确认蛋白鉴定。若对产品质量存有疑虑,请携带批次号联系Aladdin Scientific客户支持。
重组人MCC蛋白是否适用于细胞实验?
重组人MCC蛋白可能适用于细胞实验,但在使用前必须在质量检验报告(CoA)上核实内毒素水平,因为内毒素污染会干扰细胞实验结果。请参阅产品说明书了解适用浓度指导,并确认与您特定细胞体系的兼容性。
参考文献
- Kinzler KW, et al. Identification of a gene located at chromosome 5q21 that is mutated in colorectal cancers. Science. 1991.
- Matsumine A, et al. Binding of APC to the human homolog of the Drosophila discs large tumor suppressor protein. Science. 1996.
- Aladdin Scientific Product Datasheet: Recombinant Human MCC Protein, SKU rp373773, absea#PP-7628.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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