重组人MCMBP蛋白:研究指南
重组人MCMBP蛋白:研究指南
Recombinant Human MCMBP Protein是一种研究级试剂,专为支持微小染色体维持复合物结合蛋白功能、DNA复制许可及人类细胞生物学中染色质动态研究而设计。
- 产品名称
- 重组人MCMBP蛋白
- 货号
- rp376937
- 蛋白来源
- 人源(智人)
- 蛋白类型
- 重组蛋白,全长或特定片段(详见数据表)
- 主要应用
- DNA复制与染色质研究、蛋白质相互作用研究
- 供应商
- Aladdin Scientific
- 储存条件
- 请参阅产品数据表了解推荐储存温度及缓冲液条件
MCMBP的生物学背景
MCM结合蛋白(MCMBP,又称MCM-BP)是一种核蛋白,能与微小染色体维持(MCM)复合物相互作用。MCM复合物是一种六聚体解旋酶,对真核生物DNA复制至关重要。MCM2–7复合物在细胞周期G1期被加载至染色质复制起始位点,授权复制起始位点进行单轮复制。MCMBP已被报道能与MCM亚基相互作用,可能在调控MCM复合物的组装、解聚或染色质结合方面发挥调控作用,从而影响复制许可的保真性。
研究表明,MCMBP在真核生物中高度保守,在增殖型人类细胞中广泛表达,与其参与细胞周期进程的功能相一致。包括MCM相关蛋白在内的复制许可因子的异常调控与基因组不稳定性密切相关,使MCMBP成为癌症生物学和细胞周期研究的重要研究对象。
产品描述与规格
Aladdin Scientific重组人MCMBP蛋白(货号:rp376937)采用重组表达技术生产,提供适用于体外生化研究的研究级蛋白。该蛋白来源于人源MCMBP基因序列(智人),适用于多种分子生物学和细胞生物学实验。
具体规格参数——包括精确分子量、表达宿主系统(如大肠杆菌、昆虫细胞或哺乳动物细胞)、纯度等级、内毒素水平、配方缓冲液及推荐储存条件——均载于Aladdin Scientific提供的产品专属数据表中。强烈建议研究人员在实验使用前查阅最新数据表(产品编号PP-10456 / rp376937),以确认批次特异性质量控制数据。
此类重组蛋白的典型质量属性包括:
- 通过SDS-PAGE和/或HPLC评估纯度
- 通过Western blot或质谱法确认蛋白身份
- 通过功能实验确认生物活性(如适用)
研究应用
重组人MCMBP蛋白适用于细胞与分子生物学研究中的多种实验场景:
- 蛋白质–蛋白质相互作用研究:MCMBP可作为诱饵或猎物蛋白用于pull-down实验、共免疫沉淀实验或表面等离子共振(SPR)分析,以绘制其与MCM2–7亚基及其他复制因子的相互作用图谱。
- 生化重组:该重组蛋白可实现部分复制许可复合物的体外重组,用于解析MCMBP在MCM加载或卸载事件中的机制贡献。
- 抗体验证:重组MCMBP可作为阳性对照抗原,用于通过Western blot、ELISA或点印迹法验证抗MCMBP抗体。
- 结构研究:高纯度重组蛋白支持冷冻电子显微镜(cryo-EM)或X射线晶体学等结构生物学方法,以解析MCMBP–MCM复合物的结构构架。
- 药物发现筛选:MCMBP可作为靶蛋白,用于针对DNA复制通路的肿瘤学项目中的结合或抑制实验。
操作、储存与实验技巧
为维护重组人MCMBP蛋白的完整性和生物活性,研究人员应遵循以下通用最佳操作规范:
- 储存:首次解冻后立即分装,避免反复冻融导致蛋白聚集和活性丧失。具体温度要求请参阅产品数据表。
- 操作:实验准备过程中将蛋白置于冰上。使用低吸附微量离心管,以减少吸附损失,尤其在低蛋白浓度条件下尤为重要。
- 缓冲液兼容性:验证蛋白随附配方缓冲液与下游实验条件的兼容性。某些应用可能需要透析或缓冲液置换。
- 浓度测定:使用前通过经验证的方法(如BCA法或Bradford法)测定蛋白浓度,因为运输和储存条件有时会影响浓度。
- 质量控制检查:收货后运行SDS-PAGE或Western blot,对照数据表规格确认蛋白完整性、分子量和纯度。
本产品的所有使用应符合适用的机构生物安全指南及标准实验室安全规程。
常见问题
MCMBP在人类细胞中的生物学功能是什么?
MCMBP(微小染色体维持复合物结合蛋白)与MCM2–7解旋酶复合物相互作用,该复合物对真核生物DNA复制起始位点的许可至关重要。MCMBP被认为能调控MCM亚基与染色质的结合或解离,从而调节复制许可并在细胞分裂过程中维护基因组稳定性。
rp376937使用何种表达系统生产,这是否会影响蛋白活性?
rp376937(重组人MCMBP蛋白)的具体表达宿主详见Aladdin Scientific产品数据表。重组人源蛋白的常用表达系统包括大肠杆菌、杆状病毒–昆虫细胞及哺乳动物细胞系统,各系统提供不同的翻译后修饰特征。需要特定糖基化或折叠特性的研究人员应查阅数据表或联系Aladdin Scientific技术支持。
重组人MCMBP蛋白可用作Western blot实验的阳性对照吗?
是的,重组人MCMBP蛋白非常适合用作Western blot实验中的阳性对照抗原,用于验证抗MCMBP抗体。将适量重组蛋白与细胞裂解液样品同时上样,并按产品数据表所示的预期分子量确认检测结果。
如何储存重组人MCMBP蛋白以保持其活性?
收到产品后,建议将蛋白分装为单次使用量,并按产品数据表规定的温度和缓冲液条件储存。避免反复冻融,因为这可能导致蛋白聚集并降低生物活性。对于短期使用,根据配方不同,在4°C冰上短期储存可能是可接受的。
重组人MCMBP蛋白适用于结构生物学应用吗?
重组人MCMBP蛋白可能适用于冷冻电镜或X射线晶体学等结构生物学研究,前提是需确认足够的纯度和均一性。从事结构应用研究的人员应核实数据表中的批次特异性纯度数据,并根据实验方案需要考虑进行额外的纯化步骤。
参考文献
- Sakwe AM, Nguyen T, Athanasopoulos V, Shire K, Frappier L. Identification and characterization of a novel component of the human minichromosome maintenance complex. Mol Cell Biol. 2007;27(8):3044–3055. doi:10.1128/MCB.02384-06
- Nishiyama A, Frappier L, Méchali M. MCM-BP regulates unloading of the MCM2-7 helicase in late S phase. Genes Dev. 2011;25(2):165–175. doi:10.1101/gad.614411
- Aladdin Scientific. Recombinant Human MCMBP Protein (rp376937) Product Datasheet. Aladdin Scientific; [current version].
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)