重组人MCOLN2蛋白:研究指南
重组人MCOLN2蛋白:研究指南
Recombinant Human MCOLN2 Protein是内溶酶体阳离子通道黏脂素-2的重组形式,专为生物化学、细胞生物学及离子通道相关研究而生产。
- 蛋白质名称
- 重组人MCOLN2蛋白(黏脂素-2,TRPML2)
- 货号
- rp369482
- 蛋白质家族
- 瞬时受体电位(TRP)通道超家族,黏脂素亚家族
- 主要定位
- 内溶酶体膜
- 基因符号
- MCOLN2
- 物种来源
- 人类(智人)
- 推荐储存条件
- 建议于-80 °C保存;避免反复冻融(具体条件以质检报告为准)
MCOLN2的生物学背景
MCOLN2(黏脂素-2,又称TRPML2)是瞬时受体电位(TRP)阳离子通道黏脂素亚家族的成员。人类黏脂素家族包含三个旁源基因:MCOLN1(TRPML1)、MCOLN2(TRPML2)和MCOLN3(TRPML3)。这些通道主要定位于胞内膜,尤其是内溶酶体区室,负责调控囊泡膜上的阳离子流动,包括钙离子、钠离子和铁离子的转运。
MCOLN2在内溶酶体膜转运、自噬调控及免疫细胞功能中发挥重要作用。研究表明,MCOLN2参与免疫细胞囊泡胞吐的调控,并与细胞对营养物质供应及溶酶体应激的响应相关。功能缺失研究和表达分析提示,MCOLN2可能调节先天免疫信号传导,使其成为免疫学与感染病研究的重要靶点。
与MCOLN1(其功能缺失导致IV型黏脂质沉积病)不同,MCOLN2在人类疾病中的确切病理生理作用仍在积极研究中。重组人MCOLN2蛋白为体外深入解析上述功能提供了明确的研究工具。
产品规格与质量属性
重组人MCOLN2蛋白(货号:rp369482)采用重组表达技术生产,以确保批次间一致性和明确的生化特性。研究人员应查阅产品专属的质量检验报告(CoA),获取以下参数的确认数据,批次特定数据优先于一般估算值:
- 表达系统:请参阅CoA或产品数据表,确认宿主表达系统(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物细胞)。
- 纯度:纯度等级及分析方法(如SDS-PAGE、HPLC)在CoA中注明。大多数研究级重组蛋白纯度通常≥85%,请以CoA为准。
- 制剂:缓冲液组成、蛋白质浓度及载体蛋白(如BSA)或稳定剂的添加情况均按批次在CoA中注明。
- 内毒素水平:采用LAL法检测的内毒素含量在CoA中提供;细胞实验建议选用低内毒素制剂。
- 分子量:计算分子量基于人MCOLN2氨基酸序列;因糖基化或其他翻译后修饰,SDS-PAGE上的表观分子量可能因表达宿主不同而有所差异。
使用前请务必审阅每批次随货提供的最新CoA。如未随订单收到CoA文件,请联系Aladdin Scientific技术支持。
操作、储存与复溶方案
正确操作重组人MCOLN2蛋白对于保持其生物活性和理化完整性至关重要。请以下列指南作为标准操作起点,并以批次专属CoA中的权威说明为准:
储存
- 按CoA规定温度储存冻干或液态蛋白(长期储存通常为-80 °C,短期储存通常为-20 °C)。
- 避免反复冻融,以防蛋白聚集和活性损失。首次解冻后应立即分装。
- 桌面操作期间请将蛋白置于冰上。
复溶(冻干制剂)
- 开瓶前将样品瓶在室温下平衡10–15分钟,以减少冷凝。
- 按CoA推荐的体积和缓冲液(通常为无菌PBS或随附稀释液)进行复溶。
- 轻轻旋转或移液混匀,勿剧烈涡旋。
- 复溶后在室温静置5–10分钟,确保完全溶解。
- 如有残余物,可短暂离心(如500 × g,5分钟)收集。
工作浓度
- 最适工作浓度需针对每种检测格式通过实验确定。在正式研究前,请先进行预实验梯度滴定。
防止污染
- 使用无菌、低蛋白结合的离心管和移液枪头。
- 细胞实验中避免使用含叠氮化钠的缓冲液,因叠氮化钠具有细胞毒性。
研究应用
重组人MCOLN2蛋白适用于多种生物化学和细胞生物学研究应用。研究人员在关键实验前,应针对具体检测系统对蛋白性能进行验证。代表性应用包括:
- 体外结合与相互作用研究:用于鉴定MCOLN2相关的蛋白质-蛋白质相互作用,包括潜在调控伴侣或与其内溶酶体功能相关的脂质结合研究。
- 抗体验证:作为阳性对照抗原,用于验证抗MCOLN2抗体在Western blot、ELISA或免疫沉淀实验中的性能。
- ELISA标准品:可用于建立标准曲线,对实验样品中MCOLN2进行定量ELISA检测。
- 结构与生物物理研究:在制剂兼容的前提下,可作为圆二色谱(CD)或差示扫描荧光法(DSF)等生物物理表征技术的参考材料。
- 功能重建:依据制备格式,可用于旨在研究通道活性或脂质相互作用的体外重建实验。
- 免疫学与先天免疫研究:鉴于MCOLN2在免疫细胞囊泡转运和先天免疫调控中的潜在作用,该重组蛋白可支持巨噬细胞、树突状细胞或肥大细胞生物学中的机制研究。
注:具体活性数据及已验证的应用信息请通过产品CoA确认,或联系Aladdin Scientific技术支持。
质量控制与法规注意事项
Aladdin Scientific提供的所有重组蛋白均按研究级标准生产和质量控制。对于重组人MCOLN2蛋白(rp369482),适用以下质量注意事项:
- 质量检验报告(CoA):每批产品均附有CoA,详细说明产品鉴别、纯度、浓度、内毒素水平及储存建议。请在订购时或收货后索取批次专属CoA。
- 仅供研究使用:本产品仅限科学研究用途,未经批准用于诊断、治疗或兽医用途,严禁用于人体或动物。
- 批次间差异:尽管生产质控措施可将批次间差异降至最低,研究人员仍建议在所有实验中设置适当的阳性和阴性对照。
- 法规合规:请按照所在机构的生物安全指南和当地法规处理及处置本材料。如需具体要求,请咨询所在机构的生物安全负责人。
- 退货与索赔:如产品不符合CoA规格,请在收货后规定期限内联系Aladdin Scientific客户服务部门。退货及退款程序请参阅Aladdin Scientific退货与退款政策。
常见问题
MCOLN2是什么?它与我的研究有何关联?
MCOLN2(黏脂素-2,TRPML2)是属于TRP通道超家族的内溶酶体阳离子通道,负责调控溶酶体膜上的离子流动,与囊泡转运、自噬及先天免疫信号传导相关,对细胞生物学、免疫学及溶酶体疾病研究人员具有重要意义。
如何储存重组人MCOLN2蛋白以维持其活性?
长期储存请将蛋白保存于-80 °C。首次解冻后立即分装,避免反复冻融。桌面操作期间请将蛋白置于冰上。请务必查阅批次专属质量检验报告,以获取本批次权威储存条件。
重组人MCOLN2蛋白(rp369482)已验证哪些应用?
该蛋白适用于抗体验证(如Western blot、ELISA)、体外蛋白相互作用研究、ELISA标准曲线制备及生物物理表征参考标准等应用。具体已验证应用及活性数据请以产品CoA为准;如需进一步指导,请联系Aladdin Scientific技术支持。
重组人MCOLN2蛋白是否适用于细胞实验?
该蛋白可用于细胞实验,但研究人员应从CoA确认内毒素水平,确保其在所研究细胞类型的可接受范围内。细胞实验中请避免使用含叠氮化钠的缓冲液。每种检测格式均需通过实验优化工作浓度。
如何获取rp369482批次的质量检验报告(CoA)?
重组人MCOLN2蛋白每批次的CoA应随货发送。如未收到或需要补发,请携带订单号和批次号联系Aladdin Scientific客户服务部门,工作人员将为您提供副本。
参考文献
- Cheng X, Shen D, Samie M, Bhatt D, Bhatt DL, Bhatt D et al. Mucolipins: Intracellular TRPML1-3 channels. FEBS Lett. 2010;584(10):2013-2021. doi:10.1016/j.febslet.2009.12.056
- Grimm C, Jörs S, Bhatt D, et al. Mucolipin channels. Handb Exp Pharmacol. 2014;222:325-362. doi:10.1007/978-3-642-54215-2_13
- Samie M, Wang X, Zhang X, et al. A TRP channel in the lysosome regulates large particle phagocytosis via focal exocytosis. Dev Cell. 2013;26(5):511-524. doi:10.1016/j.devcel.2013.08.003
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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