重组人MDC1蛋白:常见问题与关键信息
重组人MDC1蛋白:常见问题与关键信息
Recombinant Human MDC1 Protein是DNA损伤检查点应答的关键介导因子,作为支架蛋白在双链断裂位点放大γ-H2AX信号,协调下游DNA修复机制。
- 产品名称
- 重组人MDC1蛋白
- 货号
- rp366601
- 来源/表达系统
- 重组蛋白;具体表达宿主请参阅产品数据表
- 生物学功能
- MDC1(DNA损伤检查点介导因子1)在DNA双链断裂处招募修复因子至γ-H2AX焦点,并维持检查点信号传导
- 主要研究应用
- DNA损伤应答研究、检查点信号检测、蛋白相互作用(pull-down/co-IP)、结构生物学
- 推荐储存条件
- 长期储存于-80°C;避免反复冻融(具体条件请以产品数据表为准)
- 质量/纯度
- 纯度规格请以产品数据表为准;典型重组蛋白经SDS-PAGE检测纯度通常≥85%
MDC1是什么?为何在研究中具有重要意义?
MDC1(DNA损伤检查点介导因子1,又称KIAA0170)是一种大型核蛋白,在细胞对DNA双链断裂(DSB)的应答过程中发挥核心支架作用。DSB形成后,组蛋白变体H2AX在Ser-139位点迅速磷酸化(生成γ-H2AX),MDC1通过其串联BRCT结构域直接与γ-H2AX结合。该相互作用将MDC1锚定于损伤焦点,并促进RNF8、MRN复合物组分及53BP1等修复和信号因子的招募,从而放大DNA损伤应答(DDR)信号。
由于MDC1处于DDR信号通路的关键节点,其在基因组稳定性、肿瘤生物学及DNA损伤治疗策略开发等领域被广泛研究。重组人MDC1蛋白(rp366601)为研究人员提供了经过充分表征的工具,可用于上述通路的体外生化和结构研究。
蛋白规格与质量标准
重组人MDC1蛋白(货号:rp366601)采用重组表达技术生产。研究人员应查阅官方产品数据表以获取最新权威规格信息,包括:
- 表达宿主:请以数据表为准(大型核蛋白常用大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物细胞系统表达)。
- 标签信息:为便于纯化,蛋白可能含有亲和标签或表位标签;标签类型及位置请参阅数据表。
- 纯度:阿拉丁科学的重组蛋白通常经SDS-PAGE及其他适当方法表征;目标纯度及质控数据见数据表。
- 制剂:以特定缓冲液供应;可能提供冻干或液态形式——请以数据表为准。
在用于敏感实验之前,请务必核实批次特定的质量检验证书(CoA),确认纯度、活性和内毒素水平。
推荐储存、操作与复溶方法
适当的储存和操作对于维持重组人MDC1蛋白的活性和完整性至关重要。重组蛋白的通用最佳操作规范如下:
- 长期储存:建议在-80°C长期保存,具体温度请以产品数据表为准。
- 短期储存:根据制剂不同,-20°C可用于数周内的短期保存。
- 冻融次数:尽量减少冻融次数(理想情况下≤3次),以防止蛋白聚集和活性丧失。首次解冻后应立即分装。
- 复溶(冻干产品):按数据表推荐的缓冲液复溶。开瓶前让样品恢复至室温,必要时短暂离心。
- 工作液:当天新鲜配制工作浓度稀释液,避免长时间置于室温。
若发现沉淀或异常浑浊,请在继续实验前联系阿拉丁科学技术支持。
重组人MDC1蛋白的研究应用
重组人MDC1蛋白是一种用途广泛的试剂,适用于多种体外研究应用:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:MDC1的BRCT和FHA结构域介导其与γ-H2AX、RNF8、NBS1及其他DDR因子的相互作用。利用重组MDC1进行pull-down和共免疫沉淀(co-IP)实验,有助于从生化层面解析这些相互作用。
- 结构与生物物理研究:重组MDC1蛋白或其结构域可用于晶体学、冷冻电镜或生物物理表征(SPR、ITC),以阐明结合机制。
- 酶学与结合实验:MDC1招募E3泛素连接酶;重组蛋白可作为泛素化通路实验中的底物或结合配体。
- 抗体验证:重组MDC1蛋白可作为阳性对照抗原,用于Western blot、ELISA或免疫荧光实验中抗MDC1抗体的验证。
- 药物发现:MDC1是肿瘤治疗增敏的潜在靶点;重组蛋白可用于筛选破坏MDC1-γ-H2AX或MDC1-NBS1相互作用的小分子化合物。
订购、技术支持与质量保证
重组人MDC1蛋白可通过阿拉丁科学订购,货号为rp366601。下订单或寻求技术支持时,请准备好货号和批次号。
- 订购:可直接通过阿拉丁科学官网下单,或联系当地销售代表。大批量订购及定制制剂可按需申请。
- 质量检验证书(CoA):输入产品货号和批次号,可在阿拉丁科学官网获取批次特定的CoA,其中包含每个生产批次的纯度、活性及制剂数据。
- 技术支持:如有应用相关问题、复溶指导或故障排除需求,请通过官网或电子邮件联系阿拉丁科学技术支持,沟通时请注明货号rp366601。
- 退货与退款:收货后请及时验货。如有质量问题,请在阿拉丁科学退货政策规定的期限内联系客服,并提供批次号和问题描述。
常见问题
MDC1蛋白的生物学功能是什么?
MDC1(DNA损伤检查点介导因子1)是一种核支架蛋白,通过其串联BRCT结构域识别并结合DNA双链断裂位点处的磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)。该相互作用招募RNF8、MRN复合物和53BP1等修复因子,放大并维持DNA损伤检查点应答。因此,MDC1对于基因毒性应激后维持基因组完整性至关重要。
如何储存重组人MDC1蛋白(rp366601)以保持其活性?
长期储存请置于-80°C。首次解冻后立即分装,避免反复冻融;通常建议最多冻融3次。短期使用时,根据制剂不同,-20°C储存可能适用。具体储存说明请以产品数据表和批次CoA为准。
重组人MDC1蛋白采用何种表达系统生产?
rp366601所用的具体表达宿主应以官方产品数据表为准,因表达系统可能有所不同(常见选择包括大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物细胞系统)。表达系统的选择会影响翻译后修饰、蛋白折叠及对特定实验格式的适用性。
重组人MDC1蛋白适用于哪些研究应用?
重组人MDC1蛋白适用于体外蛋白相互作用研究(pull-down、co-IP)、结构与生物物理表征(SPR、ITC、晶体学)、作为阳性对照抗原进行抗体验证、泛素化通路实验,以及针对MDC1-γ-H2AX或MDC1-NBS1相互作用界面的药物发现筛选。
如何获取rp366601批次的质量检验证书(CoA)?
rp366601批次特定的质量检验证书(CoA)可通过阿拉丁科学官网获取。在CoA查询工具中输入产品货号(rp366601)和批次号即可下载。CoA包含您所在生产批次的纯度、活性及制剂数据。如需进一步帮助,请联系阿拉丁科学客服。
参考文献
- Stewart GS, Wang B, Bignell CR, Taylor AM, Elledge SJ. MDC1 is a mediator of the mammalian DNA damage checkpoint. Nature. 2003;421(6926):961-966. doi:10.1038/nature01446
- Stucki M, Clapperton JA, Mohammad D, Yaffe MB, Smerdon SJ, Jackson SP. MDC1 directly binds phosphorylated histone H2AX to regulate cellular responses to DNA double-strand breaks. Cell. 2005;123(7):1213-1226. doi:10.1016/j.cell.2005.09.038
- Aladdin Scientific. Recombinant Human MDC1 Protein (rp366601) Product Datasheet. Aladdin Scientific; [date to be confirmed].
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)