重组人MED17蛋白:研究指南与应用
重组人MED17蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human MED17 Protein是Mediator转录共激活复合物的关键亚基,在调控人类细胞RNA聚合酶II依赖性基因表达中发挥核心作用。
- 产品名称
- 重组人MED17蛋白
- 货号
- rp369451
- 蛋白功能
- Mediator复合物亚基;对RNA聚合酶II转录激活至关重要
- 物种来源
- 人源(智人)
- 应用领域
- 转录调控研究、Mediator复合物组装研究、蛋白质相互作用分析
- 储存建议
- 避免反复冻融;长期保存请分装后置于–80°C
MED17的生物学背景
MED17(RNA聚合酶II转录Mediator亚基17),又称CRSP6或TRAP80,是Mediator复合物的核心组成部分。Mediator复合物是一种大型多亚基共激活因子,作为基因特异性转录因子与通用RNA聚合酶II(Pol II)转录机器之间的分子桥梁。
Mediator复合物在真核生物中高度保守,由Head、Middle、Tail和Kinase等不同模块组成。MED17位于Head模块中,被认为是其结构核心之一。Head模块与RNA Pol II及转录前起始复合物(PIC)的组分(包括TFIID和TFIIH)直接接触,从而促进PIC在基因启动子处的组装与稳定。
MED17已被证明可与多种通用转录因子直接相互作用,对基础转录和激活转录均不可或缺。MED17的失调与人类智力障碍和神经发育障碍相关,凸显了其在生化功能之外的重要生理意义。
产品属性与规格
阿拉丁科学提供的重组人MED17蛋白(货号:rp369451)采用重组表达技术生产,确保批次间一致性和高纯度,适用于严格的体外研究应用。
收货后需核实的关键产品属性(请参阅具体批次质量检验报告获取确认数值):
- 表达系统:请参阅随附数据表确认;Mediator亚基常用表达系统包括大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物细胞表达系统。
- 纯度:阿拉丁重组蛋白纯度通常>85%(SDS-PAGE检测);请以CoA为准。
- 制剂:请查阅CoA确认缓冲液组成、稳定剂及蛋白浓度。
- 标签信息:可能含His标签或GST标签以便纯化;请以产品数据表为准。
注意:分子量、浓度及内毒素水平等具体数值应以每批次随附的产品质量检验报告(CoA)为准。
操作、复溶与储存规程
正确操作重组人MED17蛋白对于保持其生物活性和结构完整性至关重要。请遵循以下指南:
收货时
- 检查运输干冰或冰袋的完整性。如产品意外解冻,请立即联系阿拉丁科学客户支持。
- 记录批号和质量检验报告(CoA)数值,纳入实验室档案。
复溶(如为冻干品)
- 开瓶前短暂离心,使冻干物集中于瓶底。
- 按CoA或产品数据表规定的体积和缓冲液进行复溶。通常使用含载体蛋白(如0.1% BSA)的无菌PBS(pH 7.4)。
- 轻柔吹打混匀;避免涡旋振荡,以防蛋白变性。
- 按说明在4°C或室温下使蛋白完全溶解。
储存
- 短期使用(1周内):4°C保存。
- 长期储存:分装后置于–80°C,避免反复冻融。
- 反复冻融会显著降低蛋白活性,应予以避免。
工作浓度
- 各应用和实验体系的最适工作浓度应通过实验摸索确定。
研究应用
重组人MED17蛋白是一种多功能试剂,适用于多种生化和细胞生物学研究应用:
- 体外转录分析:MED17可整合到重建的转录体系中,用于研究Mediator复合物功能和RNA Pol II激活机制。
- 蛋白质相互作用研究:用于pull-down实验、共免疫沉淀(co-IP)及表面等离子共振(SPR)实验,表征MED17与其他Mediator亚基、转录因子或共调节因子的相互作用。
- 结构生物学:适用于冷冻电镜或X射线晶体学研究,解析Mediator Head模块组装体的结构。
- 生化重建:在体外重建Mediator亚复合物,剖析模块组装和功能。
- 抗体验证与Western Blot标准品:可作为阳性对照或抗原,用于验证抗MED17抗体。
- 药物发现:作为转录机器的组成部分,MED17是探索Mediator–转录因子相互作用小分子调节剂研究的潜在靶点。
质量、安全与法规注意事项
质量控制:每批次重组人MED17蛋白均经过质量控制检测。请参阅随附的批次质量检验报告(CoA),获取确认的纯度、浓度和活性数据。如未附CoA,请联系阿拉丁科学索取。
仅供研究使用:本产品仅用于研究目的(RUO),未经批准用于诊断、治疗或临床程序,不得用于人体或动物给药。
安全操作:虽然重组MED17蛋白在标准试剂类别下无特定危险品分类,但仍应遵循标准实验室生物安全规范:
- 佩戴适当的个人防护装备(PPE):手套、实验服和护目镜。
- 如机构生物安全规程要求,请在认证生物安全柜中操作。
- 按照当地机构及政府关于生物材料的法规进行废弃物处置。
法规合规:本产品不属于管制物质。出口可能受当地法规约束;如适用,请咨询所在机构的出口管制办公室。
常见问题
重组人MED17蛋白的推荐储存条件是什么?
短期使用(1周内)请在4°C保存。长期储存时,应将蛋白分装为单次用量后置于–80°C保存。应严格避免反复冻融,因其会显著损害蛋白的完整性和活性。
重组人MED17蛋白适用于哪些研究应用?
重组人MED17蛋白适用于体外转录分析、蛋白质相互作用研究(pull-down、co-IP、SPR)、结构生物学研究(冷冻电镜、晶体学)、Mediator复合物重建、抗体验证以及针对Mediator–转录因子界面的药物发现研究。
重组人MED17蛋白是否批准用于临床或诊断用途?
否。重组人MED17蛋白(rp369451)严格仅供研究使用(RUO),未经评估或批准用于诊断、治疗或任何临床应用,不得用于人体或动物给药。
如何复溶冻干的重组人MED17蛋白?
开瓶前短暂离心使冻干物集中于瓶底,用含载体蛋白(如0.1% BSA)的无菌PBS(pH 7.4)按CoA或数据表规定的体积复溶。轻柔吹打混匀,避免涡旋振荡以防蛋白变性。请以批次特定CoA中的复溶说明为准。
MED17在转录调控中的作用是什么?
MED17是Mediator复合物Head模块的结构和功能组件,该复合物作为核心共激活因子,桥接基因特异性转录因子与RNA聚合酶II转录机器。MED17参与基因启动子处转录前起始复合物的组装,对蛋白质编码基因的基础转录和激活转录均不可或缺。
参考文献
- Tsai KL, Sato S, Tomomori-Sato C, et al. A conserved Mediator-CDK8 kinase module association regulates Mediator-RNA polymerase II interaction. Nature Structural & Molecular Biology. 2013.
- Cevher MA, Shi Y, Li D, et al. Reconstitution of active human core Mediator complex reveals a critical role of the MED14 subunit. Nature Structural & Molecular Biology. 2014.
- Yin JW, Wang G. The Mediator complex: a master coordinator of transcription and cell lineage development. Development. 2014.
- Kaufmann R, et al. Mutations in MED17 and intellectual disability. New England Journal of Medicine. 2010.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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