重组人MED20蛋白:特性与研究指南
重组人MED20蛋白:特性与研究指南
Recombinant Human MED20 Protein是Mediator转录共激活复合物的关键亚基,以重组方式生产,用于支持真核生物转录中RNA聚合酶II依赖性基因调控及蛋白质相互作用网络的研究。
- 蛋白质名称
- 重组人MED20蛋白
- 基因名称
- MED20(又称TRAP17、DRIP34)
- 蛋白质家族
- Mediator复合物头部模块亚基
- 生物学功能
- Mediator复合物的结构与功能组分;介导基因特异性转录因子与RNA聚合酶II之间的信号传递
- 表达系统
- 重组表达(宿主系统详情请以产品说明书为准)
- 研究应用
- 转录研究、蛋白质相互作用分析、结构生物学、生化重组实验
- 产品编号
- rp368434
MED20的生物学背景
MED20是Mediator复合物的亚基之一。Mediator复合物是一种在进化上高度保守的多蛋白组装体,是真核生物中RNA聚合酶II(Pol II)依赖性转录的核心调控因子。Mediator复合物将结合于增强子或启动子上的序列特异性转录激活因子和抑制因子与组装在核心启动子上的通用转录机器相连接。
MED20定位于Mediator复合物的头部模块,该模块与RNA聚合酶II最大亚基的C端结构域(CTD)直接接触。这一位置使MED20成为转录起始及人类细胞中多种基因表达程序调控的关键组分。包括MED20在内的Mediator亚基失调与发育异常及肿瘤转化相关,使这些蛋白成为生物医学研究的活跃课题。
生化特性与产品规格
重组人MED20蛋白(产品编号:rp368434)采用重组表达技术生产,提供经充分表征、适用于实验室研究的蛋白质。以下几点总结了该产品的关键生化注意事项:
- 来源:人(智人),MED20基因。
- 蛋白质形式:重组蛋白,通常以冻干粉或液体制剂形式供应;具体形式请以产品说明书为准。
- 纯度:此类重组蛋白通常经SDS-PAGE检测纯度>85%;确切纯度规格请查阅质检报告(CoA)。
- 配方:缓冲液组成和稳定剂请在使用前参阅产品专属说明书或CoA确认。
- 储存:通常储存于-20°C或-80°C;避免反复冻融以维持活性和完整性。
注意:分子量、标签信息、表达宿主及内毒素水平等具体参数应以产品编号rp368434当前版本说明书为准。
推荐操作与复溶方案
妥善操作重组人MED20蛋白对于保持其结构完整性和功能活性至关重要。以下为推荐的通用操作规程,请务必结合产品专属说明书执行。
- 解冻:在冰上或4°C条件下解冻蛋白质,勿在室温下解冻,以免引起聚集或降解。
- 复溶(冻干产品):按说明书规定的体积加入无菌水或适当缓冲液复溶,轻柔移液混匀,避免涡旋振荡。
- 离心:开瓶前短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),使内容物集中至瓶底。
- 分装:复溶后立即分装为单次用量,避免反复冻融。
- 复溶后储存:立即使用或于-80°C长期保存;4°C保存稳定性通常仅维持数天。
- 载体蛋白:若蛋白质用于极低浓度实验,建议添加载体蛋白(如0.1% BSA)以防止蛋白吸附于管壁。
使用前请务必查阅质检报告和安全数据表(SDS)。操作重组蛋白时请佩戴适当的个人防护装备(PPE)。
研究应用
重组人MED20蛋白可支持分子生物学和生物化学研究中的多种实验应用:
- 蛋白质相互作用研究:用于pull-down实验、共免疫沉淀(co-IP)或表面等离子共振(SPR),表征MED20与其他Mediator亚基及转录因子的相互作用。
- 结构生物学:可作为冷冻电子显微镜(cryo-EM)或X射线晶体学研究的组分,用于解析Mediator头部模块的结构。
- 生化重组实验:用于体外重组部分或完整Mediator复合物,进行功能性转录分析。
- 抗体开发与验证:可作为抗原标准品,用于制备或验证靶向MED20的抗体。
- 药物发现:适用于筛选小分子化合物的检测实验,以鉴定调节Mediator与转录因子相互作用的候选药物,与肿瘤学或发育生物学相关。
上述应用使重组人MED20蛋白成为专注于转录调控、表观遗传学及治疗靶点鉴定的实验室的多功能试剂。
质量、储存与合规注意事项
为确保实验重现性和试剂完整性,在使用重组人MED20蛋白时请遵守以下质量和合规指南:
- 批次间一致性:每批次使用前请索取质检报告(CoA),确认纯度、浓度及功能测试结果,以保障关键实验质量。
- 内毒素水平:用于细胞实验时,请确认CoA中内毒素水平在可接受范围内;高内毒素含量可能干扰转录分析结果。
- 仅限科研用途:重组人MED20蛋白(rp368434)仅供科学研究使用,未获批用于人体诊断或治疗目的。
- 运输条件:重组蛋白通常以干冰运输;收货时请检查包装,如发现异常请立即记录并联系供应商。
- 法规合规:含蛋白质的废弃物处置应符合机构生物安全规定及当地法规要求。
常见问题
MED20是什么?为什么它在转录研究中如此重要?
MED20是Mediator复合物的亚基,该复合物是真核生物中RNA聚合酶II依赖性转录所必需的保守多蛋白组装体。MED20位于Mediator头部模块,参与将转录激活因子的信号传递至核心转录机器,是理解基因调控、发育及包括癌症在内的疾病机制的核心研究对象。
如何储存重组人MED20蛋白以保持其稳定性?
重组人MED20蛋白应储存于-20°C或优选-80°C以保持长期稳定性。复溶或首次解冻后应立即分装为单次用量,避免反复冻融。请务必参阅产品专属说明书及质检报告,以确认rp368434批次的具体储存条件。
重组人MED20蛋白经过验证可用于哪些实验应用?
重组人MED20蛋白适用于蛋白质相互作用研究(pull-down、co-IP、SPR)、结构生物学(cryo-EM、晶体学)、Mediator复合物的生化重组、抗体开发与验证以及药物发现筛选实验。具体经验证的应用请参阅产品编号rp368434的说明书确认。
重组人MED20蛋白适用于细胞实验吗?
重组人MED20蛋白可用于细胞实验,但使用前务必核实质检报告中标注的内毒素水平,因为高内毒素污染会显著干扰转录和细胞信号传导实验结果。本产品仅供科学研究使用,未获批用于临床应用。
如何复溶冻干的重组人MED20蛋白?
将小瓶短暂离心以集中内容物,然后按说明书规定加入指定体积的无菌水或适当缓冲液,轻柔移液混匀,勿涡旋振荡。复溶后立即分装为单次用量,避免反复冻融。确切的复溶缓冲液和体积请参阅产品编号rp368434的说明书。
参考文献
- Kelleher RJ 3rd, Flanagan PM, Kornberg RD. A novel mediator between activator proteins and the RNA polymerase II transcription apparatus. Cell. 1990;61(7):1209-1215.
- Mittler G, Stühler T, Santolin L, et al. A novel docking site on Mediator is critical for activation by VP16 in mammalian cells. EMBO J. 2003;22(24):6494-6504.
- Tsai KL, Sato S, Tomomori-Sato C, et al. A conserved Mediator-CDK8 kinase module association regulates Mediator-RNA polymerase II interaction. Nat Struct Mol Biol. 2013;20(5):611-619.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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