实验方案(Protocols)

网织红细胞计数实验

简介

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡型细胞,由于其胞浆中尚存在嗜碱的DNA物质,因而用煌焦油蓝染法进行活体染色后、胞浆中可见有蓝绿色网状结构,故各网织RBC.

操作方法

网织红细胞计数实验

原理

由于网织红细胞胞浆中还残存少量核蛋白体和核糖核酸(DNA)可被某些染料(如煌焦油蓝、新美蓝)染成蓝色颗粒和网状物质。故可区别于完全成熟的红细胞,(feticulocyte直径8-9.5cm)

材料与仪器

血液
新美蓝溶液
显微镜

步骤

一、实验试剂:过去用煌焦油蓝,近来国外多用新美蓝溶液,因为后者网状物质着色较深,结果比较恒定,煌焦油蓝染色在不同标本间的差异较大.①、煌焦油蓝溶液:

煌焦油蓝 0.4g         38g/L柠檬酸钠       20.0ml氯化钠       8.5g/L                      加水至100ml②、新美蓝溶液:

新美蓝       1.0g         38g/L柠檬酸钠       20.0ml85g/L   NaCl                             加水至100ml

二、实验操作:

1、于小试管中加2-3滴新美蓝溶液或煌焦油蓝溶液再加血2-3滴,混合加塞。

2、置37℃,15-20min。

3、摇匀,取小滴推成片薄膜,干燥。

4、选用低倍镜选择红细胞散在而分布均匀部位,然后油镜计数。

5、为方便计数,需把视野缩小,可在目镜内放置一圆形硬纸,中央开一约2mm×3mm小孔。

6.网织红细胞是有网状,细小点状或浅状蓝色物质的红细胞,计数1000个红细胞中含有的网织红细胞数,以10除之,即得网织红细胞的百数.

注意事项

l、网织红细胞必须在活体,染色条件下才能显示,染色与血液的比例以1:l为宜。

2、血膜制备技术很重要,红细胞应均匀散开,如有重叠则影响结果的准确性。一般选择血膜的体尾交界处进行计数。参考植:成  人:0.008-0.02或(25-75)×109/L初生儿:0.020-0.06


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《网织红细胞计数实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月24日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/reticulocyte-counting-assay.html
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