RNF43鼠单克隆抗体:科研应用指南
RNF43鼠单克隆抗体:科研应用指南
RNF43 Mouse mAb是一种以小鼠为宿主制备的单克隆抗体,专用于特异性检测RNF43蛋白——一种在正常组织及肿瘤组织中负调控Wnt信号通路的E3泛素连接酶。
- 产品货号
- Ab351057
- 抗体类型
- 鼠单克隆抗体(mAb)
- 制剂配方
- 仅PBS(不含载体蛋白,不含防腐剂)
- 靶蛋白
- RNF43(环指蛋白43)
- 宿主物种
- 小鼠
- 参考目录
- absea#KC-3394
- 储存缓冲液
- 磷酸盐缓冲液(PBS)
靶标概述:RNF43及其生物学意义
RNF43(环指蛋白43)是一种跨膜E3泛素连接酶,在Wnt信号通路的负调控中发挥核心作用。RNF43通过促进Frizzled受体的泛素化及随后的降解,对经典Wnt信号活性起到关键的抑制作用。RNF43功能缺失突变在胰腺导管腺癌、结直肠癌、子宫内膜癌及其他恶性肿瘤中频繁出现,使其成为具有重要临床意义的肿瘤抑制靶点。
检测RNF43蛋白表达水平对研究Wnt通路失调、癌症生物学及潜在治疗干预具有重要意义。RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057)为上述研究提供了可靠的检测工具。
产品描述与制剂信息
RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057,absea参考编号KC-3394)是一种以小鼠为宿主制备的单克隆抗体,配制于磷酸盐缓冲液(PBS)中,不含BSA等载体蛋白,也不含叠氮化钠等防腐剂。这种无载体蛋白、无防腐剂的制剂特别适用于额外蛋白质可能造成干扰的应用场景,如偶联反应、单细胞研究或高灵敏度免疫分析。
制剂关键信息:
- 缓冲液:PBS
- 不含载体蛋白
- 不含防腐剂
- 宿主物种:小鼠
- 抗体形式:单克隆IgG(具体亚型请以制造商数据表为准)
注意:用户应查阅Aladdin Scientific官方产品数据表,以获取经确认的同型对照、克隆编号、浓度及批次特异性质量控制数据。
推荐应用与使用指南
靶向RNF43的鼠单克隆抗体广泛应用于多种标准免疫学技术。研究人员应在各自特定实验体系中对抗体进行每种预期应用的验证。抗RNF43单克隆抗体的典型应用包括:
- 蛋白质印迹(WB):检测全细胞或组织裂解液中的RNF43蛋白。建议起始稀释倍数须经实验验证;请参阅产品数据表获取推荐稀释范围。
- 免疫组织化学(IHC):在肿瘤病理研究相关的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)或冷冻组织切片中定位RNF43。
- 免疫荧光(IF):在培养细胞中进行RNF43亚细胞定位,适用于研究其膜相关功能。
- 免疫沉淀(IP):富集RNF43蛋白复合物用于相互作用研究。
重要提示:请在官方产品数据表(Ab351057)中确认已验证的应用。最佳抗体浓度和实验条件因应用而异,须由最终用户自行确定。
储存、操作与稳定性
妥善的储存与操作对维持抗体活性、确保实验结果可重复性至关重要。以下通用指南适用于PBS配制的RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057):
- 短期储存(1个月以内):于4 °C保存,避免反复冻融。
- 长期储存:分装为单次用量,于−20 °C或−80 °C保存。建议使用非自动除霜冰箱以避免温度波动。
- 无载体蛋白制剂注意事项:由于本抗体不含BSA或其他稳定性载体蛋白,在储存过程中或低浓度时可能更易降解。若长期稳定性存在顾虑且应用条件允许,可考虑添加适宜的载体蛋白。
- 避免:长时间光照、反复冻融及室温储存。
- 无菌操作:用于细胞实验时,请在无菌条件下操作。
请务必参阅Aladdin Scientific官方产品数据表,获取批次特异性储存建议及有效期信息。
质量控制与故障排查
抗体性能的稳定性依赖于制造商和用户双方严格的质量控制。使用RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057)时,请遵循以下质量保证与故障排查规范:
阳性对照:在每次实验中,使用已知表达RNF43的细胞系或组织(如野生型RNF43的结直肠癌或胰腺癌细胞系)作为阳性对照。
阴性对照:以相同浓度的同型匹配鼠IgG对照抗体评估非特异性背景信号。
常见故障排查:
- 无信号/信号弱:检查抗体浓度、孵育时间和温度,确认目标蛋白在所用模型体系中有表达。确认二抗与鼠源一抗相容。
- 背景过高:优化封闭条件(提高封闭剂浓度或延长封闭时间),提高洗涤强度,对一抗进行梯度稀释优化。
- WB出现多条非特异性条带:优化裂解条件,确认样品完整性,考虑提高抗体稀释倍数。
如需批次特异性故障排查支持,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057)的制剂配方是什么?
RNF43鼠单克隆抗体(Ab351057)仅配制于PBS中,不含BSA等载体蛋白,也不含防腐剂。这种无载体蛋白的制剂适用于偶联应用及对外源蛋白敏感的检测实验。
RNF43鼠单克隆抗体经过哪些应用验证?
经验证的应用应以Aladdin Scientific Ab351057官方产品数据表为准。抗RNF43单克隆抗体的常见应用包括蛋白质印迹(WB)、免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)和免疫沉淀(IP)。用户应针对每种应用进行实验优化。
如何储存RNF43鼠单克隆抗体以保持其活性?
短期使用(1个月以内)可于4 °C保存。长期储存应分装为单次用量,于−20 °C或−80 °C保存,避免反复冻融。由于本抗体不含载体蛋白,若需长期储存且下游应用允许,可考虑添加适宜的稳定剂。
使用RNF43鼠单克隆抗体时,应选用什么阳性对照?
建议使用已知表达RNF43的细胞系或组织样本,如野生型RNF43的结直肠癌或胰腺癌细胞系。同时应设置相同浓度的同型匹配鼠IgG阴性对照,以区分特异性与非特异性信号。
RNF43鼠单克隆抗体是否适合与抗鼠IgG二抗配合使用?
是的。由于RNF43鼠单克隆抗体为鼠源单克隆抗体,可与任何高质量的抗鼠IgG二抗配合使用。请确保所选二抗已针对您的具体应用进行验证(如WB使用HRP偶联二抗,IF/IHC使用荧光素偶联二抗)。
参考文献
- Hao HX, et al. ZNRF3 promotes Wnt receptor turnover in an R-spondin-sensitive manner. Nature. 2012;485(7397):195-200. doi:10.1038/nature11019
- Koo BK, et al. Tumour suppressor RNF43 is a stem-cell E3 ligase that induces endocytosis of Wnt receptors. Nature. 2012;488(7413):665-669. doi:10.1038/nature11308
- Aladdin Scientific. RNF43 Mouse mAb (Ab351057) Product Datasheet. Aladdin Scientific; [date not specified].
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)