本实验方法来源于重庆医科大学官方网站

操作方法

小鼠肥大细胞的形态学观察实验

原理

肥大细胞的胞质中充满许多粗大的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒，颗粒中含有多巴胺，组胺，肝素。5-羟色胺等活性物质。这些物质中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖类，能与异染性染料结合，因此，用中性红、美蓝、甲苯胺蓝等染料处理上皮组织均可将肥大细胞胞质中的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒显示出来。

材料与仪器

成年小鼠
A-F固定液 甲苯胺蓝染色液 的冰醋酸分色液
显微镜 解剖剪 解剖镊子废旧针头 解剖盘 载片 盖片

步骤

1．小鼠皮下组织铺片制作

（1）断颈法处死小鼠

（2）解剖小鼠取结缔组织

（3）将组织铺于干净的载玻片上，用废旧针头剥离组织，越薄越好，大小在0.5cm×0.5cm即可。

（4）自然晾干待用

2．甲苯胺蓝染色显示肥大细胞

（1）固定：取晾干的铺片于A-F固定液中固定5min

（2）水洗：取固定后的铺片于细水冲洗1min

（3）染色:将冲洗后的铺片入0.5%甲苯胺蓝染色液中染色30min

（4）水洗：取染色后的铺片于细水冲洗2min

（5）分色：入1%的冰醋酸中数秒

（6）水洗：取分色后的铺片于细水冲洗2min

（7）镜检：显微镜下观察（脱水、透明、中性胶封片后效果更佳）

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