S100 Alpha6鼠单克隆抗体:选择与应用指南
S100 Alpha6鼠单克隆抗体:选择与应用指南
S100 alpha6 Mouse mAb是一种靶向S100A6(S100钙结合蛋白家族成员)的鼠源单克隆抗体,以PBS配方提供,阿拉丁科学目录编号为Ab351066。
- 货号
- Ab351066
- 抗体类型
- 鼠单克隆抗体(mAb)
- 靶抗原
- S100 alpha6(S100A6)
- 配方
- 仅PBS(磷酸盐缓冲液)
- 供应商参考编号
- absea#KC-46664
- 物种反应性
- 待确认,请参阅产品说明书
S100 Alpha6概述及其生物学意义
S100 alpha6,又称S100A6或钙周期素(calcyclin),是一种属于S100蛋白家族的低分子量钙结合蛋白。S100蛋白的特征在于含有两个EF-hand钙结合结构域,参与调控多种胞内过程,包括细胞周期进程、分化、凋亡和细胞骨架动态变化。
S100A6在多种细胞类型中表达,在多种人类癌症中显著上调,因而成为肿瘤学研究的热点。此外,它也在神经系统疾病和炎症反应的研究中受到关注。其兼具胞内信号传导和胞外分泌的双重功能,使其成为重要的多功能研究靶点。
使用高质量、特性明确的单克隆抗体(如Ab351066)对于研究S100A6的表达和功能获得可重复且特异性结果至关重要。
产品规格与配方详情
阿拉丁科学的Ab351066 S100 alpha6鼠单克隆抗体采用标准杂交瘤技术生产,以PBS(磷酸盐缓冲液)配制,除说明书另有说明外,不含额外稳定剂、防腐剂或载体蛋白。纯PBS配方为终端用户提供了后续偶联、标记或自定义配方的灵活性。
需在说明书中确认的关键规格包括:
- 用于免疫的免疫原
- 同型(如IgG亚类)
- 每瓶浓度和总体积
- 经验证的应用类型(如WB、IHC、IF、ELISA、流式细胞术)
- 物种反应性(如人、小鼠、大鼠)
- 储存条件及推荐工作稀释比例
请参阅Ab351066官方产品说明书以获取最新完整规格,相关信息以批次确认为准。
推荐应用及使用方案
靶向S100A6的鼠单克隆抗体广泛应用于多种免疫学和生化检测技术。Ab351066的具体经验证应用类型请以说明书为准,以下为S100A6鼠单抗在研究中常用的通用方案:
蛋白质印迹(WB)
在还原条件下通过SDS-PAGE使样品变性,转移至PVDF或硝酸纤维素膜。用5%脱脂奶粉或TBST中的BSA在室温封闭1小时。按推荐稀释比例(通常1:500–1:2000)孵育一抗,4°C过夜。洗涤后加入适当的HRP偶联抗鼠二抗,化学发光法检测。
免疫组织化学(IHC)
对FFPE切片进行抗原修复(S100家族蛋白常用柠檬酸缓冲液pH 6.0或EDTA缓冲液pH 9.0)。封闭内源性过氧化物酶活性和非特异性结合。以适当稀释比例加入一抗并孵育。使用以DAB为显色剂的聚合物检测系统,苏木精复染。
免疫荧光(IF)
用4%多聚甲醛固定细胞,0.1–0.3% Triton X-100透化。5%正常血清封闭。加入一抗,4°C孵育过夜。用荧光素偶联抗鼠二抗检测,DAPI复染细胞核。
注意:请对每种特定应用及细胞/组织类型进行抗体滴定,以确定最佳工作浓度。
储存、处理与稳定性
Ab351066的妥善储存和处理对维持抗体活性、确保实验结果可重复性至关重要。由于本品仅以PBS配制,适用以下通用指南:
- 短期储存(不超过1个月):4°C保存,避免反复冻融。
- 长期储存:将抗体分装为单次用量,按说明书指示存放于-20°C或-80°C。若配方中未包含冻存保护剂,建议在-20°C长期储存时加入甘油(终浓度50% v/v)。
- 避免:反复冻融、长时间光照(如为荧光偶联产品)以及蛋白酶或去污剂污染。
- 操作:开瓶前短暂离心,确保产品沉于瓶底,实验操作过程中置于冰上。
Ab351066的确定性储存说明、有效期及浓度信息,请以随附的批次特异性说明书为准。
常见问题排查
使用Ab351066的研究人员偶尔可能遇到结果不理想的情况。以下排查指南针对最常见问题:
| 问题 | 可能原因 | 建议解决方案 |
|---|---|---|
| 无信号或信号弱 | 抗体浓度过低;抗原修复不充分;样品中靶标未表达 | 提高抗体浓度;优化抗原修复条件;使用已知表达S100A6的阳性对照组织或细胞系 |
| 背景信号高 | 封闭不充分;抗体浓度过高;二抗非特异性结合 | 延长封闭时间或更换封闭剂;降低一抗浓度;确保二抗物种匹配 |
| 非特异性条带(WB) | 样品上样量过多;与其他S100家族成员存在交叉反应 | 减少蛋白上样量;设阴性对照裂解液;依据S100A6预期分子量(约10–11 kDa)核实条带大小 |
| 储存后信号丢失 | 反复冻融;储存温度不当 | 收到抗体后立即分装;按推荐温度储存;避免反复冻融 |
若按上述步骤排查后问题仍存在,请联系阿拉丁科学技术支持。
常见问题
S100 alpha6(S100A6)是什么?为何是重要的研究靶点?
S100A6是S100家族EF-hand钙结合蛋白的成员,参与调控细胞周期、分化和凋亡。由于其在多种癌症类型中表达上调,并在神经系统和炎症通路中发挥作用,S100A6具有重要的研究价值,是潜在的生物标志物和治疗靶点。
Ab351066以何种配方提供?是否含有防腐剂?
Ab351066仅以PBS(磷酸盐缓冲液)配制。根据现有产品信息,无额外防腐剂、稳定剂或载体蛋白。如需特定配方,用户可联系阿拉丁科学了解详情或考虑自行透析处理。
Ab351066适用于哪些实验应用?
S100A6鼠单克隆抗体通常用于蛋白质印迹(WB)、免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)和ELISA。Ab351066的具体经验证应用类型详见产品说明书,研究人员应查阅说明书以确认其适用性。
应如何储存Ab351066以维持最佳活性?
短期使用(不超过一个月)请在4°C保存。长期储存时,请分装为单次用量,存放于-20°C或-80°C,以避免反复冻融导致抗体性能下降。最终储存建议请以批次特异性说明书为准。
如何为Ab351066选择合适的工作稀释比例?
工作稀释比例因应用类型(WB、IHC、IF等)和具体样品类型而异。推荐的起始稀释比例在产品说明书中提供。建议使用阳性对照样品进行初始滴定实验,以确定适合您实验条件的最佳稀释比例。
参考文献
- Donato R. S100: a multigenic family of calcium-modulated proteins of the EF-hand type with intracellular and extracellular functional roles. International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 2001;33(7):637-668. doi:10.1016/S1357-2725(01)00046-2
- Brozzi F, Arcuri C, Giambanco I, Donato R. S100B protein regulates astrocyte shape and migration via interaction with Src kinase: implications for astrocyte development, activation, and tumor growth. Journal of Biological Chemistry. 2009;284(13):8797-8811.
- Salama I, Malone PS, Mihaimeed F, Jones JL. A review of the S100 proteins in cancer. European Journal of Surgical Oncology. 2008;34(4):357-364. doi:10.1016/j.ejso.2007.04.009
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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