SARS-CoV-2核蛋白鼠单克隆抗体:选择与使用指南
SARS-CoV-2核蛋白鼠单克隆抗体:选择与使用指南
SARS-CoV-2 Nucleoprotein Mouse mAb是一种以SARS-CoV-2核蛋白(N蛋白)为靶标的鼠源单克隆抗体,专为在多种研究和诊断开发应用中实现对病毒核衣壳抗原的灵敏、特异性检测而设计。
- 产品编号
- Ab350703
- 克隆来源/形式
- 鼠源单克隆抗体(mAb)
- 靶抗原
- SARS-CoV-2核蛋白(N蛋白/核衣壳蛋白)
- 制剂
- 仅含PBS(无稳定剂或防腐剂;批次参考号absea#KC-445)
- 供应商参考号
- absea#KC-445
- 推荐储存条件
- 长期保存请置于−20°C;避免反复冻融(PBS制剂单克隆抗体的标准做法,请以产品说明书为准)
产品概述与靶标生物学
SARS-CoV-2核蛋白鼠单克隆抗体(Ab350703)靶向SARS-CoV-2(COVID-19病原体)的核衣壳(N)蛋白。N蛋白是感染期间表达量最高的病毒蛋白,在包装病毒RNA基因组、调控病毒转录及调节宿主免疫应答中发挥核心作用。
由于N蛋白表达量高且在β冠状病毒中序列相对保守,它是诊断检测、血清流行病学研究和基础病毒学研究的首选抗原。鼠源单克隆抗体具有定量和半定量检测工作流所需的一致性、特异性和重复性。
目录编号:Ab350703 | 批次参考号:absea#KC-445 | 制剂:仅含PBS。
推荐应用与方案指南
针对SARS-CoV-2 N蛋白的鼠单克隆抗体广泛应用于以下研究场景。在大规模实验前,请务必在您的具体检测体系中对抗体进行验证。
- 酶联免疫吸附试验(ELISA):用作夹心ELISA中的捕获或检测抗体,对细胞裂解液、培养上清或患者来源样本中的N蛋白进行定量(仅限研究用途)。检测抗体的典型起始稀释度为1:1,000至1:5,000,请根据实验结果优化。
- 蛋白质印迹(Western Blot,WB):在还原条件下对样本进行变性处理后,在硝酸纤维素膜或PVDF膜上进行检测。SARS-CoV-2 N蛋白的表观分子量约为46–50 kDa;请使用阳性对照裂解液加以确认。
- 免疫荧光(IF)/免疫细胞化学(ICC):用于感染SARS-CoV-2或转染N蛋白表达载体的固定透化细胞。配合物种匹配的荧光素偶联二抗使用。
- 免疫组织化学(IHC):经抗原修复后,应用于福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片。请针对每种组织类型优化抗原修复方法和抗体浓度。
- 侧流层析(LFA)开发:鼠单克隆抗体常被偶联至胶体金或彩色乳胶微球,用于快速抗原检测试纸条的开发。
注意:当前来源资料中未确认具体验证稀释比例、缓冲液及对照信息。请参阅产品说明书(absea#KC-445)或联系Aladdin Scientific技术支持,获取针对特定应用的建议。
储存、操作与稳定性
对于仅含PBS制剂(即不含BSA等载体蛋白或叠氮钠等防腐剂)的单克隆抗体,妥善的储存和操作对维持其活性和特异性至关重要。
- 短期储存(不超过4周):置于2–8°C保存。
- 长期储存:分装为单次用量后,置于−20°C或以下保存。避免反复冻融,以防聚集和结合活性下降。
- 避免:暴露于37°C以上温度、直接光照(尤其是荧光素偶联衍生物)及反复温度循环。
- 工作溶液:用适当的检测缓冲液(如含1% BSA的PBS,用于ELISA)新鲜配制稀释液。勿长期储存稀释后的抗体。
- 无菌过滤:PBS制剂通常经0.2 µm无菌过滤;请在质量证书上确认。
上述所有储存建议均为PBS制剂鼠单克隆抗体的通行最佳实践。请以Ab350703/absea#KC-445产品说明书上的具体条件为准。
质量、特异性与交叉反应性注意事项
在选择和验证任何用于研究的单克隆抗体时,请考虑以下质量属性:
- 特异性:确认抗体能特异性检测SARS-CoV-2 N蛋白,并评估与相关冠状病毒(如SARS-CoV-1、MERS-CoV及季节性冠状病毒HCoV-NL63、HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-HKU1)的潜在交叉反应性。交叉反应数据应在产品说明书中提供;如未列出,请联系Aladdin Scientific。
- 批次间一致性:索取批次absea#KC-445的质量证书(CoA),以确认蛋白浓度、纯度和质控测试结果。
- 内毒素水平:用于细胞实验或体内应用时,请核实内毒素含量(研究级单克隆抗体通常低于1 EU/mg)。
- 同型:了解鼠IgG同型(如IgG1、IgG2a)有助于为您的检测体系选择正确的同型对照和二抗。
- 功能验证:每次实验均应设置阳性对照(重组SARS-CoV-2 N蛋白或N蛋白表达细胞裂解液)和阴性对照(无关同型匹配单克隆抗体)。
当前来源资料中未确认具体同型、克隆名称、纯度等级及交叉反应数据,请标记以待说明书审核。
常见问题
Ab350703的制剂是什么,这对下游应用有何影响?
Ab350703以纯PBS制剂供应(不含载体蛋白或防腐剂;批次参考号absea#KC-445)。纯PBS制剂有利于偶联反应(如生物素、荧光素或胶体金标记),因为不含BSA可避免竞争性标记。但纯PBS制剂抗体对冻融损伤更敏感,请务必在冷冻前分装,并避免反复冻融。
该抗体是否会与SARS-CoV-1或MERS-CoV等其他冠状病毒发生交叉反应?
当前来源资料未确认Ab350703与相关冠状病毒(SARS-CoV-1、MERS-CoV及季节性HCoV)的交叉反应数据。SARS-CoV-2 N蛋白与SARS-CoV-1 N蛋白的氨基酸序列同一性约为90%,因此与SARS-CoV-1发生交叉反应是可能的,但需经实验验证。请查阅产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持以获取已确认的交叉反应数据。
在ELISA或蛋白质印迹实验中使用该抗体时,应设置哪些对照?
请务必设置:(1)阳性对照,使用已知浓度的重组SARS-CoV-2 N蛋白或表达N蛋白的细胞裂解液;(2)阴性对照,使用相同浓度的同型匹配鼠IgG抗体;(3)不加一抗对照,用于评估二抗的非特异性结合。这些对照有助于准确解读条带或信号强度,并识别实验假象。
如何确定Ab350703的最佳工作浓度?
最佳工作浓度必须针对每种应用和样本类型经实验确定。典型方法是进行棋盘式滴定(用于夹心ELISA)或系列稀释(用于WB或IF),从产品说明书建议的范围开始。建议从较宽范围(如0.1–10 µg/mL)入手,根据信噪比和背景水平逐步缩小范围。如说明书未具体说明,请联系Aladdin Scientific获取针对特定应用的起始建议。
参考文献
- Zhu N, Zhang D, Wang W, et al. A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019. N Engl J Med. 2020;382(8):727-733. doi:10.1056/NEJMoa2001017
- Dutta NK, Mazumdar K, Gordy JT. The Nucleocapsid Protein of SARS-CoV-2: A Target for Vaccine Development. J Virol. 2020;94(13):e00647-20. doi:10.1128/JVI.00647-20
- Burbelo PD, Riedo FX, Morishima C, et al. Sensitivity in Detection of Antibodies to Nucleocapsid and Spike Proteins of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 in Patients With Coronavirus Disease 2019. J Infect Dis. 2020;222(2):206-213. doi:10.1093/infdis/jiaa273
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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