通过此实验，使学员掌握淀粉酶的测定原理，试剂的配制学会测定方法。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导

操作方法

血清淀粉酶（AMS）测定实验

原理

血清或血浆中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1.4葡萄糖苷健水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1.6糖苷键支链的糊精，在底物充分（已知浓度）的条件下，反应后加入碘液未经碘水解的淀粉结合成蓝色化合物，其颜色的深浅与未经酶促反应的空白等比较，从而推算出酶的活力单位。

步骤

一、 实验试剂：

1. 0.4g/L缓冲淀粉液：于约500ml蒸馏水中溶解9克氯化钠，22.6g无水磷酸钠（或Na2HPO4·12H2O 56.94克）和 12.5g无水磷酸二氢钾，加热至沸，另取一小烧杯，精确称取0.4g可溶性淀粉，加人约10ml蒸馏水，使溶液成糊状后，加入上述沸腾之溶液中，水洗烧杯一并倒入，冷至室温后，加人37％甲醛溶液5ml，用蒸馏水稀释至1升，该溶液PH为7.0±0.1，放置冰箱保存。

2. 0.1mol/L碘贮存液：与约400ml蒸馏水中溶解1.7835g碘酸钾及22.5g碘化钾，缓慢加入4.5ml浓盐酸，边加边搅拌，用蒸馏水稀释至500ml充分混匀，贮棕色瓶塞紧置冰箱保存。

3. 0.01mol/L碘应用液：取碘贮存液，用蒸馏水稀释10倍，贮存棕色瓶置冰箱可用一个月。

二、 实验操作：血清先用生理盐水作10倍稀释，按操作进行

单位定义：100ml血清中的淀粉酶，在37℃15分钟水解5mg淀粉为一个单位。

三、计算：淀粉酶单位=(AB-AU）×／AB×800

参考值：80--180U  尿液100--1200 U

注意事项

1. 草酸盐. 枸橼酸盐，EDTA. Na2及氰化钠对AMS活性抑制，肝素无抑制。

2. 酶活性在40OU以下时，与底物的水解成线性，如测定管吸光度小于空白管吸光度一半时应将血清加大稀释倍数，或减少稀释血清加入量，测定结果，乘以稀释倍数。

3. 本法使用于其他体液淀粉酶测定，尿液先做20倍稀释后测定。

4. 唾液含高浓度淀粉绍须防止带入。

5. 淀粉溶液若出现混浊或絮状物，表示淀粉溶液受污染或变质，不能再用。

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