sn-(1-油酰基-2-羟基)-甘油-3-磷酸铵盐指南
sn-(1-油酰基-2-羟基)-甘油-3-磷酸铵盐指南
sn-(1-油酰基-2-hydroxy)-甘油-3-磷酸-sn-3'-(1'-油酰基-2'-羟基)-甘油(铵盐)是一种合成的双溶血甘油磷脂试剂(货号I130515),作为结构明确的参考化合物和生化工具,用于研究溶酶体脂质代谢、膜生物学及磷脂信号通路。
- 产品名称
- sn-(1-油酰基-2-羟基)-甘油-3-磷酸-sn-3'-(1'-油酰基-2'-羟基)-甘油(铵盐)
- 货号
- I130515
- 脂质类别
- 双溶血甘油磷脂(溶血双磷脂酸类似物)
- 抗衡离子
- 铵离子(NH4+)
- 脂肪酸链
- sn-1和sn-1'位各含一条油酰基(18:1,Δ9-顺式)链
- 储存建议
- 在惰性气氛下于-20 °C储存;避免反复冻融
- 典型应用
- 脂质代谢研究、膜生物学、磷脂信号通路研究
化学特性与结构概述
sn-(1-油酰基-2-羟基)-甘油-3-磷酸-sn-3'-(1'-油酰基-2'-羟基)-甘油(铵盐),货号I130515,是一种对称的双溶血甘油磷脂。其骨架由两个甘油单元通过磷酸二酯键相连。每个甘油在sn-1(及sn-1')位各连接一条油酰基(C18:1,Δ9-顺式)酰基链,sn-2(及sn-2')位保留游离羟基,使其有别于二酰基磷脂。
铵盐形式相较于游离酸具有更好的水溶性,更易于制备脂质体分散液或水相储备液。该结构与溶血双磷脂酸(LBPA)密切相关,后者富集于晚期内体区室,参与管腔内囊泡生成和胆固醇转运。
操作、复溶与储存规程
复溶:开封前使密封小瓶在室温下平衡,以防冷凝水引发氧化。将脂质溶于无氧有机溶剂,如氯仿、氯仿/甲醇(2:1 v/v);若用于水相实验,可使用DMSO。使用玻璃注射器和玻璃瓶以减少吸附和增塑剂污染。根据下游实验需求配制适当浓度的工作储备液(有机溶剂中通常为1–10 mM)。
惰性气氛操作:含不饱和酰基链的溶血甘油磷脂易在双键处发生自动氧化。所有操作均应在干燥氮气或氩气流下进行。使用后,在重新密封储存瓶前向瓶内充入惰性气体。
储存:在惰性气体保护下于-20 °C密封储存。超过三个月的长期储存建议置于-80 °C。避免反复冻融;尽量分装为单次用量。在敏感实验使用前,通过TLC或LC-MS监测氧化降解情况。
在脂质生物学研究中的应用
溶酶体和内体膜研究:由于与溶血双磷脂酸(LBPA/BMP)结构相似,该化合物被用作生化探针,研究晚期内体膜组织、管腔内囊泡形成及内体-溶酶体通路中的脂质-蛋白质相互作用。
脂质代谢实验:该化合物可作为磷脂酶活性实验的底物或参考标准品,用于表征作用于溶血甘油磷脂的酶的动力学参数。在无同位素标记类似物时,也可在脂质组学工作流程中作为结构明确的内标使用。
膜模型系统:将该脂质掺入脂质体或支撑脂质双分子层时,由于每个甘油头部的单链溶血结构,可调节膜曲率和流动性,为膜动力学生物物理研究提供工具。
细胞实验:外源添加至细胞培养基(通常与载体蛋白复合或配制为脂质体),可研究脂质摄取、胞内转运及其对溶酶体储积症或脂质代谢疾病相关细胞的下游信号影响。
质量注意事项与分析验证
纯度评估:在定量或机制实验前,通过高效薄层色谱(HPTLC)或配备蒸发光散射检测器(ELSD)或电荷气溶胶检测器(CAD)的反相HPLC验证化合物纯度。结构确认建议采用负离子模式的电喷雾电离质谱(ESI-MS),检测铵加合物[M+NH4]+或去质子化物种[M−H]−,并与理论分子式进行对比。
氧化监测:不饱和溶血脂质易发生过氧化。共轭二烯的生成可通过234 nm处的紫外吸收检测。过氧化值可使用亚铁氧化-二甲酚橙(FOX)法评估。若批次出现可见颜色变化(变黄)或与氢过氧化物加合物对应的异常质谱峰,应予以废弃。
含水量:若需精确无水称量用于化学计量实验,应采用卡尔·费休滴定法,因吸湿性脂质样品开封后可能吸收大气中的水分。
常见问题
溶解I130515推荐使用哪种溶剂?
氯仿或氯仿/甲醇(2:1 v/v)是溶血甘油磷脂的标准溶剂选择,可维持脂质完整性。对于水相实验,可使用少量DMSO作为共溶剂;但须确保生物实验中DMSO终浓度不超过0.1–0.5%,以避免细胞毒性。所有溶剂均应脱气或用惰性气体充气以减少氧化。
如何用该化合物制备脂质体配方?
将脂质溶于氯仿,按所需摩尔比与其他脂质组分混合,在氮气流下蒸发溶剂,随后在高真空干燥器中干燥至少一小时,形成干燥脂质薄膜。在高于凝胶-液晶相转变温度的条件下用所需水相缓冲液水化薄膜(油酰基链脂质的相变温度通常远低于室温)。通过特定孔径的聚碳酸酯膜挤出,获得直径可控的单室囊泡。
I130515在室温下短期使用时是否稳定?
在惰性气体保护下称量或分装时,短暂暴露于室温(数分钟至一小时)是可接受的。应避免长时间储存或反复暴露于空气和光线中,因为油酰基双键易发生自动氧化。使用后应立即将化合物放回-20 °C储存,并在关键实验前通过分析方法验证其完整性。
该化合物能否用作脂质组学实验的内标?
在没有同位素标记类似物的情况下,该化合物可作为结构明确的参考化合物,用于方法开发和相对定量。但对于绝对定量,优先使用稳定同位素标记(如氘代)版本,以消除基质效应和离子化变异的影响。请查阅Aladdin Scientific目录以了解可用的同位素标记磷脂标准品。
参考文献
- Kolter T, Sandhoff K. Lysosomal degradation of membrane lipids. FEBS Lett. 2010;584(9):1700-1712. [Provides background on lysosomal lipid metabolism relevant to lyso-bisphosphatidic acid biology — verify applicability to this specific compound] doi:10.1016/j.febslet.2009.10.021
- Gruenberg J. The endocytic pathway: a mosaic of domains. Nat Rev Mol Cell Biol. 2001;2(10):721-730. [Contextual reference for lyso-bisphosphatidic acid in late endosomes — verify direct relevance to this compound] doi:10.1038/35096054
- Aladdin Scientific product page for I130515. [Primary source for SKU and product identity; detailed physicochemical data such as molecular weight, CAS number, and purity specification should be obtained directly from the product datasheet]
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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