实验方案(Protocols)

转基因肿瘤动物模型

简介

转基因肿瘤动物模型 ( animal models of transgene tumor) 将产生某些肿瘤的基因作为外源基因,构建出的人类肿瘤转基因动物模型,能帮助人们研究癌基因活性及肿瘤的发生机制和发展过程,并为肿瘤治疗提供实验依据。目前构建转基因肿瘤动物模型主要采用以下途径:直接将癌基因及促进肿瘤发生、发展的基因转入到动物体内,使这种基因能够在特定的组织表达或非特异性表达;转人肿瘤血管生成调控基因,从基因水平来调控肿瘤血管生成,利用肿瘤血管生长因子促进或抑制肿瘤形成及生长;转入肿瘤转移促进基因,主要是金属基质蛋白酶类;转人肿瘤细胞耐药相关基因等。

操作方法

制备转基因肿瘤动物

材料与仪器

器材:
显微操作仪

步骤

制备转基因肿瘤动物根据受体类型,分如下步骤:


(一)显微注射:

A、利用显微操作仪将体外构建的目的基因用极细的微吸管直接注射到处于原核时期的受精卵原核中,再将它植入假孕母鼠。


B、当受体胚胎在进行 DNA 合成或修复时,把外源基因整合到基因组中。


(二)逆转录病毒感染:

A、将外源 DNA 插入逆转录病毒的基因组中,制成高浓度病毒颗粒,通过病毒感染早期胚胎细胞,把外源基因整合到受体基因组中;


B、可以把载体病毒注入囊胚腔获得转基因动物;


C、也可直接将胚胎与能释放逆转录病毒的单层培养细胞共育。


(三)胚胎干细胞介导:

A、通常利用脂质体介导、电击或反转录病毒感染等,将外源基因导入干细胞中;


B、再移入胚泡期的宿主胚胎,最后将宿主胚胎移植到假孕母鼠子官内;


C、便可获得由胚胎干细胞介导的转基因动物。


(四)精子载体:

A、将成熟的精子与外源 DNA 进行预培养;


B、通过电穿孔或脂质体介导等方法,使精子有能力携带外源 DNA,并进入卵中使之受精;


C、使外源 DNA 整合到染色体中。


(五)体细胞核移植:

A、将外源目的的基因通过脂质体介导等方法转染动物体细胞、选择整合有外源目的基因的体细胞作为核供体。


B、将供体核移植入去核印母细胞。


(六)基因敲除:

A、根据同源重组原理,将外源 DNA 转入细胞与内源染色体上的一段特定的同源序列发生重组,达到改造基因组的目的。


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探索主题: 实验动物

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《转基因肿瘤动物模型》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/transgenic-tumor-animal-models.html
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