掌握血小板计数原理及技术

操作方法

目视法血小板计数实验

原理

尿素液能溶解红细胞及白细胞而保存完整形态的血小板，经稀释后在血细胞计数地内直接计数以求得每升容积血液内的血小板数．

材料与仪器

血小板稀释液 尿素

步骤

一．实验试剂：血小板稀释液　尿素（uren）10g/枸橼酸钠0.5g/40%甲醛0.1ml/蒸馏水加至100mL完全溶解后过iha ，置冰箱保存．四、实验方法：

l、清洁小试管加入血小板稀释液0.38ml．

2、先让手指温暖充直，皮肤消毒待干后深刺使血液自然流出擦去刚出现的少量血，（最好采用静脉抗凝血）．

3、用微量吸管迅速准确地吸取自然流出的第一滴血液20微升，取血时避免产生气泡或多次上下吮吸，取好后立即将血轻轻注入己盛稀释液的试管底部，吸上清液漱洗吸管三次，轻轻混匀．

4、擦净并放好计数板和盖玻片，将试管轻轻振荡1分钟，用吸管吸悬液一滴，注入计数池，避免产生气泡或溢出，放置10－15分钟，待血小板下沉．

5、先用低倍镜找到中央大方格，换高倍镜计数中央大方格内的血小板数各中格内的血小板差异不得超过10个，如每中格内血小板数小于1个时，应将全大格数完或另滴计数板，再数一大格作对照．

6、计算：5个中方格内所得的血小板×10⁹/L

要求报告血小板数是ΔΔΔ×10⁹/L

注意事项

1、全部用具和稀释液要特别清洁，显微镜仔细的擦净，无任何斑点玻璃器械清洁光滑，因为显微镜目镜，物镜，计数池和盖片上的尘埃可被误认为血小板．2、刺血一定要深（3mm）．3、血小板容易聚焦，在滴入计数池前充分混匀，用力太大会破坏血小板，太小则分布不均匀，因此要掌握适当．4、一定要等血小板完全下沉后再计数，计数要快和仔细，不要把污染微粒看成血小板．血小板结构与白细胞胞浆相似，在光线及焦距调节恰当时半透明有轻微折光性，边缘与中心结构一致，具有一定的形态．大小相差一般不很悬殊，而污染颗粒的大小不一相差悬殊，无一定形态，当旋转调节器时，有时很黑，有时很亮．参考值：1OO-300×109/L

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