WDR91概述及抗体规格

WDR91（WD重复结构域蛋白91）是一种含有多个WD40重复基序的蛋白质，该基序通常作为介导蛋白质-蛋白质相互作用的支架平台。WDR91与内体成熟及细胞内转运途径相关，在内体膜上磷酸肌醇信号的协调中发挥作用。

WDR91鼠源单克隆抗体（Ab351136）由小鼠产生，以PBS缓冲液供应，除产品数据表另有说明外，不含额外的载体蛋白或防腐剂。研究人员在使用前应查阅批次特定的质量检验报告（CoA），以确认浓度、纯度及经验证的应用信息。

样品制备

合理的样品制备对于使用WDR91鼠源单克隆抗体获得可靠结果至关重要。以下为通用指南，请根据具体样品类型和应用进行条件优化：

• 细胞裂解液：使用含蛋白酶抑制剂混合物的适当裂解缓冲液（如RIPA缓冲液）裂解细胞。于4°C、12,000 × g离心15分钟以去除细胞碎片。通过BCA法或Bradford法测定蛋白浓度。
• 组织裂解液：在冰上将新鲜或速冻组织匀浆于裂解缓冲液中，按上述条件离心后收集上清液。
• 福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片：根据需要使用柠檬酸缓冲液（pH 6.0）或EDTA缓冲液（pH 9.0）进行抗原修复，冷却后再进行封闭步骤。
• 冷冻切片：在室温下用4%多聚甲醛PBS溶液固定10–15分钟，然后用PBS充分洗涤。

注意：每种应用的具体方案应通过实验进行优化。请参阅产品数据表以了解经验证的应用信息。

推荐实验操作步骤

以下通用方案可作为使用WDR91鼠源单克隆抗体进行蛋白质印迹（WB）和免疫荧光（IF）应用的起始参考。请务必参阅产品数据表以获取特定应用的经验证稀释比例。

蛋白质印迹（WB）

1. 通过SDS-PAGE分离蛋白样品，并转印至PVDF或硝酸纤维素膜。
2. 用含5%脱脂奶粉或BSA的TBST在室温下封闭膜1小时。
3. 按推荐稀释比例（参见数据表）将WDR91鼠源单克隆抗体溶于封闭缓冲液中，于4°C孵育过夜。
4. 用TBST洗膜3次，每次10分钟。
5. 在室温下用适当的HRP标记抗鼠二抗孵育1小时。
6. 用TBST洗涤3次，每次10分钟，使用ECL底物检测信号。

免疫荧光（IF）

1. 根据需要对细胞或组织切片进行固定和通透处理。
2. 用含5%正常血清的PBS在室温下封闭1小时。
3. 按推荐稀释比例将WDR91鼠源单克隆抗体于4°C孵育过夜。
4. 用PBS洗涤3次，每次5分钟。
5. 在室温下避光孵育荧光标记的抗鼠二抗1小时。
6. 洗涤后，如需要可用DAPI复染细胞核，然后封片。
7. 使用适当的荧光显微镜设置进行成像。

注意：稀释范围和孵育时间应针对各实验室和具体应用进行优化。产品数据表中提供了经验证的稀释比例。

故障排查与优化建议

使用以下故障排查指南解决使用WDR91鼠源单克隆抗体时常见的问题：

每次实验均应设置阳性对照（已知表达WDR91的裂解液或组织）和阴性对照（省略一抗）。

储存、操作及质量注意事项

储存：收到WDR91鼠源单克隆抗体后应立即于-20°C储存。短期使用（不超过1个月）时，可在4°C储存。避免反复冻融，以免降低抗体活性并增加聚集风险。

操作：开瓶前短暂离心小瓶，使所有液体收集至底部。使用无菌操作以防止微生物污染。分装成单次使用的等份，以减少冻融次数。

配方：本抗体以PBS（磷酸盐缓冲液）供应。现有产品描述中未注明叠氮钠或载体蛋白；在用于活细胞实验或偶联反应前，请在批次特定的CoA上确认相关信息。

质量：每批次均经过性能一致性测试。建议研究人员索取质量检验报告（CoA），以获取批次特定的性能数据，包括经验证的应用、推荐稀释比例及特异性确认信息。