重组甘油激酶 (GK)

CAS: 9030-66-4 货号: G1493000 EC号: 232-862-0 PubChem CID: 135333386
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 ≥30 U/mg enzyme powder
Accession #
P0A6F3
表达系统
E. coli
生物活性
≥30 U/mg enzyme powder
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规格
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,生物活性,重组,高性能 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 27 篇同行评审文献引用。

概述


  Glycerol Kinase (GK, EC 2.7.1.30) is a key member of the kinase family, catalyzing the initial reaction in glycerol metabolism. In the presence of ATP, this enzyme can specifically catalyze the phosphorylation of glycerol, generating glycerol-3-phosphate (G-3-P) and ADP. 

Application

  In clinical analysis, this enzyme can be used for the enzymatic determination of glycerol and triglycerides by coupling with glycerol-3-phosphate oxidase, or with pyruvate kinase and lactate dehydrogenase, or with lipoprotein lipase.

Assay procedure

Principle

  The appearance of quinoneimine dye is measured at 500nm by spectrophotometry.

Unit definition

  One unit causes the formation of one micromole of hydrogen peroxide(half a micromole of quinoneimine dye)per minute under the conditions described below.

Reagents

A. Glycerol solution:0.3M(Should be prepared fresh)

B. 4-AA solution:0.1%(100mg of 4-aminoantipyrine/100ml of H₂O₂)

C. Phenol solution:0.1% (100mg of phenol/100ml of H₂O₂)

D. Peroxidase solution:20mg Peroxidase(110purpurogallin unit/mg)/100ml of H₂O₂

E. G-3POD Solution:20U/ml(dissolve in 200Mm HEPES buffer,pH7.9)

F. Buffer solution: 200Mm HEPES,pH7.9 contg.20Mm MgCl2 and 40mM ATP (Should be prepared fresh)

G. Enzyme diluent: 20mM K-phosphate buffer,pH7.5

Procedure

1. Prepare the following working solution in a brownish bottle and store on ice.

10ml4-AA solution(B)
20mlPhenol solution(C)
20mlPreoxidase solution(D)
40mlG-3POD solution(E)
10mlBuffer solution(F)

Concentration in assay mixture

HEPES buffer95.2mM
Glycerol4.76mM
ATP3.81mM
MgCl 21.90mM
4-AA0.469mM
Phenol2.02mM
G-3-PODca.7.6 U /ml
PODca.5.2 U /ml

2. Pipette 3.0ml of working solution into a cuvette (d=1.0cm). (d=1.0 cm)

3. Add 0.1ml of the enzyme solution* mix by gentle inversion and equilibrate at 37℃ for about 5 minutes.

4. Add 0.05ml of glycerol solution(A)and mix by gentle inversion.

5. Record the optical density at 500nm against water for 3 to 4 minutes in a spectrophotometer thermostated at 37℃,and calculate the ∆OD per minute from the initial portion of the curve(∆OD test).

At the same time,measure the blank rate(∆OD blank)by using the same method as the test except that enzyme diluent (G) is added instead of the enzyme solution.

* Dissolve the enzyme preparation in ice-cold enzyme diluent(G)and dilute to 0.2~0.4U/ml with the same buffer,immediately before assay.

Calculation

  Activity can be calculated by using the following formula:

Vt: Total volume (3.15ml)

Vs: Sample volume (0.1ml)

13.3: Millimolar extinction coefficient of quinoneimine dye under the assay conditions (cm²/μmol)

1.0: Light path length (cm)

1/2: Factor based on the fact that one mole of H₂O₂​ produces a half of quinoneimine dye.

df: Dilution factor

C: Enzyme concentration in dissolution (C mg/ml)

规格

产品名称
重组甘油激酶 (GK)
英文别名
Glycerokinase | GyK | glpK
规格或纯度
生物活性,重组,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥30 U/mg enzyme powder
生化机理
Key enzyme in the regulation of glycerol uptake and metabolism. Catalyzes the phosphorylation of glycerol to yield sn-glycerol 3-phosphate. It also catalyzes the phosphorylation of dihydroxyacetone, L-glyceraldehyde and D-glyceraldehyde. It uses only ATP.
生物活性
≥30 U/mg enzyme powder
表达系统
E. coli
来源
重组表达
CAS编号和信息
9030-66-4
酶学委员会编号
EC 2.7.1.30
分子类型
酶
产品线
biological_products
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥30 U/mg enzyme powder
复溶
Reconstitute in 20mM K-phosphate buffer,pH7.5.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(24个月);复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
1个酶活单位等于在pH7.9和37°C条件下1分钟生成1微摩尔过氧化氢(1/2毫摩尔醌染料)的酶量。

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0130792 分析证书 G1493000
ZJ26F0130791 分析证书 G1493000
技术文档和文章
糖脂代谢交叉调控与代谢性疾病发生发展的分子机制
Molecular Mechanisms of Crosstalk Between Glucose and Lipid Metabolism in the Initiation and Progression of Metabolic Diseases
甘油利用与代谢重编程的代谢基础及研究框架
Metabolic Basis and Research Framework of Glycerol Utilization and Metabolic Reprogramming
甘油-3-磷酸通路的代谢功能与实验检测:糖酵解、甘油脂合成和线粒体穿梭
Metabolic Functions and Experimental Detection of the Glycerol-3-Phosphate Pathway: Glycolysis, Glycerolipid Synthesis, and Mitochondrial Shuttle
此产品的引用文献
溶液计算器

常见问题

什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 9030-66-4。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。