实验方案(Protocols)

从 PEI 沉淀洗脱 σ32 和 RNA 聚合酶实验

简介

本实验介绍从 PEI 沉淀洗脱Σ32 和 RNA 聚合酶需要的盐量。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

操作方法

从PEI沉淀洗脱σ32和RNA聚合酶实验

材料与仪器

缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A
SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶

步骤

材料与设备

SDS-PAGE 电泳装置

聚丙烯酰胺小胶(10%)

试剂

缓冲液 A

含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的缓冲液 A

(配方,见“试剂的配制”,PP.184~189)

操作程序

1)PEI 悬液(见 p.153) 于离心前取 6X50ul 等分试样。各试样用微型离心机离心 lmin, 然后用 50ul 分别含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的缓冲液 A 重悬沉淀物。

2) 充分混匀后静置 10~15mi。再用微型离心机离心 lmin,取上清样品,如需要,进行快速蛋白质斑点印迹试验(见 pp.l72~173) 和 SDS-PAGE 电泳分析。

结果

典型的显示 NaCl 洗脱实验结果的 SDS 凝胶照片,见图 3-5。


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探索主题: 蛋白质实验

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《从 PEI 沉淀洗脱 σ32 和 RNA 聚合酶实验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/elution-from-pei-precipitation-s32-and-r.html