实验方案(Protocols)

间接凝集抑制试验

简介

将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后,再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合,如待测样品中含有相应抗原,便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后,就没有相应的抗体与乳胶颗粒表面的抗原结合,因而就不出现凝集现象,此为乳胶凝集抑制反应,所以不发生凝集者为阳性,表明待测样品中含有相应抗原;发生凝集者为阴性,提示待测样品中无相应抗原

操作方法

间接凝集抑制试验

原理

将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后,再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合,如待测样品中含有相应抗原,便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后,就没有相应的抗体与乳胶颗粒表面的抗原结合,因而就不出现凝集现象,此为乳胶凝集抑制反应,所以不发生凝集者为阳性,表明待测样品中含有相应抗原;发生凝集者为阴性,提示待测样品中无相应抗原。本法主要用于检测可溶性抗原,如乳胶妊娠试验,就是先将待测孕妇尿液(含有人绒毛膜促性腺激素,HCG)与已知抗HCG抗体作用,从而抑制了抗HCG抗体与致敏乳胶颗粒表面上的HCG结合,于是乳胶凝集被抑制

材料与仪器

待检尿液 孕妇 HCG 阳性尿液
吸附 HCG 聚苯乙烯乳胶抗原 兔抗人 HCG 免疫血清(抗体) 生理盐水
载玻片 滴管 牙签 特种铅笔 光学显微镜

步骤

1. 取玻片一张置实验台上 , 用特种铅笔将其划分为三格 , 并注明1、2、3。

2. 用滴管吸取盐水一滴加至第 2 格 , 然后取待测孕妇尿一滴加至第 1 格中 , 另吸取阳性孕妇尿一滴加至第 3 格。

3. 于第1、2、3三格中各滴加一滴兔抗人 HCG 免疫血清 , 分别用牙签将反应液充分搅拌混匀 , 静置 3Os 至 1min。

4. 于第 1、2、3 格中各滴加一滴 HCG 致敏的乳胶抗原 , 分别用牙签搅拌混匀 , 静置lOmin 左右观察结果

乳胶妊娠试验

注意事项

1. 所用诊断试剂必须在有效期内使用 , 用前应充分摇匀。

2. 滴管和搅拌反应液的牙签不能共用。

3. 加样不宜过多 , 玻片应平置 , 以防两格反应液溢流相混。

4. 如肉眼观察不够清楚 , 可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。

常见问题

第 1 格出现均匀一致的细小凝集颗粒者为阴性(非妊娠尿),如仍为均匀乳胶液体不凝者为阳性(妊娠尿)。


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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《间接凝集抑制试验》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/indirect-agglutination-inhibition-test.html