雌二醇检测实验
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，检测雌二醇可用于（1）食品安全中激素添加剂测定（2）养殖饲料中非法激素的添加（3）临床样本的快速测定。
主题
免疫学实验
用于检测、定量和定位抗原与抗体的技术——ELISA、免疫印迹、免疫组化与流式细胞术。以下是我们知识库中标注该主题的实验方案、常见问题与技术文章。
189 项资源 · 实验方案、常见问题与文章
多克隆抗体纯化实验
辛酸提取法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。
交叉保护中和实验
动物受到病毒感染后，体内产生特异性中和抗体，并与相应的病毒粒子呈现特异性结合，因而阻止病毒对敏感细胞的吸附，或抑制其侵入，使病毒失去感染能力。中和试验 (Neutrali
放射免疫对流电泳实验
将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时，沉淀线通过自显影而证实。适用于（1）疾病的快速诊断（2）抗原的半定量测定（3）抗体相对浓度的分析。
酶免疫电泳技术
酶免疫电泳技术可应用于酶蛋白的分析鉴定。
多克隆抗体制备实验
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体（Monclone antibody）。由多种抗原决定簇刺激机体
血清学选克隆新抗原或新基因
E.coli/ phage 裂解吸附血清去除血清中能与细菌和噬菌体裂解蛋白进行免疫反应的抗体，这样可以减少假阳性率，血清可以是病人血清，也可以是免疫血清，如果是病人血清，则需
免疫组织化染色
免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来
人肿瘤抗原的识别与鉴定实验
人肿瘤抗原可以：（1）用于肿瘤诊断；（2）免疫治疗。
斑点金免疫渗滤测定（DIGFA）实验
斑点金免疫渗滤测定（DIGFA）可用于临床检验。
肿瘤蛋白疫苗预防性实验
肿瘤蛋白疫苗预防性实验旨在考查疫苗的靶点是否针对多种抗原，可以覆盖90%甚至是100%的不同肿瘤亚型患者以及是否能在肿瘤形成之前提高机体的免疫系统。
ELISPOT
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ELISA）检测体液中
肿瘤蛋白免疫预防性实验
免疫学防治指应用各类生物性或非生物性生物制剂，建立、增强或抑制机体的免疫功能，达到预防和治疗疾病的目的。
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）可用于：（1）作为体外实验模型细胞；（2）研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。
抗原特异性T细胞克隆制备实验
抗原特异性T细胞克隆制备实验可以用于：制备抗原特异性T细胞克隆。
MTT（四唑盐）比色法
四唑盐（MTT）比色法可应用于：（1）检测细胞存活和生长；（2）大规模的抗肿瘤药物筛选；（3）细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定；（4）生物活性因子的活性检测。
胰岛素测定实验
放射免疫测定胰岛素可以用于：（1）以放射性同位素作为示踪物进行免疫标记检测技术；（2）用同位素标记的抗原和样品中待测的未标记抗原与固定量的特异性抗体竞争结合，或进
中性粒细胞吞噬功能的测定
中性粒细胞吞噬功能的测定可用于：（1）检测机体吞噬功能；（2）诊断吞噬细胞功能障碍相关的疾病。
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定主要应用于（1）免疫细胞功能的测定（2）临床自身免疫性疾病的诊断（3）多克隆次级信号转导分子。
实验动物免疫方案
用免疫学的基本理论和技术来诊断、预防和治疗疾病，并在此基础上开展的采用人工方法向机体输入由他人或动物产生的免疫效应物，如免疫血清、淋巴因子等，使机体立即获得免疫
免疫器官识别实验
免疫器官包括中枢免疫器官和外周免疫器官。在哺乳类动物，中枢免疫器官包括胸腺和骨髓；在禽类，中枢免疫器官包括胸腺和法氏囊。外周免疫器官有淋巴结、脾脏等。（内容来源
低丰度核酸反转录及扩增实验
此方法仅使用一种重组的酶——rTth DNA聚合酶，它可在一个反应中同时进行反转录和扩增，从而不再需要两种不同的缓冲体系。
组织切片的免疫荧光双标记实验
间接免疫荧光显微镜检术可使两种或更多种抗原可以在同一切片，同一时间内被显示出来，可用于（1）细胞标记；（2）免疫荧光筛选干细胞。
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
这是一种非常敏感的方法。用以构成HRPO-抗过化物酶（PAP）复合物的抗体，其类型必须与被桥连抗体所识别的第一抗体相同。
组织切片的免疫金标记
免疫金标记技术（immunogold labelling technique）是以胶体金作为示踪物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸
悬浮细胞的免疫荧光标记实验
免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在
凝集吸收实验
肠道杆菌中的许多细菌都有部分相同的抗原结构。因之一种细菌可与另一种细菌相应的抗血清发生交叉凝集反应。用一种过量的细菌抗原与发生交叉凝集反应的抗血清相结合。可将其
免疫相关的细胞形态的观察实验
所有的生物都是由细胞组成的，只是不同的生物体细胞的大小和形状有所不同。有的细胞人的眼睛可以看得见，如鸟类的蛋，最大的直径近10厘米（鸵鸟蛋）。
脊索瘤的磁共振成像诊断及鉴别诊断实验
脊索瘤源于残余的胚胎脊索或异位的脊索，只发生在中轴骨，好发于脊柱两端。在病理上有两种基本类型，一种属于良性，生长缓慢，常常偶然被发现；另一种属于恶性，肿瘤呈破坏
组织芯片制备的技术路线和基本制作过程
通过组织芯片制作机细针打孔的方法，从众多的组织蜡块（称为供体蜡块，donor）中采集到数十至上百的圆柱形小组织（组织芯，tissue core），并将其整齐排列另一空白蜡块（称
吞噬细胞吞噬功能检测实验
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
如果在切片之前用蔗糖对组织进行固定及浸制，通常对冰冻切片来说组织形态。来源：《神经生物学实用实验技术》
豚鼠T淋巴细胞的测定—兔红细胞玫瑰花环实验
人类T和B淋巴细胞表面具有不同的受体。由于人类T淋巴细胞表面具有与绵羊红细胞结合的受体，能与绵羊红细胞非特异性结合，形成E花环，因此，T细胞也成为红细胞花瓣形成细胞
单向免疫扩散实验
单项免疫扩散实验可以用于：检测正常人群或患者血清中 IgG、IgA 及IgM 的水平。
酶联免疫吸附（ELISA）测定伤寒杆菌“O”抗体实验
酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体（或SPA）检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高，特异性强。常用的是ELISA方法，间接法，双抗体法和抗原法。
链亲和素-生物素结合物免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用。
血清学筛选克隆新抗原/新基因
通过以血清的各种反应为中心的机体免疫反应和变态反应的研究体系来筛选新抗原和新基因。
混合淋巴细胞培养实验
混合淋巴细胞培养（MLC）或称混合淋巴细胞反应（MLR）以往为用于器官移植前的组织配型，以测定受体和供体主要组织相容性抗原（HLA抗原）相容的程度。由于MLC中淋巴细胞接受
对流免疫电泳实验
对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术，其基本原理是：在琼脂板上打两排孔，左侧各孔加人待测抗原，右侧孔内放人相应抗体，抗原在阴极侧，抗体在阳极侧。通电后
杀伤细胞功能的检测实验
杀伤功能是机体免疫功能的一个重要方面，免疫系统中有多种具有杀伤功能的靶细胞，如自然杀伤细胞（NK）、细胞毒性T细胞（CTL）、具有ADCC作用的单核细胞巨噬细胞等。
淋巴细胞转化实验
淋巴细胞转化实验在临床上应用可用于（1）反映出受试者T细胞总体水平的应答功能，判断细胞免疫状态和探讨发病机制（2）选择适宜的移植供体（3）寻找迟发型变态反应的原因（
抗体产生细胞的检测—溶血空斑实验
取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏，制成脾细胞悬液，与一定量的指示细胞（绵羊细胞）和补体结合，注入自制的小室内，经37℃孵育后，单个散在的抗体形成释放抗体，抗体与周围的绵羊
单层生长细胞的免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用。
组织切片的免疫荧光标记实验
免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，可用于（1）检查抗原抗体结合部位（2）免疫学和组织学检测。
火箭电泳实验
定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中，在电场作用下，引起抗原抗体的迁移和相互反应，当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰，由于电泳继续进行，样品孔不断有
白细胞移动抑制实验
致敏的T淋巴细胞与相应的抗原反应，能引起代谢活化，并释放出多种有生物活性的物质。其中有抑制单核，巨噬细胞移动的因子（MIF）及抑制多型核白细胞移动的因子（LIF），正
溶血反应实验
免疫血清与其相应的抗原细胞，血球、细菌及其组织细胞相遇，并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。
补体测定实验
补体测定就是指测定总补体溶血活性，用于检测各种急性炎症。
补体结合反应实验
当抗原与其对应的抗体结合时，所生成的抗原抗体复合物能从溶液中将补体吸着此即谓补体结合。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液，故补体结合现象不能被肉眼看出来，因此必
B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白的检查实验
B淋巴细胞膜表面免疫球蛋白的检查实验可以用于：检测B淋巴细胞的存在。
检测凋亡和其他形式的细胞死亡
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
从小鼠脾脏分离小鼠天然杀伤细胞
作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
树突细胞的分离实验
这个单元介绍两种分离树突细胞（DC) 的方法：从小 鼠 脾 脏 分 离DC和从小鼠骨髓前体细胞获得大量DC。 作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指
小鼠单个核细胞的分离实验
首先介绍从小鼠淋巴器官制备细胞悬液的基本技术，包括去除红细胞和死细胞 的方法。 作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
假复层纤毛柱状上皮形态学观察实验
本实验来源于贵阳中医学院基础医学实验教学中心网站
免疫血清的制备实验
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂（如用于制备免疫标记抗体等），也可供特异性免疫治疗用。（来源：医学基础
双向免疫扩散法测定抗血清效价实验
双向免疫扩散法可用于：（1）诊断疾病；（2）测定抗体的效价。
识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备
抗磷酸肽的抗体可以识别仅处于磷酸化状态的蛋白质。该抗体不与同种的未磷酸化蛋白质或其他磷酸蛋白质发生交叉反应。由于蛋白质的磷酸化状态通常反映一种蛋白质的功能状态或
微量免疫电泳实验
学习凝胶内分离蛋白质的电泳技术与利用抗原抗体的特异性反应的免疫扩散技术结合起来， 分析鉴定抗原或者抗体的免疫化学方法。 （来源：生物化学与分子生物学实验指导，邵雪
溶血空斑形成试验
溶血空斑形成试验是一种体外检测单个抗体形成细胞（浆细胞）的方法，故又称体外抗体形成细胞（PFC）测定技术。此项技术不仅可以作为免疫基本理论研究的有力工具，广泛地用
B 细胞功能的检测
作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
核酸免疫实验
介绍了用表达抗原的 DNA 增强免疫应答的途径。介绍了核酸免疫的两种方法：①注射含有 DNA 表达载体的生理盐水；② 用 基 因 枪 注 射 DNA。还包括了基因枪方法中使用的 DNA
脂筏的分离和应用
在免疫学中脂筏是很重要的，因 为 T 细胞受体和几个其他重要的T 细胞信号转导蛋白均存在于脂筏中，或者在转导信号时被募集到脂筏中。与此相似，嗜碱粒细胞上高亲 和 力 IgE
B 淋巴细胞活化的早期事件
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
妊娠测定实验
将待测孕妇尿液（含有人绒毛膜促性腺激素，HCG）与已知抗HCG抗体作用，从而抑制了抗HCG抗体与致敏乳胶颗粒表面上的HCG结合，于是乳胶凝集被抑制。
T 淋巴细胞增殖实验
本单元主要介绍小鼠T 淋巴细胞增殖实验 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)
石蜡切片制作可以用于：（1）保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原貌。（2）是光学显微镜的主要制片方法。
免疫荧光补体法实验
本实验方法来源于第四军医大官方网站
间接凝集抑制试验
将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后，再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合，如待测样品中含有相应抗原，便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后，就没有相应
电镜酶细胞化学实验
目前电镜能定位的酶主要有三类，它们是水解酶、氧化酶、转移酶。通过电镜酶细胞化学技术间接证明酶的存在，可定性研究细胞的标志酶，以及在正常和病理状态下酶的改变与疾病
灌注固定实验
来源：《神经生物学实用实验技术》第四军医大学出版社
IHC 增敏实验
提高 IHC 敏感性有几种途径。一是依靠各种 IHC 的前处理，例如酶的消化、高温的抗原修复，虽然对其的基本原理不十分清楚，但却十分实用；其次是增加 IHC 方法的放大倍数，
双向免疫扩散实验
抗原、抗体在凝胶中扩散，并进行沉淀反应，叫做免疫扩散反应（immunodiffusion）。将抗原与其相应抗体放在凝胶（如琼脂）平板中的邻近孔内，使它们互相扩散，当扩散到两者
分离人肠黏膜单个核细胞
分 离 人 肠 黏 膜 单 个 核 细 胞 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
T细胞杀伤功能的检测
T细胞杀伤功能的检测可以应用于（1）免疫细胞功能测定（2）临床免疫诊断。
抗原呈递细胞的选择和制备
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
环状沉淀反应实验
环状沉淀反应广泛应用于法医学的血迹鉴别和食物掺假的测定。通常这些可疑材料作为抗原，用标准抗血清加以鉴定。它具有用材少的优点，例如衣服等物品上的血迹用生理盐水洗下
人单核/ 巨噬细胞的表型检测
提供一种人单核/ 巨噬细胞的表型检测方法。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
T 细胞亚群的分离纯化
分离出来的T 细胞用抗CD8 抗体可分为CD4 + 和 CD8+ T 细胞。由于两种细胞都可 回收，此法优于抗体和补体溶解法 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫
小鼠巨噬细胞的活化
巨噬细胞的活化经历两个阶段：致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导
钙质染色实验
钙质沉积于骨组织或病理变化的组织中，多见于组织坏死、动脉粥样硬化和肿瘤等钙化的组织。在茜素的作用下，可与钙形成有色的螯合物（钙质）成分。内容来源《免疫组织化学实
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
制备抗磷酸肽的抗体（即识别磷酸化肽的抗体）是可能的，该抗体只识别处于磷酸化状态的蛋白质，而不会与非磷酸化的同类蛋白质或其他磷酸蛋白质发生交叉反应。由于磷酸化经常
单克隆抗体腹水制备实验
与多克隆抗血清相比，采用单克隆抗体（MAb) 的最主要的优势就是有可能得到大量的特异性单克隆抗体可供应用。MAb 制剂通常包括杂交瘤上清、由接种了杂交瘤的小鼠制备的腹水
人 T 细胞的克隆和扩增
抗原特异性T 细胞的诱导 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
外周血和脐带血中分离单个核细胞
外周血单个核细胞可应用于： （1）免疫学（包括自身免疫性疾病），传染病，血液系统恶性肿瘤，疫苗开发，移植免疫学研究； （2）预测药物和异生素免疫抑制作用； （3）高通
免疫分子与受体工程学
介绍了一种制备可溶性M H C -I g 二聚体的方法，介绍了一种制备多聚体M H C -I/肽复合物的方法。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
免疫荧光和细胞分离
流式细胞仪用于分析细胞表达的膜表面抗原和胞内抗原，能够特异性地区分异质性群体中的不同细胞类型、评价分离细胞亚群的纯度、分析细胞大小和体积。该技术主要检测结合了某
流式细胞仪检测细胞内因子
本单元介绍用4 色 荧 光 分 析 CD4+ T 细 胞 内 表 达 IFN-7、 IL-4、 IL- 2 水平的方法 (可用于计算T h l 和 T h 2 细胞比例）。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本
抗原与免疫血清的制备实验
将抗原注射于动物体，可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体，待动物血清中累积大量抗体时，采集其血液，分离析出血清，此即含抗体的免疫血清，或称抗血清
肥大细胞染色实验
肥大细胞来源于未分化的间质细胞，分布于血管周围黏膜下、疏松结缔组织、肿瘤组织及过敏性疾病等组织中，易被异染性染料着色。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》
制备小鼠 T 细胞杂交瘤
可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 （T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子
细胞毒性 T 淋巴细胞的诱导及检测
本单元介绍几种诱导细胞毒性 T 淋巴细胞并检测其活性的实验方案请记住，原则上任何种类的细胞都可以用来作为检测 C T L 活性的靶细胞，但最好的靶细胞是淋巴母细胞、组织培
采用细胞内荧光染料 CFSE 检测淋巴细胞的迁移和增殖
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
B 细胞功能的增殖检测方法
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
可溶性白细胞介素 2 受体检测实验
可溶性白细胞介素2受体SIL-2R的浓度的高低与许多疾病有密切联系，如成人T淋巴细胞白血病艾滋病、B细胞慢淋、毛细胞白血病，以及肾移植后发生急性排斥反应时或异基因骨髓移
DNA 和 RNA 靶序列的原位 PCR 扩增实验
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术，就是在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的
IL-8 生物学活性检测实验
IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用，通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性，即对中性粒细胞的趋化活性。
IL-6 生物学活性检测实验
MH60.BSF2为IL-6依赖细胞株，MH60.BSF2细胞增殖量同IL-6的生物学活性呈正相比。
IL-4 生物学活性检测实验
IL-4主要是由TH细胞活化后产生的一种细胞因子。CT.4S细胞为IL-4的依赖细胞株，对IL-2呈现低反应性，其增殖反应与IL-4的活性呈正相关系。检测IL-4的生物学活性水平，可间接
免疫细胞化学ICC
定位检测抗原表达
细胞膜糖类电镜显示实验
细胞膜糖类电镜显示实验可以用于：观察细胞膜上的糖蛋白和糖脂。其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术，此外，还有钌红染色法等。
人 α2a，α2b 干扰素检测实验
重组人α2a/α2b干扰素生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而
电化学发光免疫测定
标记免疫测定
白细胞介素 8（IL- 8）检测实验
Il-8是一种分子量为8～10kD的多肽，对嗜中性粒细胞，T淋巴细胞、嗜硷性粒细胞具有趋化作用，并可激活嗜中性粒细胞，是一种重要的炎症介质。在严重感染病人的血清中、炎症局
离子细胞化学实验
离子细胞化学可用来显示细胞内离子定位分布，目前用得比较多的是显示细胞内钙的分布，通常需结合EDX能谱分析。细胞内钙离子分布是高度隔室化的，形成钙离子浓度不同的钙池
T、B 淋巴细胞分离实验
淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群，它们具有不同的特性和功能，用于（1）免疫学研究（2）淋巴细胞的鉴定。
免疫球蛋白 G (IgG) 片段的水解
一个新的抗体需要片段化的时候往往要进行摸索性的试验。选择反应时间的时候宁可保留部分抗体不被完全降解，这样可以避免蛋白酶过分裂解后导致抗体结合位点的破坏 。作者：J
T 细胞克隆的建立
本单元提供了建立特异性T 细胞克隆的方法。注意该方法成功的关键是选择和制备条件培养基。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
示踪细胞化学实验
由于高电子密度示踪剂很容易在细胞间隙扩散，并且如果细胞发生损伤，示踪剂还可进入到细胞中去，因此可利用此方法观察细胞连接及细胞损伤情况。常用的示踪剂有镧、过氧化物
IL-2 生物学活性检测实验
白细胞介素-2（IL-2）是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子，具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检
磁珠法分离 T 细胞和 B 细胞
本单元介绍用磁性分离技术分离 T 细胞、 B 细胞，以 及 T 细胞亚群的方法。作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
IL-1 生物学活性检测实验
白细胞介素-1（IL-1）主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子，具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1
IL-10 生物学活性检测实验
在小鼠IL-4（Mil-4）存在的情况下，IL-10可刺激D36小鼠肥大细胞株增殖。而单一的mIL4或hIL-10则仅有很低的增殖刺激活性。
免疫电镜标本固定实验
免疫电镜标本取材后需要进行固定。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》
靶细胞杀伤实验：Cr51 法
检测效应细胞的杀伤活性
抗体可变区（ V 区）的克隆、表达和修饰
基于 PCR 的克隆方案利用了可变区中框架区和先导区的保守序列，尽管用框架区中的保守序列可合成引物，用于克隆可变区，但会引起框架区中氨基酸的改变，从而影响抗原结合。
BrdU 检测丁细胞和 B 细胞增殖
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
乙酰胆碱受体显示细胞化学实验
乙酰胆碱受体分布于神经肌肉接头等处，蛇毒素可与之紧密结合，并连接过氧化物酶，通过化学反应可在电镜下观察到乙酰胆碱受体分布。来源：《免疫组织化学实验技术及应用》
凝集素显示糖类细胞化学实验
凝集素（lectin）是一种无免疫原性糖蛋白，与糖的结合有一定专一性，如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合，麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且，凝集素还可与标记物
淋巴细胞活化过程中肌醇磷脂周转的分析
受 体 介 导 的 磷 脂 酶 C (P L C ) 的 活 化 引 起 膜 肌 醇 磷 脂 的 水 解 ，产 生 二 酰 甘 油(D A G ) 和水溶性肌醇磷酸。 T 细胞和B 细胞抗原受体均利用此信号机制
NK/LAK 细胞杀伤活性的检测
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
Fcγ 受体介导的黏附作用和吞噬作用的检测
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
γ 干扰素的检测
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
IL-13 的检测
ELISA对人或小鼠IL-13 高度特异性，不识别样品中的其他细胞因子。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
IL-10 的检测实验
本方案在E LISA方法中釆用小鼠IL- 1 0特异性的抗体检测小鼠IL- 1 0 , 不能检测人或病毒的IL-10。 使用针对其他种属的抗IL- 1 0 的抗体按照相同的操作流程可以检测其他种属
α-、 β-和 γ-干扰素诱导的抗病毒活性的检测
实验所用的细胞是小鼠的L 929成纤维细胞，这种细胞具有对干扰素和V S V 的高敏感性。细胞应当来源于已经建立此项检测的实验室而非商业化的途径。持续而稳定的细胞传代有益
人 NK T 细胞的分离和扩增
本方案可对微量的N K T 细胞进行鉴定和定量分析。应采取有效措施阻断非特异染色 ，以获得可靠的实验结果。本实验联用两种单抗以确保结果的特异性。作者：J.E.科利根等,译者
ELISA 检测抗体的含量
本方法可检测血清或细胞培养上清中IgG、 I g M 和 IgA (图 8. 1 0 . 1 ) 的含量。检测孔中液体颜色的深浅与上清中I g 的含量成正比作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本
巨噬细胞一氧化氮的检测
本 方 案 通 过 检 测 活 化 后 巨 噬 细 胞 （贴 壁 型 或 非 贴 壁 型 ）培养上清 中 亚 硝 酸 盐的含量，反映一氧化氮的分泌水平作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本
外源性抗原向 T 细胞的呈递
对于颗粒性抗原或脂质体包裹的抗原，应用巨噬细胞作为抗原呈递细胞。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
小鼠巨噬细胞的分离
介绍一种小鼠巨噬细胞分离的方法作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
IL-15 的检测
E L I S A 方法可被用来检测培养上清和血清样品中的人IL- 1 5 。 这种方法也可用来检测 猴 的 IL-15,但必须使用重组猴IL-15作为标准来修正所得数据作者：J.E.科利根等,译者
抗磷酸化酪氨酸的印迹检测
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
小鼠巨噬细胞的表型检测
由于缺乏巨噬细胞或巨噬细胞不同分化阶段特征性的表面标志，目前根据不同类型巨曬细胞的表面分子.表达谱，联合运用多种荧光素标记的单抗，经流式细胞仪检测后鉴定巨噬细胞
IL-12 的检测实验
此为特异性检测IL-12异二聚体的方法。因为不能检测IL-12 p4 0 单 体 ，因此本方法能够在过量IL-12 p4 0 亚基存在的情况下检测IL-12 p7 5 异二聚体。作者：J.E.科利根等,译
IL-2 和 IL-4 的检测实验
介绍 了 使 用 鼠 IL-2和 IL- 4 的中和抗体，在一种细胞因子存在的情况下来检测并定量其中一种细胞因子的方法。由于小鼠细胞不能针对人IL- 4产生应答，使用细胞株对建立人I
IL-18 的检测
新合成的IL-18是无信号肽的前体分子，被酶解后才能活化。在 本 E L I S A 方法中，为了 只 检 测 成 熟 （活化）的 IL-18,包被抗体必须对活化的IL-18具有特异性。一些细胞
免疫磁珠法分离 B 细胞亚群
抗 C D 1 9 标 记分离出的B 细胞 ，其信号强度相对较低，所显示出的有丝分裂和抗体分泌反应都与阴性筛选得到的B细胞类似。为预防阳性选择可能激活细胞，可用抗体的F (al/)2
ELISPOT 方法检测分泌细胞因子的细胞
酶联免疫斑点实验（酶联免疫斑点实验（ELISPOT) 的原理是分泌某些蛋白质分子（如细胞因子）的细胞在短时间内能够分泌相对较高浓度的蛋白质分子到周围环境中。作者：J.E.科
免疫复合物方法检测酪氨酸蛋白激酶
由于酪氨酸蛋白激酶（T P K ) 的低丰度表达及其快速活化与失活，使之很难利用常规的生化途径进行纯化。通过免疫复合物蛋白激酶实验，可检测特定T P K 的存在与否及其功能状
抗体的体内诱导和检测
ELISA 法检测体内抗体的产生作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
IgG 的分离与提纯实验
IgG的分离与提纯实验可以用于：制备酶标抗体或荧光抗体。
B 细胞分泌抗体的检测
以下以美洲商陆蛋白为例介绍丝裂原诱导的B 细胞产生抗体。本方法经调整后也适用于其他多种刺激因子和淋巴细作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
与分析Ficoll分离后的单个核细胞相比，本方法分析全血细胞，因而所用时间短，需要的样本量少，并且可以避免Ficoll分离后的细胞，尤 其 是 B 细胞的损失。作者：J.E.科利根
制备 EBV 转化的 B 细胞
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
T细胞中丝裂原活化的蛋白激酶 （MAPK) 活性分析
作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
巨噬细胞抗肿瘤活性的检测
具有肿瘤细胞杀伤活性的小鼠巨噬细胞株，如 A N A -1 和 G G 2E E 。小鼠原代巨噬细胞可新鲜分离。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
巨噬细胞吞噬功能和杀伤功能的检测
一种巨噬细胞吞噬功能和杀伤功能的检测方法。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」
用流式细胞仪检测细胞因子的分泌和分离分泌细胞因子的细胞
本方案是检测体外活化的抗原特异性T 细胞产生细胞因子的方法。如果在体外用其他刺激物或刺激细胞（如 用 L P S 刺激单核细胞），或体内刺激的细胞直接在体外分析，从用捕获
免疫细胞吞噬功能测定
机体内具有吞噬（phagocytosis）功能的细胞称为吞噬细胞，主要包括单核巨噬细胞和中性粒细胞两大类。吞噬细胞吞噬、消化、清除侵人人体的细菌等异物以及人体产生的衰老、损
免疫荧光技术检测血清中抗核抗体实验
抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是针对细胞核成分的自身抗体，没有器官和种系特异性，ANA 阳性提示患有 SLE 或风湿病等自身免疫性疾病。免疫荧光（immunofluorescen
人蜕膜基质细胞的分离及纯化
子宫内膜蜕膜化是胚胎着床及成功妊娠的关键步骤。蜕膜组织的细胞成分相当复杂，其中蜕膜基质细胞约占全部蜕膜细胞数的75％，是母胎界面的主要组成细胞。这些细胞起源于间质
人绒毛外滋养细胞分离与培养
滋养细胞生物学功能的正常行使是维持正常妊娠的关键环节。胚胎着床后，滋养细胞分裂、增殖，分化形成生物学特性明显不同的EVCT和绒毛滋养细胞（villous cytotrophoblasts，
小鼠骨髓前体细胞培养树突状细胞
树突状细胞（dendritic cell，DC）在体内数量极少（它在脾脏贴壁细胞中所占的比例小于 1％），从体内分离 DC 耗时而且细胞产量很低，大大延缓了对 DC 的研究。因此，从前体
小鼠腹腔巨噬细胞分离及纯化
巨噬细胞（macrophages，MΦ）是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞，广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、神经系统以及结缔组织等，具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调
B 细胞功能亚群的鉴定
外周成熟 B 细胞可以分为多个亚群.传统上根据表型、组织学定位和功能特点的不同将 B 细胞分为 CD5+的 B1 细胞和 CD5 的 B2 细胞两个亚群。B细胞主要功能是分泌抗体参与体液
抗癌药物对 ⅡDNA 拓扑异构酶作用的实验
抗癌药物对DNA拓扑异构酶活性的影响实验是用琼脂糖凝胶电泳法来测定抗癌药对I和II型拓扑异构酶的作用。许多抗癌药物是以DNA拓扑异构酶为靶点使之形成可断裂的DNA蛋白复合物
B 细胞的表型检测
B 细胞表面有许多膜分子，包括细胞表面分化抗原和模型免疫球蛋白（smlg），在分化的不同阶段和不同的定居位置，B 细胞表达的表面分子不尽相同，因此可以根据表面分子的不同
CFSE检测人外周血T细胞体外扩增
CFSE 检测人外周血 T 细胞体外扩增的是指利用 CFSE 对活细胞进行荧光标记，从而用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面，这里仅介绍 CFSE 检测人外周血 CD4+ T
小鼠巨噬细胞极化的诱导及鉴定
巨噬细胞可以发生不同性质的功能活化（极化），成为具有不同表面分子和功能特征的 M1 和 M2 亚群。M1 型巨噬细胞是 Th1 型免疫反应过程中产生的效应巨噬细胞，主要由微生物
抗体效价测定实验
抗体效价测定实验是用于检测免疫血清效价高低。目前用于测定抗体效价的方法主要有3种：试管凝集反应、琼脂扩散实验和酶联免疫吸附实验（ELISA）。
单克隆抗体鉴定实验
单克隆抗体鉴定实验鉴定指标有些与多克隆抗体的相同, 所采用方法可通用; 但有些指标的鉴定则具有 McAb 的特殊性. 目前, 单克隆抗体鉴定实验主要有 7 种: 抗体效价鉴定实验
巨噬细胞趋化功能测定
巨噬细胞迁移是其在感染及损伤部位发挥免疫活性的首要条件，巨噬细胞趋化功能反映其迁移能力，是评价巨噬细胞免疫功能的主要指标之一。因此，对于巨噬细胞免疫功能研究有必
B 细胞的活化
B 细胞在特异性抗原、抗 Ig 抗体和（或）促有丝分裂原等的激活后，可发生活化、增殖。
小鼠体内自然杀伤细胞清除
NK 细胞过继回输一般经静脉注射；体内清除则可通过腹腔注射针对 NK 细胞的抗体，如 PK136 单抗、抗 asialo GM1 抗体和抗 Ly49 抗体等，清除 NK 细胞。各种抗体的特异性不同
人蜕膜免疫细胞的分离及纯化
蜕膜免疫细胞群是母胎免疫耐受的生物学基础，其构成极为特殊，主要由特殊类型的 NK 细胞（CD56 hrighCD16-）（～70%）、T 细胞（～10%）和单核巨噬细胞（～15%）等组成，它
免疫球蛋白类别转换的诱导和检测
在免疫应答的过程中，B 细胞接受不同抗原刺激后，可转换表达不同的重链恒定区基因，改变所产生的免疫球蛋白分子（immunoglobulin，Ig）的类型。LPS 可刺激鼠脾 B 细胞发生
化学发光免疫分析实验
化学发光（chemiluminescence，CL）是指伴随化学反应过程所产生的光辐射现象，大多数化学发光是以 O2 和 H2O2 作为氧化剂的氧化反应发光。化学发光反应包括两个关键步骤，
人血性单核巨噬细胞的诱导及分离
巨噬细胞（macrophages，MΦ）是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞，广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、神经系统以及结缔组织等，具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调
联合应用流式细胞术和基因芯片方法检测转录谱
流式细胞和基因表达谱两项技术具有很多共同特征：涉及复杂的高精尖设备；能够提供方法分析那些独特的、常规手段不易获得的细胞；需要大量的数据分析和归档功能。但是，在一
细胞因子的流式细胞术分析
细胞因子流式细胞术（Cytokineflowcytometry，CFC）是指应用抗细胞因子抗体来分析作为细胞活化标志细胞因子的流式细胞术的统称。此技术最常见的应用是对经体外短时间活化并
采用流式和影像细胞术多参数分析细胞凋亡
细胞凋亡是调节细胞的动态平衡，流式细胞仪的多参数特性可对同一标本中数个细胞凋亡指标同时进行测定，为分析不同细胞复杂的凋亡过程提供了一个有力的工具。目前，分析细胞
通过边缘群细胞表型检测和富集造血干细胞
通过边缘群细胞表型检测和富集造血干细胞，是基于一种重要染料 Hoechst 33342 可被干细胞泵出的特征，从小鼠骨髓分离出造血干细胞。目前，通过边缘群细胞表型检测和富集造
外周血单个核细胞的分离
免疫细胞分离技术正向着越来越「精细」的方向发展，免疫细胞亚群乃至微量免疫细胞分离和鉴定技术也已成熟并在实验室得到应用，如通过免疫磁珠可以获得大量高度纯化的各种免
单克隆抗体的制备
通过细胞融合技术（如 PEG 诱导法）将产生单一抗体的一种免疫动物 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，这种由单个克隆细胞产生的抗体分子称单克隆抗体（monoclonal
利用细胞示踪染料检测抗原特异性T细胞前体增殖的频数
T 细胞通过 T 细胞抗原识别受体识别特定抗原分子（表位），机体的 T 细胞池虽然可以针对多种抗原表位产生应答，但针对一个特定的抗原表位只有特异性 T 细胞才能产生应答。
造血干细胞特征分析
Hoechst 33342 和 Rhodamine123 染色分析造血干细胞特征是鉴于体外活体染料 Rhodamine123 (Rh123) 和 Hoechst 33342 (Ho) 已经被证实是分析原始造血干细胞 (PHSCs) 的特性
白细胞的多参数数据的采集和分析实验
现在已有几种软件包用于流式细胞仪数据分析。尽管每一个在处理数据时方法各异，但是基本策略是近似的。由于随着参数的增加，分析也变得愈加复杂，因此我们集中介绍一种经典
体内活化巨噬细胞
巨噬细胞是体内重要的天然免疫细胞，体外检测其功能并不能完全反映其体内行为，而检测某些药物的实际效应，又往往需要体内测定巨噬细胞活性。以细菌内毒素 LPS 活化巨噬细
采用流式细胞术评估淋巴细胞介导的细胞毒作用
细胞毒性淋巴细胞，是通过释放含有穿孔素和颗粒酶的颗粒和 (或) 通过 Fas-Fas 配体的相互作用杀伤靶细胞。目前，评估淋巴细胞介导的细胞毒作用的方法采用流式细胞术。
外周造血池动员的CD34NEG造血前体细胞表型和功能分析实验
外周造血池动员的 CD34NEG 造血前体细胞表型和功能分析是在无血清培养条件下，研究原始 CD34NEG CD38NEG LINNEG 细胞和CD34+ CD38NEG LINNEG 细胞增殖状态过程中 CD34 抗原
非同步化细胞群体的细胞周期分析
细胞周期的动态信息可以通过标记 5＇-BrdUrd 获得，BrdUrd 可以掺入到 DNA 的胸腺嘧啶位点上。检测 DNA 中的 BrdUrd 就可以计数 S 期的细胞，如果在不同时间间隔采集标本，
荧光共振能量转移的流式细胞分析
通过多种方法检测体内外分子间相互作用，使得对细胞各种生命过程的研究更加方便。一种用来研究与活细胞动态生命过程有关的、分子间相互作用的非常有价值的工具，就是利用荧
以荧光激活细胞分选技术为基础的哺乳动物蛋白-蛋白相互作用陷阱
哺乳动物蛋白-蛋白相互作用陷阱系统（MAPPIT）是基于对 I 型细胞因子受体信号传导机制的认识而设计的双杂交系统。「诱饵」多肽和「猎物」多肽与突变细胞因子受体嵌合体连在
通过BSL-3实验室分选活的、传染性细胞
随着高速分选有活性的、传染性细胞和治疗性细胞样品需求的增加，保护流式细胞仪操作员的安全也相应显得尤为重要。通过 BSL-3 实验室确保分选活的、传染性细胞之前的样品密
实体瘤DNA含量分析
流式细胞术 DNA 含量检测提供了一种快捷和可信的 DNA 倍体和肿瘤标本中细胞增殖分数分析方法。保存的和新鲜的标本都适用于该技术，在肿瘤的早期阶段，包括乳腺癌、结肠癌、
免疫共沉淀质谱
免疫共沉淀是一种用于从复杂混合物中富集或纯化特定蛋白质的技术，然后结合质谱可以鉴定特定蛋白的相互作用蛋白。
DNA和RNA的同步流式分析
流式细胞仪同步分析 DNA 和 RNA 分析提供了细胞的 DNA 含量和细胞转录状态的信息。这一分析方法可以通过利用与 DNA 结合的异染荧光物质以及由静电作用与单链 RNA 结合的异
斑点免疫渗滤实验
一种利用抗原或抗体进行相应特异性免疫反应的检测实验，是目前即时检验（POCT）的主要方法之一。
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