酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体（或SPA）检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高，特异性强。常用的是ELISA方法，间接法，双抗体法和抗原法。

操作方法

测定伤寒杆菌“O”抗体

材料与仪器

伤寒杆菌
邻苯二胺 碳酸钠 碳酸氢钠 PBS 磷酸氢二钠 柠檬酸
聚乙烯塑料反应板 离心机 摇床 培养箱

步骤

1.  抗原包被 取洁净的聚苯乙烯微量反应板，于每孔内加伤寒抗原0.1毫升（用包被缓冲液稀释，蛋白含量10微克/毫升），置37℃1小时，弃抗原液，用洗涤液3次每次3分钟。
2.  加待测血清 于每孔内分别加不同稀释度（如1：5，1：10，1：20…1：80）的待测血清，PBS空白对照，阴性对照血清，阳性对照血清各0.1毫升。置37℃30分钟，洗涤3次。
3.  加酶联A蛋白 于每孔加酶联A蛋白各0.1毫升，置37℃20分钟，洗涤3次。
4.  加临时配制的底物溶液各0.1毫升，置暗处15分钟。加2M碳酸1滴终止反应。
5.  结果判断：（肉眼判断） 若颜色于阴性对照相同则为阴性，若较阴性对照深则为阳性，根据颜色深浅以（+）表示。

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