实验方案(Protocols)
细胞膜糖类电镜显示实验
细胞膜糖类电镜显示实验
细胞膜糖类电镜显示实验可以用于:观察细胞膜上的糖蛋白和糖脂。其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术,此外,还有钌红染色法等。
操作方法
钌红染色法
原理
钌红染色法的原理是钌红可以与羧基(酸性基)通过静电结合,电镜下呈电子密度高染色。
材料与仪器
组织样品 步骤 1. 钌红原液配制 钌红溶于双蒸水,浓度为 10 mg/ml,60℃,振荡 10 min,3000 r/min 离心约 15 min,取上清冷藏保存。 2. 前固定液 3% 戊二醛 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸钠缓冲液(pH 7.3)2.5 ml,钌红原液 2.5 ml 顺序混合。 3. 后固定液 2% 锇酸 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸钠缓冲液(pH 7.3)2.5 ml,钌红原液 2.5 ml 顺序混合。 4. 标本切小(1 mm3),置于前固定液中室温 1 h。 5. 0.1 mol/L二甲胂酸钠缓冲液漂洗3次,每次 3 min。 6. 1% 锇酸后固定液中室温固定 2 h。 7. 漂洗、脱水、包埋同常规。 注意事项 细胞质膜用重金属染料如:钌红染色后,在电镜下可显示厚约10~20nm的结构,边界不甚明确. 常见问题 在植物病虫害组织切品染色中,可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
钌红原液 戊二醛 二甲胂酸钠缓冲液 锇酸
移液枪
来源于《免疫组织化学实验技术及应用》
危险品化学品经营许可证(带存储)