当抗原与其对应的抗体结合时，所生成的抗原抗体复合物能从溶液中将补体吸着此即谓补体结合。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液，故补体结合现象不能被肉眼看出来，因此必须借助溶血系统作为指示剂，来判定媒质中有无游离的补体。

操作方法

补体结合反应

材料与仪器

伤寒的抽出液
豚鼠血清 兔血清 绵羊红血球
小试管 试管架 水浴锅

步骤

一、预备试验
预备试验包括溶血素效价的滴定，补体效价的滴定，抗原效价的滴定及被检血清的处理。
1.  溶血素效价的滴定：按照下表加入各物 凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管（即1：4000倍稀释）0.5毫升溶血素为一个单位，在溶血反应中常用0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液，所以试验时应取1：2000倍稀释的溶液。
2.  补体单位滴定：依下表加入各试剂 能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位，上表中第3管（即0.3毫升），但因补体的效价可能有部分损失，故普通稍高的一管为实用单位，实际试验时须用两个实用单位。 上表的结果为： 补体标准单位：0.3毫升 补体实用单位：0.35毫升 补体两个实用单位：0.70毫升 因试验时是两个实用单位的补体0.5毫升，可依下列比例关系换算： 20：0.7=ⅹ：0.5 ⅹ= 14.3 即须将补体稀释14.3倍，用0.5毫升则含有两个实用单位。
3.  抗原的滴定 在用已知抗原测定未知抗体时，必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适浓度（反之用已知抗体测定未知抗原时，则需滴定抗体效价）  如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌，混有淋巴液或显著溶血时，常产生很强抗外体作用。又如试管、吸管不清洁，也可出现抗补体。若有抗补体发生，应抽血重试验。

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