IL-4主要是由TH细胞活化后产生的一种细胞因子。CT.4S细胞为IL-4的依赖细胞株，对IL-2呈现低反应性，其增殖反应与IL-4的活性呈正相关系。检测IL-4的生物学活性水平，可间接了解TH2细胞及与抗体介导的一些体液免疫的功能。

操作方法

IL-4生物学活性检测

材料与仪器

IL-4诱生
生理盐水 淋巴细胞分层液 FCS-IMDM培养液 PHA
细胞培养板 培养箱

步骤

一、IL-4生物学活性测定   CT.4S细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓
加待测样品和标准品③
↓ 加3H-TdR④ ↓
收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线，计算待测样品的IL-4的活性单位⑥

注意事项

①用0.25%胰酶消化、收集生长旺盛的贴壁CT.4S细胞；经Hank’s液离心洗涤2次后，10%FCS-RPMI-1640培养液调制细胞浓度为1×105/ml。②接种细胞于96孔细胞培养板，每孔0.1 ml。③加入适当稀释的待测样品和标准品，每孔0.1 ml。每个样品设3个复孔，同时设培养液对照。

37度，5%CO2孵育48小时。④与⑤同IL-2。⑥以cpm为纵坐标，对应的不同稀释浓度IL-4标准品浓度为横坐标，在半对数图纸上绘制出标准曲线，再从标准曲线上查出待测样品中的IL-4含量。关键点在IL-4诱生过程中，常同时产生一定量的IL-2，将影响IL-4的检测结果。因此，最好采用IL-2mAb吸附剂除去IL-2。

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