实验方案(Protocols)
乙二醛 /DMSO 变性琼脂糖凝胶电泳
乙二醛 /DMSO 变性琼脂糖凝胶电泳
在微酸的条件下,乙二醛的两个乙醛基与鸟苷的亚氨基相互作用形成环状化合物,抑制了链间 Watson-Crick 键的形成,使 RNA不能形成稳定的二级结构,它在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率与其大小的对数成正比。
操作方法
乙二醛/DMSO变性琼脂糖凝胶电泳
材料与仪器
10XBPTE 电泳缓冲液 二甲基亚砜(DMSO) 去离子乙二醛 乙一醛反府混合液 上样缓冲液 步骤 (一)村料与设备 1)10XBPTE 电泳缓冲液:100 mmol/LPIPES,300 mmol/LTris,lOmmol/LEDTA(pH8.0) 2) 二甲基亚砜(DMSO) 3) 去离子乙二醛 4) 乙一醛反府混合液:6 mlDMSO,2 ml 去离子乙二醛,2 mL10XBPTE 电泳缓冲液,0.6 ml80% 甘油,0.2 ml 溴化乙锭(10 mg/ml) 5) 上样缓冲液:50% 甘油.10 mmol/L 磷酸钠 (PH7.0),0.25% 溴酚蓝,0.25% 二甲苯青 6) 水平电泳装置 1) 制备凝胶:用 1XBPTE 电泳缓冲液配制 1.2% 的琼脂糖凝胶 2) 电泳:向 1〜2ulRNA 样品 (总共 10ug)中加入 10ul 乙二醛反应混合液,55℃ 保温lh,冰浴 10 min, 离心,加入 1〜2ul 上样缓冲液,立即上样电泳,用 1XBPTE 作电泳缓冲液,在 60℃ 恒压下电泳,当溴酚蓝迁移至 1/2〜2/3 时,停止电泳。 3) 观察结果:在紫外灯下观察结果 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
水平电泳装置
(二)操作方法
危险品化学品经营许可证(带存储)