这种方法适用于具有临位二醇结构的材料，如纤维素、琼脂糖、葡聚糖。高碘酸盐氧化可形成乙醛基团，与氨基基团反应形成希夫碱，并通过硼氢化还原而稳定。来源：《酶学实验手册》

操作方法

基本方案

材料与仪器

纤维素粉
NaHCO3-NaIO4 碳酸钠缓冲液。NaBH4 溶液 乙酸钠-乙酸 PBS

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

将 2 g 纤维素悬浮于 40 ml 0.1 mol/L NaHCO₃-0.06 mol/L NaIO₄ 中，黑暗条件下放置 2 h，然后在玻璃料上用 0.1 mol/L pH 9.0 碳酸钠缓冲液冲洗。在 40 ml 缓冲液中加入待固定的蛋白质（约 1 mg/ml），室温振荡过夜。为去除希夫碱，在溶液中加入 2 ml NaBH₄，室温振荡 30 min。之后再次加入 2 ml NaBH₄，室温振荡 30 min。用 0.1 mol/L pH 4.0 乙酸盐-乙酸、PBS 和 0.05％ 的吐温 20 冲洗固体材料。

常见问题

试剂：

0.1 mol/L NaHCO₃-0.06 mol/L NaIO₄（NaHCO₃，Mr＝84.0；NaIO₄，Mr＝213.9；8.4 g NaHCO₃ ，12.8 g NaHCO₃ 溶于 100 ml H₂O）

0.1 mol/L 碳酸钠缓冲液（NaHCO3－Na2C03），pH 9.0

NaBH₄ 溶液（0.1 g NaBH₄ 溶于 10 ml 0.1 mol/L NaOH，现配）

0.1 mol/L 乙酸钠-乙酸，pH 4.0

PBS（磷酸缓冲液：10 mmol/L 磷酸二氢钾-钠，pH 7.2，0.8％ NaCl，0.02％ KCl）

0.05％ 吐温 20 溶于 PBS

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