掌握中性红法计数嗜碱性粒细胞原理及技术

操作方法

中性红法检测嗜碱性粒细胞直接计数实验

原理

用吸中性红稀释将血液一定的倍数．同时破坏红细胞并使嗜碱性粒细胞染成砖红色．然后滴入计数室计数一定范围内嗜碱性粒细胞数可求得每升血液中嗜碱性粒细胞数

材料与仪器

中性红染液 皂素 甲醛

步骤

三、实验试剂：

l、贮存液　

①、PH5.4   0.1mol/L

②、0.12g/L中性红染液

③、4Og皂素

④、40%甲醛

2、工作液：

①中性红皂素溶液于1mL新过滤的中性红染料中，加40g/L皂素溶液0.25mL

②甲醛固定液：于0.5mL甲醛中加磷酸盐缓冲液3.5ml．

四、实验操作：

1、于小试管中加入中性红皂素溶液160ul毛细血管血20ul混匀．再加甲醛固定液20ul，使血液稀释10倍．

2、将混匀的悬液滴入计数板的两个计数室中，为防止蒸发应放在湿合静置1min，使嗜碱性粒细胞下沉着色3、在低倍镜下计数两个计数室所有大方格内嗜碱性粒细胞数五、计算：

嗜碱性粒细胞数/L＝（18个大方格内嗜碱性粒细胞数/18）×10×10×106正常参考值：0.02－0.05×10⁹/L

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