Name: 亮氨酸脱氢酶 来源于芽孢杆菌属
SKU: L1493003
Availability: InStock

亮氨酸脱氢酶来源于芽孢杆菌属

CAS: 9082-71-7 货号: L1493003 EC号: EC 1.4.1.9

概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器

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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,天然,生物活性,高性能级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Leucine Dehydrogenase is a member of the amino acid dehydrogenase family. Leucine Dehydrogenase is a nicotinamide adenine dinucleotide hydrogen (NADH)-dependent oxidoreductase. It is involved in catalyzing the reductive amination of aliphatic 2-oxo-acids to their respective L-amino acids.

PREPARATION and SPECIFICATION

Appearance:	White amorphous powder, lyophilized
Activity:	≥20U/mg enzyme powder (containing approx. 70 % of stabilizers)
Contaminants:	Leucylpeptide decomposing enzymes
(Leu-Val):	≤1.0×10⁻²%
(Leu-Gly-Gly):	≤1.0×10⁻²%
NADH oxidase:	≤ 1.0×10⁻²%
Stabilizers:	2-Mercaptoethanol, L-cysteine, dithiothreitol, ethylenediaminetetraacetate

PROPERTIES

Stability	Stable at −20 ℃ for at least one year	(Fig1)
Molecular weight	245,000
Michaelis constants	1.0×10⁻³ M (L-Leucine), 3.9×10⁻⁴ M (NAD⁺), 3.5×10⁻⁵ M (NADH), 3.1×10⁻⁴ M [α-Ketoisocaproate (α-KIC)], 2.0×10⁻¹ M (NH₃)
Structure	6 subunits per enzyme molecule
Inhibitors	Na₂S, Hg²⁺, Cu²⁺, Co²⁺, Mg²⁺, p-chloromercuribenzoate
Optimum pH	10.5–10.8 (L-Leu→α-KIC), 9.4 (α-KIC→L-Leu)	(Fig3)
Optimum temperature	above 70 ℃	(Fig4)
pH Stability	pH 5.5–10.5 (25 ℃, 20 hr)	(Fig5)
Thermal stability	below 60 ℃ (pH 6.9, 10 min)	(Fig6)
Substrate specificity	(Table 1)

APPLICATIONS

This enzyme is useful for enzymatic measurement of L-leucine and the activity of leucine amino-peptidase.

ASSAY

1. Principle

The formation of NADH is measured at 340 nm by spectrophotometry.

2. Unit definition

One unit causes the formation of one micromole of NADH per minute under the conditions detailed below.

3. Method

3.1 Reagents

A. L-Leucine solution: 20mM L-leucine in 0.2M glycine-KCl-KOH buffer, pH 10.5 (Prepare freshly)

B. NAD⁺ solution: 12.5mM (Should be prepared fresh)

C. Enzyme diluent: 25mM K-phosphate buffer, pH 7.2

3.2 Procedure

① Prepare the following reaction mixture in a cuvette (d＝1.0cm) and equilibrate at 37 ℃ for approximately 5 minutes.

3.0 mL	Substrate solution	(A)
0.3 mL	NAD⁺ solution	(B)

Concentration in assay mixture

Glycine buffer	0.18 M
L -Leucine	18 mM
NAD⁺	1.1mM

② Add 0.05 mL of the enzyme solution* and mix by gentle inversion.

③ Record the increase in optical density at 340 nm against water for 2 to 3 minutes with a spectrophotometer thermostated at 37 ℃, and calculate the ΔOD per minute from the initial linear portion of the curve (ΔOD test).

At the same time, measure the blank rate (ΔOD blank) using the same method as the test except that the enzyme diluent (C) is added instead of the enzyme solution.

*Dissolve the enzyme preparation in ice-cold enzyme diluent (C) (approx. 5 mg/mL) and dilute to 0.25−0.33 U/mL with the same buffer, immediately before the assay.

3.3 Calculation

Activity can be calculated by using the following formula:

Vt	: Total volume (3.35 mL)
Vs	: Sample volume (0.05 mL)
6.22	: Millimolar extinction coefficient of NADH (cm²/micromole)
1.0	: Light path length (cm)
df	: Dilution factor
C	: Enzyme concentration in dissolution (c mg/mL)

Table 1. Substrate Specificity of Leucine dehydrogenase

Substrate(10mM)	Relative activity(%)	Substrate(10mM)	Relative activity(%)

L-Leucine	100	α-Ketoisocaproate	100
L-Valine	74	α-Ketoisovalerate	126
L-Isoleucine	58	α-Ketovalerate	76
L-Norvaline	41	α-Ketobutyrate	57
L-Norleucine	10	α-Ketocaproate	46
L-Methionine	0.6	Inert: Pyruvate, α-Ketoglutarate, Phenylpyruvate, Oxaloacetate, Glyoxylate
L-Cysteine	0.3
Inert: L-Ala, L-Glu, L-Thr, L-Ser, Gly, L-Phe, L-Lys, L-Arg, D-Leu, D-Val, D-Ile

规格

产品名称

亮氨酸脱氢酶来源于芽孢杆菌属

别名

L-亮氨酸脱氢酶

英文别名

L-Leucine Dehydrogenase | L-Leucine:NAD+ oxidoreductase (deaminating) | LeuDH | dehydrogenase, leucine | LDH

规格或纯度

生物活性, ActiBioPure™, 天然, 高性能, EnzymoPure™, ≥20U/mg enzyme powder

生化机理

Catalyzes the reversible deamination of L-leucine to 4-methyl-2-oxopentanoate.

生物活性

≥20U/mg enzyme powder

种属

芽孢杆菌属(Bacillus sp.)

氨基酸

245 kDa

来源

天然

CAS编号和信息

9082-71-7

酶学委员会编号

EC 1.4.1.9

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

冻干(Lyophilized)

浓度

≥20U/mg enzyme powder

复溶

Reconstitute in 25 mM K-phosphate buffer, pH 7.2.

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（12个月）；复溶后建议分装，避免反复冻融。

单位定义

One unit causes the formation of one micromole of NADH per minute under the conditions detailed below.

技术文档

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📊 产品数据表

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该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ26F0434291	分析证书	L1493003
ZJ26F0434303	分析证书	L1493003
ZJ26F0434290	分析证书	L1493003

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l1493003 leucine dehydrogenase from bacillus sp product manual.pdf

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