Lambda 核酸外切酶

Name: Lambda 核酸外切酶
SKU: L747582
Availability: InStock

货号: L747582

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级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无RNA酶 ? 无菌 ? ≥95%(SDS-PAGE) 5.0 U/μL

别名

Lambda 核酸外切酶 | λ核酸外切酶

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

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L747582-1KU

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概述规格名称和识别符技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性级提供 ≥95%(SDS-PAGE) 纯度，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

阿拉丁生产的Lambda Exonuclease，即λ Exonuclease，λ核酸外切酶或Lambda核酸外切酶，是一种特异性作用于DNA的5´→3´核酸外切酶，能选择性地沿5´→3´方向消化5’端磷酸化的双链DNA，对单链DNA和5’端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低，不能从DNA的切刻或缺口处起始消化1, 2]。 Lambda Exonuclease对5´-0H端的切割速度比5´-P端慢约20倍；对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。Lambda Exonuclease是由阿拉丁自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组酶。阿拉丁生产的Lambda Exonuclease对一条链带有5´磷酸化修饰的双链线性DNA消化的效果参考图1。图1. 阿拉丁生产的Lambda Exonuclease 对仅一条链带有5´磷酸化修饰的双链线性DNA消化的效果图。在20µl反应体系(67mM Glycine-KOH pH9.4, 2.5mM MgCl2, 50µg/ml BSA)中，加入5pmol 26bp双链线性DNA片段(其中一条核酸链带有5´磷酸化修饰，另一条链无5´磷酸化修饰)，以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的Lambda Exonuclease，37℃孵育30分钟进行反应，反应完毕后加入10mM EDTA终止反应，并在75℃条件下孵育10分钟进行灭活处理。取出10μl反应产物，加入2μl 6X DNA Loading Buffer，然后进行10%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。用1X TBE作为电泳液，180V电泳40分钟，之后用D0128/D0130 NA-Red (1:2000稀释)室温染色7分钟，即可拍照观察结果。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的降解带有5´磷酸化修饰的双链线性DNA的效果。图中效果仅供参考。阿拉丁生产的Lambda Exonuclease对5´磷酸化修饰的单链线性DNA消化的效果参考图2。图2. 阿拉丁生产的Lambda Exonuclease 对5´磷酸化修饰的单链线性DNA消化的效果图。在20µl反应体系(67mM Glycine-KOH pH9.4, 2.5mM MgCl2, 50µg/ml BSA)中，加入10pmol 26nt单链线性DNA片段(5´磷酸化修饰)，以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的Lambda Exonuclease，37℃孵育30分钟进行反应，反应完毕后加入10mM EDTA终止反应，并在75℃条件下孵育10分钟进行灭活处理。取出10μl反应产物，加入2μl 6X DNA Loading Buffer，然后进行10%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。用1X TBE作为电泳液，180V电泳40分钟；之后用D0128/D0130 NA-Red (1:2000稀释)室温染色7分钟，即可拍照观察结果。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的降解带有5´磷酸化修饰的单链线性DNA的效果。图中效果仅供参考。阿拉丁生产的Lambda Exonuclease对无5´磷酸化修饰的双链线性DNA消化的效果参考图3。图3. 阿拉丁生产的Lambda Exonuclease 对无5´磷酸化修饰的双链线性DNA消化的效果图。在20µl反应体系(67mM Glycine-KOH pH9.4, 2.5mM MgCl2, 50µg/ml BSA)中，加入5pmol 26bp双链线性DNA片段(无5´磷酸化修饰)，以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的Lambda Exonuclease，37℃孵育30分钟进行反应，反应完毕后加入10mM EDTA终止反应，并在75℃条件下孵育10分钟进行灭活处理。取出10μl反应产物，加入2μl 6X DNA Loading Buffer，然后进行10%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。用1X TBE作为电泳液，180V电泳40分钟；之后用D0128/D0130 NA-Red (1:2000稀释)室温染色7分钟，即可拍照观察结果。如图所示，本产品与N公司的产品相比，均不能有效的消化无5´磷酸化修饰的双链线性DNA。图中效果仅供参考。

用途：

生成单链PCR产物用于DNA测序；DNA单链构象多态性(SSCP)分析；滚环扩增；从双链DNA片段生成单链DNA；PCR产物的克隆；质粒制备净化。

来源：

纯化自携带编码大肠杆菌Lambda核酸外切酶基因的E.coli重组菌株。

酶储存溶液：

25mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, (pH8.0 @25℃)。10X Reaction Buffer: 670mM Glycine-KOH, 25mM MgCl2, 500µg/ml BSA, (pH9.4 @25℃)。

失活或抑制：

加入EDTA至终浓度为至少10mM，75℃孵育10分钟可使Lambda Exonuclease失活。

注意事项：

Lambda Exonuclease的最佳反应温度是37℃，在75℃条件下孵育10分钟可使其完全失活。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1.参考下表在冰浴中配制反应体系(以50μl体系为例)。 Reagent Volume 10X Reaction Buffer 5μl DNA Sample Xμl (up to 5μg) Lambda Exonuclease (5U/μl) 1μl (5U) Ultrapure Water Up to 50μl Total Volume 50μl 2.移液器吹打混匀，低速离心使粘附在管壁上的液体沉降至管底。 3.反应条件：37℃孵育30分钟。 4.终止反应：加入EDTA至终浓度为10mM。 5.热失活：75℃孵育10分钟使Lambda Exonuclease失去活性。 6.将酶切消化后的产物进行琼脂糖凝胶或聚丙烯凝胶电泳分析，拍照观察并分析酶切效果。 7.如果需要进一步纯化处理后的样品，推荐使用以下几种方式之一进行纯化： a.柱纯化，推荐使用PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒进行。 b.从琼脂糖凝胶中回收DNA样品，推荐使用DNA凝胶回收试剂盒。 c.也可酌情进行苯酚/氯仿抽提，然后进行乙醇沉淀。常见问题： 1.T5 Exonuclease与Lambda Exonuclease 有何不同？与Lambda Exonuclease不同，T5 Exonuclease可以降解带缺刻的环状双链DNA。T5 Exonuclease也作用于单链DNA，而Lambda Exonuclease对单链DNA的降解效率较低。 2.T7 Exonuclease与Lambda Exonuclease 有何不同？ T7 Exonuclease与Lambda Exonuclease不同，能作用于缺刻处且进行性较低，且对单链DNA的降解活性甚至低于Lambda Exonuclease。由于它的进行性较低，因此T7 Exonuclease对于单向嵌套删除可能更有用。在使用T7 Exonuclease时，可通过稀释T7 Exonuclease来控制反应速率。而在使用高度进行性的酶，如Lambda Exonuclease时，稀释使用会产生完全消化的产物和未消化的底物的混合物。 3.Exonuclease I能否与双链核酸外切酶一起使用来清理质粒制剂？ Exonuclease I可与Lambda Exonuclease一起使用以清理质粒制备物。核酸外切酶III和T7核酸外切酶也有效，但会损坏有缺刻的质粒。虽然可以使用核酸外切酶I，但我们建议在质粒制备后使用核酸外切酶V (RecBCD)去除染色体DNA。参考文献： 1.Little JW. J Biol Chem. 1967 Feb 25;242(4):679-86. 2.Mitsis PG, Kwagh JG. Nucleic Acids Res. 1999 Aug 1;27(15):3057-3063.

规格

别名

Lambda 核酸外切酶 | λ核酸外切酶

英文别名

λ Exonuclease | exo | lambdap24

规格或纯度

无动物源, 无载体, ActiBioPure™, 生物活性, EnzymoPure™, 无菌, 无RNA酶, ≥95%(SDS-PAGE), 5.0 U/μL

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

英文名称

Lambda Exonuclease

单位定义

One unit is defined as the amount of enzyme required to produce 10nmol of acid-soluble deoxyribonucleotide from double-stranded substrate in a total reaction volume of 50μl in 30minutes at 37℃ in 1X Lambda Exonuclease Reaction Buffer with 1μg sonicated du

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

纯度

≥95%(SDS-PAGE)

产品线

生物产品

名称和识别符

分子类型

酶

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0723584	分析证书	L747582
ZJ25F0723583	分析证书	L747582

技术文档和文章

l747582 lambda 核酸外切酶中文说明书.pdf

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溶液计算器

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质量

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体积

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体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

本产品的纯度是多少？如何测定？

本产品的纯度为 ≥95%，采用SDS-PAGE测定。批次的具体数值以分析证书（COA）为准。

什么是「无动物源」？

「无动物源」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

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