计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,用于化学发光 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
ATP生物发光技术的原理是荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷(ATP)和O2为底物,在Mg2+存在时,能将化学能转化为光能。ATP既是荧光素酶催化发光的必需底物,又是所有生物生命活动的能量来源。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系。本试剂盒采用生物发光法,利用Firefly luciferase(萤火虫荧光素酶)催化底物——荧光素的转化,高效利用ATP的能量,发射出光子。发光信号与存在的ATP量呈正比,而ATP与存在于培养基中的细胞数目直接呈正比。
ATP发光法细胞活力检测试剂盒为多孔板而设计,是进行自动化高通量筛选(HTS),细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂直接加入含有血清的培养细胞中,无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。均质检测的"加样-混合-检测"的操作方案使得细胞裂解和产生的发光信号与存在的ATP量成正比,而ATP量直接与培养物中的细胞数量成正比。独特的均质检测方案避免了那些需要多个步骤的ATP检测方法可能会引入的误差。
产品特点:
1、简化了细胞活性检测步骤:均质的"加样-混合-检测"方案减少了其它同类检测所需的操作步骤。
2、细胞用量更少:可准确地检测到低于常用的比色法和荧光法的检测低限的细胞数,减少了每个检测反应所需的细胞数。
3、迅速获得结果:加入试剂后10分钟就能获得数据。
4、可自行选择检测方案:可用于多种类型的多孔板操作。可用发光检测仪或CCD成像设备记录数据。
5、可连续处理培养板:发光信号稳定,样品可进行批量处理。
使用说明:
1、细胞的准备
使用适合进行化学发光检测的96孔板,每孔接种100μl细胞(如使用384孔板,每孔接种25μl细胞,具体用量视不同类型的384孔板而定),并确保检测时每孔的细胞数量在5万个以内(如使用384孔板宜控制在1万个以内),同时设置不含细胞的培养液孔作为阴性对照,按照细胞培养的常规方法培养细胞。如有需要,可加入药物处理细胞。此外,如有必要,也可以设置细胞的浓度梯度,以便后续确定试剂盒的使用效果。
2、检测试剂的准备
2.1 融解冻存的ATP发光法细胞活力检测试剂,如有必要可适当分装该试剂。
2.2 按照96孔板每孔100μl(384孔板每孔25μl)的量,取适量ATP发光法细胞活力检测试剂,平衡至室温。
3、细胞活力检测
3.1 取出细胞培养板在室温平衡10分钟(通常不宜超过30分钟)。
3.2 96孔板每孔加入100μl ATP发光法细胞活力检测试剂(384孔板每孔25μl)。
3.3 室温振荡2分钟,以促进细胞的裂解。
3.4. 室温(约25℃)孵育10分钟,使发光信号趋于稳定。
3.5 使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光检测。请根据仪器要求设置相应的参数,每个孔的检测时间一般为0.25-1s或更长时间,具体需根据仪器的检测灵 敏度进行适当的调整。
3.6 根据化学发光读数直接计算细胞的相对活力,或根据ATP标准曲线计算出ATP的量从而计算出细胞的相对活力。
注:检测效果因细胞的种类不同而有所不同,对于一些ATP含量特别高的细胞,在细胞数量达到50,000个后可能会不呈线性相关,但化学发光读数还是会继续升高。
注意事项:
1、荧光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前细胞和检测试剂均需平衡至室温后再进行测定。请勿室温存放。
2、检测试剂请混匀后使用。
3、本试剂盒的检测试剂中含有荧光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。为取得良好的使用效果,第一次解冻后可适当分装保存,但需注意分装的容器不能有ATP污染。
4、待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰荧光素酶反应,从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。
5、检测时须使用适合于细胞培养的白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | L772127 | |
| 分析证书 | L772127 |